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《四川农业大学》 2012年
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川硬皮肿腿蜂毒液性质及其对黄粉虫蛹的麻痹和营养代谢的影响

覃欢  
【摘要】:川硬皮肿腿蜂Scleroderma sichuanensis Xiao属膜翅目Hymenoptera、肿腿蜂科Bethylidae,是一种抑性外寄生蜂,对天牛等钻蛀性害虫具有重要的生物防治价值。其雌蜂生殖系统无萼区,毒囊器官在生殖系统中占很大比例,显示毒液在寄生过程中具有十分重要的作用。本文以川硬皮肿腿蜂—黄粉虫Tenebrio molitor L蛹寄生体系为研究对象,对川硬皮肿腿蜂毒液的麻痹作用、营养调控作用和抑菌作用进行了初步研究,并对毒液理化性质和麻痹活性成分分离进行了一些探索。结果概述如下: 1川硬皮肿腿蜂毒液对黄粉虫蛹的麻痹和抑制蜕皮作用 实验条件下毒液的麻痹作用与注入毒液的量正相关,当人工注射浓度为0.01VRE(venom reservoir equivalent)时,黄粉虫蛹表现出轻微麻痹,没有完全丧失活动能力,躯体尚能摆动,但是活动速度较缓慢,幅度较小,并且这种麻痹作用是可逆的,24小时后活动恢复灵活,与对照无异。从被注入0.03VRE毒液开始,随着毒液浓度增加,寄主蛹表现出对刺激无反应的完全僵化迹象,当浓度提高到0.2VRE,可使黄粉虫蛹表现出不可逆的完全僵化状态至死亡。0.05-0.3VRE毒液对蛹的麻痹作用差异不显著(P0.05)。川硬皮肿腿蜂自然蛰刺寄主蛹时,部分被注入毒液量少的寄主麻痹后可恢复活动,继续发育,至羽化时形成头部、翅和足发育的蜕皮障碍的蛹—成虫中间体;而被注入毒液量大的蛹持续保持被麻痹的状态,至麻痹后8-14天死亡 2注射川硬皮肿腿蜂毒液与寄生对黄粉虫蛹的营养生理调控作用 实验条件下,注射0.3VRE毒液使黄粉虫蛹期血淋巴脂滴浓度与对照相比在第3天差异显著(P0.05),比对照下降了78.24%,而糖原、海藻糖、还原糖、血淋巴蛋白及脂肪体蛋白和脂滴浓度与对照相比差异不大(P0.05)。 寄生则导致黄粉虫蛹糖原、海藻糖含量在第3-6天,血淋巴蛋白含量2-5天显著下降(P0.05),还原糖含量在第3-6天显著升高(P0.05),而脂肪体蛋白和脂肪体脂滴含量与对照相比差异不大(P0.05)。 电泳结果显示注射毒液和寄生与对照相比并未明显改变寄主血淋巴蛋白成分,寄生时川硬皮肿腿蜂水解寄主血淋巴蛋白并无特异偏好,也不存在某些容性寄生蜂分泌的寄生专性肽。 3川硬皮肿腿蜂毒液的抑菌作用 毒液与菌液共注射试验结果显示毒液能在48h内延缓菌液引发的蛹体大范围黑化作用。单独注射菌液与菌液毒液共注射在48h黑化死亡数差异显著p0.05)。 平板抑菌试验结果显示0.5VRE毒液对大肠杆菌和金黄葡萄球菌有抑制作用,并且对金黄葡萄球菌抑制作用强于大肠杆菌(p0.05)。 4川硬皮肿腿蜂毒液理化性质及毒液麻痹活性成分初步分离 川硬皮肿腿蜂毒液的麻痹活性成分为蛋白,在30~50℃、pH4.94~9.18、0.2~1.2M盐浓度和正己烷处理后仍能保持活性;大于60℃或用氯仿—乙醇处理会丧失麻痹活性;大于80℃会丧失对金黄葡萄球菌的抑菌作用,而60~100℃并未丧失对大肠杆菌的抑制作用,揭示两种抑制作用可能来自毒液中不同成分。 经Sephadex G-75凝胶层析分离,毒液有三个蛋白峰,其中Vn2、Vn3都有麻痹活性,由于性质相近,不易分离。
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S476.3

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