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四川几种树生斑痣盘菌的研究

李万艳  
【摘要】:本实验调查了四川常见松树(Pinus)和杜鹃树(Rhododendron)上的斑痣盘菌,利用形态特征进行分类,并对个别种的培养特性做了初步探讨,同时利用真菌rDNA的ITS区序列对采集到的菌进行系统学分析,主要研究结果如下: 1、以Darker (1967)和CannonMinter (1986)等人提出的分类观点为主要依据,对采自阿坝州小金县、甘孜州泸定二郎山林场等地的华山松(Pinus armandii)、云南松(Pinus yunnanensis)和杜鹃树(Rhododendron)上的斑痣盘菌进行系统研究,共查明3属9种,其中寄生于杜鹃树上的4种菌分别为普通皮下盘菌(Hypoderma commune)、悬钩子皮下菌(Hypoderma rubi)、江南散斑壳(Lophodermium jiangnanense)和朱焦皮下盘菌(Hypoderma cordylines),四种菌均为四川首次报道。 2、利用子囊果研磨法、组织分离法和孢子弹射法获得7个不同菌种的纯培养物,并进行了各菌种培养性状的实验研究。通过定期观察、记载各菌的培养性状和拍摄纯培养物彩色照片,发现各菌株在PDA平板上的生长速度、菌落形状、颜色和结构以及子实体形成与否及成熟期等方面存在一定的差异,少数菌株产生分生孢子器和线(环)纹,所有的菌株都不产生子囊果,只有个别菌株分泌黄色的蜜滴。 3、本实验对之前报道的二新种四川散斑壳(Lophodermium sichuanense)和二郎山散斑壳(Lophodermium erlangshanense)进行了菌落培养特性研究。结果表明:L.sichuanense在不同培养基上的生长速度依次为MAPDAOAPA。最佳的营养源为麦芽汁培养基,在煎汁培养基上几乎不能生长。最适生长温度为24~28℃之间,32℃停止生长,与该类菌发病最佳时间为每年6~8月份吻合。在全黑暗的条件下生长较好,这与该菌生长环境较湿润、阴暗有关。最佳的生长pH为5~7,说明L.sichuanense偏酸性。L. erlangshanense在不同的培养基上的生长速度依次为MAPDAOAPA。最佳的营养源为麦芽汁培养基,在PA培养基上几乎不能生长。最适生长温度为20~28℃,32℃停止生长。最适宜的生长pH为5~6,这些都与我们研究散斑壳属菌生长习性相一致。 4、系统发育树的构建表明,这9个种有明显的种间差异性。种间亲缘关系大于属间亲缘关系。Ploioderma yulongense、Lophodermium conigenum这两个菌株虽然来自不同的属,但是由于采自相同的寄主华山松,因此聚合在一起。存在于杜鹃上的Lophodermium jiangnanen与两个皮下盘菌属的菌(Hypoderma commune和Hypodermacordylines)的亲缘关系比Lophodermium jiangnanense与其它散斑壳属的菌要高。这说明斑痣盘菌科成员之间的亲缘关系与寄主相关,相同的寄主不同属之间的菌株具有较高的同源率。而GU138738.1、GU138749.1、GU138744.1和Hypoderma rubi这四个菌在形态方面极其相似,在系统发育树上属于同一个分支,但同源率却很低,这与以形态特征为主要依据鉴定时将他们鉴定为不同的种相一致。由此可见,将分子生物学技术应用到真菌的分类鉴定中,能克服传统分类学的人为因素,是可行的。


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