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《西南农业大学》 2004年
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柑桔皮提取液抗氧化及其它保健功能研究

丁晓雯  
【摘要】: 柑桔类水果是全世界产量最大的水果之一。皮渣作为其主要副产物占柑桔总量的20%-40%,具有较大的利用价值。本文以产量较大的柚皮、甜橙皮为主要研究对象,详细研究了它们经纤维素酶酶解的水提取液和70%乙醇、正丁醇、乙酸乙酯提取液的成份含量、在小鼠体内外的抗氧化作用、降脂作用、对铅、亚硝酸盐、亚硝胺的作用并对它们的安全性进行了评价。现将研究结果报告如下: 1.用还原糖作评价指标,通过单因素实验和正交实验,得出影响纤维素酶酶解柚皮效果的主要因素是:酶用量、酶解溫度>酶解时间>pH,最佳酶解条件为当控制底物浓度2%,反应体积为100 ml时,酶用暈3 mg,酶解温度50℃,酶解时间12 h,pH 4.8。用该条件水解柚皮,所得还原糖为21.56%。影响纤维素酶酶解橙皮的主要因素是酶用量>酶解温度>酶解时间>pH,最佳酶解条件与柚皮相同,用该条件酶解橙皮,所得还原糖量为22.33%。 2.柑桔皮及提取液中含有丰富的还原糖、纤维素、果胶、维生素C、类黄酮和类胡萝卜素、微量元素。经纤维素酶酶解后,所得的柑桔皮提取液中,除纤维素含量下降外,其它成分的含量均有不同程度的升高。 3.柑桔皮水提液是强氧化剂H_2O_2的良好清除剂。未酶解的柚皮水提液对H_2O_2有很强的清除作用,对于1.0ml、0.1mol/L的H_2O_2真的半数清除浓度(IC_(50))=70.2 mg(鲜皮)/ml,橙皮水提液的作用较差,IC_(50)=326.5 mg(鲜皮)/ml,二种柑桔皮酶解后的水提液对H_2O_2的清除作用均增强,其IC_(50)分别为46.7 mg(鲜皮)/ml和233.4 mg(鲜皮)/ml,且清除H_2O_2的作用呈一定的剂量—效应关系。 柚皮、甜橙皮正丁醇、乙酸乙酯提取液、甜橙皮70%乙醇提取液对H_2O_2基本无清除作用。柚皮70%乙醇提液却对H_2O_2有较强的清除作用,其IC_(50)=133.8 mg(鲜皮)/ml,强于甜橙皮水提液对H_2O_2的清除能力。 根据IC_(50)大小可作出柑桔皮提取液清除H_2O_2作用能力的排序是:酶解后柚皮水提液>未酶解柚皮水提液>柚皮70%乙醇提液>酶解后橙皮水提液>未酶解橙皮水提液。 在柑桔皮提取液所处的实验条件和浓度下,纯的Vc和葡萄糖对H_2O_2无清除作用;β-胡萝卜素对H_2O_2有一定的清除作用但作用能力较弱;主要是芦丁对H_2O_2有清除作用,且有剂量—效应关系。由此可推断,柑桔皮提取液中对H_2O_2起清除作用的主要是黄酮类化合物。 4.用Fenton反应检测了柑桔皮提取液对·OH的清除作用。未酶解柚皮、橙皮水提液对·OH有很强的清除作用,IC_(50)分别为3.05、9.24 mg(鲜皮)/ml;酶解后的IC_(50)分别为0.98 mg(鲜皮)/ml和2.0 mg(鲜皮)/ml,即酶解后柑桔皮水提液清除·OH的能力明显增强。 柚皮70%乙醇提取液清除·0H的IC_(50)为16.2 mg(鲜皮)/ml;橙皮70%乙醇提取液对·OH几乎 西南农业大学二00四届博十学位论文 无清除作用。 橙皮、抽皮止J一醇提取液对·0H也有较强的清除作用,其IC、,分别为4.4、9.Zmg(鲜皮)、ml。 橙皮、抽皮乙酸乙醋提取液对·0H有清除作用,其IC、、分别相当T. 4.6、30mg(鲜皮),耐。 根据I么,大小可作出柑桔皮提取液清除·0H作用能力的排序是:酶解后抽皮水提液酶解后 橙皮水提液未酶解抽皮水提液橙皮正一J一‘醇提取液)橙皮乙酸乙酷提取液未酶解橙皮水提液、抽 皮正丁醇提取液袖皮70%乙醇提液袖皮乙酸乙醋提取液。 在柑桔皮提取液所处的实验条件和浓度下,纯的vc对·0H几乎没有清除作用,而葡萄糖(l5%) 和芦丁、p一胡萝卜素对佃却有较强的清除作用。当15%葡萄糖在反应体系中加入量为100林1对OH 的清除率为70.42%;浓度为900“g/m1的芦一J一‘加入量为100,1时,对·0H的消除率为89.20%, 再增加葡萄糖、芦丁的加入量,清除率也基本不变;p一胡萝卜素(17.05ug/ml)对·0H的清除能 力最强,当加入量为50 pl即可将反应体系中的·0H完全清除。 在该实验条件下,当纯的芦丁与Vc、葡萄糖、p一胡萝卜素混合,p一胡萝卜素与vc、葡萄糖 混合,Vc与葡萄糖混合,都可使它们对·0H的清除能力大大增强,这也表明芦一J’、Vc、葡萄糖、 p一胡萝卜素对清除·OH有很强的协同作用。这也说明柑桔皮提取液对·0H的清除作用是各个成份 相互协同作用的结果。 5.利用光照核黄素反应检测了柑桔皮提取液对02的清除作用。未酶解袖皮、橙皮水提液对02有 较强的清除作用,IC,,分别为13.64、18.99mg(鲜皮)/ml,酶解后它们的IC,,分别为8.82、11,34、 mg(鲜皮)/ml,即酶解后抽皮、橙皮水提取清除0一2的能力增强。 抽皮、橙皮70%乙醇提取液对02也有清除作用,但较水提液弱,它们的工C。,分别为49.82、63.49 吨(鲜皮)/ml,且它们的加入量与清除率之间旱线性相关,当加入量为100 pl时,它们对0: 的清除率分别为98.8%和84.1%: 抽皮、橙皮正一]‘醇提取液对02的工C、,分别为10.33、53‘52mg(鲜皮)/ml,橙皮提取液的作 用能力相对较弱。抽皮、橙皮乙酸乙酷提取液清除02的IC、分别为24.40、51.46 mg(鲜皮)/ml, 清除作用也较弱。 根据IC加大小可作出柑桔皮提取液清除02作用能力的排序是:酶解后
【学位授予单位】:西南农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:TS202

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