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《西南农业大学》 2005年
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农杆菌介导的籼稻遗传转化研究

肖向文  
【摘要】:水稻是世界上最重要的粮食作物之一,世界上约40%人口的主要食粮依赖于水稻。在我国其地位仅次于小麦。传统的遗传育种已为水稻提高产量和改善品质作出了重要贡献,但由于稻属种质资源的匮乏、生态环境的变化及常规育种方法的局限性,给水稻进一步的遗传改良带来一定的困难。随着分子生物学研究的深入,基因的分离、克隆和重组技术以及转基因技术的日趋成熟,遗传转化已成为水稻遗传改良的一种有效手段。水稻功能基因组研究以及后续的大规模基因工程都必将依托于高效的水稻遗传转化,因此水稻遗传转化正越来越成为水稻分子生物学研究和遗传改良的重要技术基础。农杆菌介导转化法因其操作简便、外源基因插入拷贝数少、导入的外源基因较为完整等特点而成为最具发展潜力的植物遗传转化方法。 虽然目前水稻的三个亚种籼稻、粳稻和爪哇稻都已建立了农杆菌遗传转化体系,一些抗虫、抗病、抗逆境、品质改良基因也相继通过农杆菌介导法转入到不同水稻品种中。然而,由于水稻品种间遗传差异很大,且对转化反应的基因依赖性强,从而增大了其遗传转化的复杂性和随机性。尤其是对于籼稻品种,却仍存在较大困难,虽有一些报道籼稻转化成功的例子,但是转化率却很低,而且仅限于特定的品种,还未能找到适合于所有籼稻品种的通用转化技术平台。因此,建立高效稳定的水稻遗传转化体系仍有许多问题需要作细致深入的研究。籼稻品种占整个水稻品种的80%以上,在绝大多数南方水稻主产区主栽品种均为籼稻,因此,利用遗传转化技术对其进行改良具有重大的社会现实意义。 本论文选用了重庆地区有重要育种价值的5个籼型恢复系品种缙恢10(JH10)、缙恢35(JH35)、缙恢101(JH101)、蜀恢527(SH527)和R21,研究了影响根癌农杆菌介导的籼稻遗传转化的因素,并初步建立了较为优化的、适合本实验材料的水稻遗传转化体系,并从大量受体材料中筛选获得了2个水稻品种的51个推测为转基因的再生植株,再生植株经PCR扩增分析、GUS组织化学检测,初步证实外源基因已整合到水稻的基因组中,为进一步开展水稻的功能基因研究和利用基因工程技术进行水稻的遗传改良奠定了重要基础。 主要结论如下: 1.研究了影响籼稻愈伤组织诱导和再生的因素,发现培养基的种类、激素配比、基因型、水分胁迫处理都影响着籼稻的愈伤诱导和再生分化;建立了JH35、JH10、SH527这3个品种较为成熟的再生体系。 (1) 在籼稻愈伤诱导中,添加一定浓度的2,4-D是必要条件,2,4-D的适宜浓度为2-2.5mg/L,单独使用2,4-D即可达到较好的诱导效果;2,4-D与其他激素(如BA或KT)的配合使用,会降低愈伤诱导率,但是愈伤质量反而有一定程度的改善,但最佳激素配比还需
【学位授予单位】:西南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S511.21

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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2 黄自然;张卫民;黄亚东;;蚕抗菌肽研究开发三十年的回顾与展望[A];格莱姆抗菌肽——抗菌肽开发与应用技术研讨会论文集[C];2009年
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8 刁现民;王永芳;李伟;王鹏;智慧;陈振玲;段胜军;;抗除草剂基因Bar转化谷子研究[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
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1 李望丰;SsNHX1基因在紫花苜蓿中的表达及其耐盐性研究[D];东北师范大学;2010年
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8 张立全;利用转基因技术创建紫花苜蓿耐盐新种质的研究[D];内蒙古大学;2011年
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10 佘茂云;小麦组织培养再生相关基因克隆及分子特性分析[D];中国农业科学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张庆福;枳精氨酸脱羧酶基因(PtADC)转化烟草提高抗脱水研究[D];华中农业大学;2010年
2 兰楠;利用天南星科凝集素构建内生工程真菌及其抗虫防病效果研究[D];华中农业大学;2010年
3 刘红梅;农杆菌介导百子莲抗寒基因CBF1高效转化体系的建立[D];华中农业大学;2010年
4 魏礼玲;MYB转录因子家族相关EST干涉载体构建及遗传转化的研究[D];华中农业大学;2010年
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6 刘鑫;利用分子标记辅助选择培育和评价三种BT基因(CRY1AC、CRY1C~*和CRY2A~*)抗虫水稻[D];华中农业大学;2010年
7 卢增斌;防治水稻螟虫单项技术措施的评价及储备技术—转基因水稻对非靶标生物影响的研究[D];华中农业大学;2010年
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10 卢小三;两个杨树无性系再生体系的建立及抗虫基因Cry1C+9C转化的初步研究[D];华中农业大学;2010年
【同被引文献】
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2 胡凯;张立军;白雪梅;崔玉娜;阮燕晔;;植物组织培养污染原因分析及外植体的消毒[J];安徽农业科学;2007年03期
3 段永波;赵丰兰;赵德刚;;转ipt基因水稻种子萌发及苗期耐冷生理研究[J];安徽农业科学;2007年06期
4 曾建军;曾川蓉;李晓红;;转基因作物安全性研究回顾与展望[J];安徽农业科学;2007年22期
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前4条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
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10 闫硕;宋玉;王广东;;农杆菌介导的观赏向日葵高效遗传转化体系的建立[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
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2 赵丹通讯员 黄健儿;11230亩水稻缺水青枯[N];嘉兴日报;2007年
3 记者 张爱虎实习生 张雯 刘洋;水稻品种黄华占率先实现产业化[N];湖北日报;2008年
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5 葛济民、黄军、包志明;隆化23万亩水稻实现提质增效[N];承德日报;2006年
6 见习记者 李鹏;水稻想增收 “三病一虫”防治要抓紧[N];眉山日报;2007年
7 记者 翟劲涛;“平粳八号”等五个品种获殊荣[N];吉林日报;2008年
8 记者  李存才;6000万公斤良种惠“三农”[N];中国财经报;2006年
9 记者 杨登贵;我区良种覆盖率达85%[N];宁夏日报;2009年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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6 黎亚丽;蚯蚓金属硫蛋白基因对烟草的遗传转化研究[D];河北大学;2011年
7 杨柳;农杆菌介导的安祖花遗传转化研究[D];天津大学;2007年
8 王丹;农杆菌介导TCS基因转入山新杨的遗传转化研究[D];东北林业大学;2009年
9 张福丽;小黑杨抗真菌病转基因的研究[D];东北林业大学;2006年
10 吴薇;PtSnRK基因的遗传转化研究[D];南京林业大学;2010年
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