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《西南农业大学》 2005年
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微孢子虫表面蛋白生物学功能研究

刘强波  
【摘要】:微孢子虫是一类广泛存在的、专营细胞内寄生生活的、无线粒体的单细胞真核生物。微孢子虫的种类很多,至今发现的微孢子虫种类超过1200种,分别划入近150个属。微孢子虫危害相当大,涉及到农业生产的很多领域,甚至包括人在内的大量生物都受到很大威胁。历史上,法国等欧洲国家曾因微孢子虫使蚕桑业毁于一旦。近年来,人感染微孢子虫的病例逐渐增加,对人类健康和社会经济造成了严重的威胁。因此,加强对微孢子虫的研究显得尤为迫切。本研究以家蚕微孢子虫为实验材料,较为详细的研究了家蚕微孢子虫表面蛋白的屏护、识别以及免疫攻击等生物学功能,并以家蚕和桑尺蠖为感染对象进行了感染试验,就家蚕微孢子虫转宿主寄生以后表面蛋白发生的变异,探讨了微孢子虫感染适应性等问题。现将研究结果报告如下: 一、微孢子虫表面蛋白屏护功能研究 1.微孢子虫经过SDS法温和处理后,测得蛋白质提取液浓度为0.218mg/ml,显微镜观察微孢子虫孢子均保持了完整形态;微孢子虫经SDS法脱去表面蛋白前后考马斯亮兰R-250和1%的曙红B染色对比表明微孢子虫表面蛋白对微孢子虫维持相对稳定的内环境具有重要作用。 2.微孢子虫(N.bombycis)经SDS法温和处理脱除孢子表面蛋白后,对家蚕的感染率从60%下降至38.89%。 3.家蚕微孢子虫(N.bombycis)经SDS法温和处理脱除表面蛋白后,1%、2%和4%的NaCl溶液分别处理使孢子对家蚕的感染率分别为37.78%、32.11%和16.66%;未经SDS法温和处理的家蚕微孢子虫(N.bombycis)经1%、2%和4%的NaCl溶液分别处理后,对家蚕的感染率分别为60.%、51.11%和67.77%;毒对的感染率为60%。 4.家蚕微孢子虫(N.bombycis)经SDS法温和处理脱除表面蛋白后,经35℃、40℃和45℃分别处理两个小时后对家蚕的感染率分别为21.11%、16.66%和11.11%;未经SDS法温和处理的家蚕微孢子虫(N.bombycis)经35℃、40℃和45℃分别处理后,对家蚕的感染率分别为43.33%、37.78%和40%:毒对的感染率为60%。 微孢子虫孢子表面蛋白的去除以及相关试验结果表明:微孢子虫表面蛋白具有屏护孢壁“离子通道”的作用,并且孢子的表面蛋白存在与否和孢子的生存和感染性密切相关。 二、微孢子虫表面蛋白识别、免疫攻击功能的初步研究 1.微孢子虫(N.bombycis)经兔血清处理后对家蚕的感染率分别为79%、82%、87%和82.3%, 说明兔血清组的处理时间和洗涤与否对家蚕的感染率基本没有影响。家蚕微孢子虫经兔抗家蚕微孢子虫血清处理半小时后,对家蚕的感染率为75.3%:经兔抗家蚕微孢子虫血清处理1小时后,对家蚕的感染率为64%。毒对的感染率为80.7%。
【学位授予单位】:西南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S884.2

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【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 许金山;家蚕微孢子(Nosema bombycis)全基因组结构与系统进化分析[D];西南大学;2007年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前7条
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7 黄少康;两种微孢子虫的蛋白及对家蚕侵染性的比较研究[D];浙江大学;2004年
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9 夏广清;GA对大白菜开花的诱导效应及利用RNAi技术获得晚抽薹转基因大白菜[D];山东农业大学;2005年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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9 何献君;苏云金芽孢杆菌对菜青虫的防治技术研究[D];四川师范大学;2003年
10 刘仁华;龙眼卷叶蛾(Cerace Stipatana Walker)微孢子虫的生物学分类及相关感染性问题的研究[D];西南农业大学;2004年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 许金山;家蚕微孢子(Nosema bombycis)全基因组结构与系统进化分析[D];西南大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 周成;家蚕微孢子虫表面蛋白P32.7的分离纯化及P30.4基因相关领域分析[D];西南农业大学;2002年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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5 郑祥明,杨琼,方定坚,廖森泰,邹宇晓,黄炳辉;广东省昆虫微孢子虫资源调查及交叉感染的研究[J];蚕业科学;2003年04期
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8 高永珍;微孢子虫的研究进展[J];畜牧兽医科技信息;2000年05期
9 潘敏慧,万永继,鲁成;不同种类微孢子虫DNA制备方法的研究[J];西南农业大学学报;2001年02期
10 张泽华,严毓骅,张卓然,郑双悦,宝祥,李福生,石岩生;微孢子虫治蝗对草地生物多样性的保护作用及意义[J];草业科学;2003年09期
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4 刘珊珊;结核分枝杆菌H37Rv感染期表面蛋白筛选及宿主相关免疫应答研究[D];吉林大学;2012年
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8 魏武;重要病原微生物比较基因组研究的生物信息学方法和应用[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2007年
9 许金山;家蚕微孢子(Nosema bombycis)全基因组结构与系统进化分析[D];西南大学;2007年
10 王远志;绵羊种布鲁氏菌致病的分子机制研究[D];石河子大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘强波;微孢子虫表面蛋白生物学功能研究[D];西南农业大学;2005年
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3 徐小芳;小型微孢子虫与菜粉蝶微孢子虫的形态学与系统发育研究[D];江苏科技大学;2011年
4 徐利纳;河南省郑州地区微孢子虫病流行病学调查及分子特征初步研究[D];河南农业大学;2011年
5 李继莲;熊蜂微孢子虫形态学及有关生物学的研究[D];中国农业科学院;2004年
6 周成;家蚕微孢子虫表面蛋白P32.7的分离纯化及P30.4基因相关领域分析[D];西南农业大学;2002年
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