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《四川农业大学》 2014年
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约氏乳酸杆菌BS15对小鼠脂肪沉积和非酒精性脂肪肝的影响

辛金鸽  
【摘要】:本论文通过饲喂小鼠高脂饲料和灌胃不同浓度的约氏乳酸杆菌BS15,来探讨约氏乳酸杆菌BS15对高脂饲料引起的肥胖和非酒精性脂肪肝的作用,并研究其机理。选用120只雄性ICR小鼠,试验前35d小鼠分为三组,ND组60只小鼠均灌胃磷酸缓冲生理盐水(PBS), L-BS15组和H-BS15组各30只分别灌胃不同浓度约氏乳酸杆菌BS15(2×107或2×108 cfu/d),均给予普通饲料(NCD)。上述处理35d后将ND组小鼠分出一半,分出小鼠饲喂高脂饲料和灌胃PBS为HFD组,其余小鼠继续饲喂NCD和灌胃PBS仍为ND组;L-BS15组和H-BS15组小鼠改喂高脂饲料同时继续灌胃不同浓度约氏乳酸杆菌BS15,持续12周。在第35、63、91、119d采取小鼠样本进行检测,试验结果如下:1.与ND组小鼠相比,HFD组体重显著升高;与HFD组相比,L-BS15和H-BS15组小鼠体重显著降低。2.肝脏病理组织学切片观察,HFD组小鼠肝脏内空泡化严重,肝脏脂肪变性较L-BS15和H-BS15组显著。3.通过流式细胞技术(FCM)对小鼠肝脏细胞进行检测,与ND组相比,HFD小鼠肝脏细胞凋亡率显著升高;L-BS15和H-BS15组肝脏细胞凋亡率较HFD组显著降低。4.实时荧光定量(RT-PCR)技术检测小鼠盲肠内容物特定菌群发现,BS15的补充显著增加了肠道内乳酸菌、约氏乳酸杆菌及拟杆菌的数量,同时降低了肠道内肠杆菌和厚壁杆菌门/拟杆菌门的比例,有效改善了高脂饲料诱导的肠道菌群的紊乱。5.实时荧光定量(RT-PCR)技术检测小鼠肝脏内脂肪代谢相关因子(ACC1、 FAS、FIAF、PPARy)基因表达发现,与ND组相比,HFD组ACC1、FAS和PPARy基因表达量显著升高,FIAF表达量显著降低;灌胃BS15后,ACC1、FAS和PPARγ基因表达量较HFD组显著降低,FIAF表达量显著升高。6.肠道通透性试验表明,高脂饲料显著诱导了HFD组小鼠肠道通透性;BS15的补充显著降低了小鼠肠道通透性。7.机体炎症相关指标检测表明,HFD组小鼠血清中LPS含量和肝脏组织TNF-α表达水平在119 d显著高于ND组。灌胃BS15后,与HFD组相比,血清LPS含量和肝脏TNF-α表达量在L-BS15组和H-BS15组显著降低。与ND组相比,从第63d到119d小鼠血清中C反应蛋白(CR_P)含量在HFD组显著升高。灌胃BS15后,与HFD组相比,从第63d到119d小鼠血清中CRP含量在L-BS15组和H-BS15组显著降低。BS15显著降低了高脂饲料诱导的机体炎症。8.小鼠胰岛素抗性检测发现,与ND组相比在第63、91、119 d, HFD组小鼠血清中胰岛素含量和胰岛素抗性均显著升高,灌胃BS15后,小鼠血清中胰岛素含量及胰岛素抗性在63、91、119d三个检测点均显著降低。与ND组相比,小鼠血清中TG、TC、LDL-C、ALT、FFA含量在HFD组显著升高,HDL-C含量在HFD组显著降低。灌胃BS15后,与HFD组相比,TG、LDL-C、ALT、FFA含量显著降低,HDL-C含量显著升高。BS15的补充抑制了胰岛素抗性的产生及血脂指标的紊乱。9.氧化应激相关指标检测发现,与ND组相比HFD组肝脏线粒体和肝细胞胞浆中H2O2、GSH和MDA含量均显著升高,CAT、GSH-PX和T-SOD酶活力在线粒体和胞浆中显著降低。灌胃BS15后与HFD组相比,L-BS15组和H-BS15组线粒体内H2O2、GSH和MDA含量均显著降低,CAT和GSH-PX酶活力显著升高,T-SOD酶活力变化不显著。与HFD组相比,L-BS15组和H-BS15组胞浆内H2O2、GSH含量均显著降低,MDA、T-SOD酶活力显著升高,CAT、GSH-PX酶活力仅在H-BS15组内升高显著。BS15的补充有利于抑制肝脏组织氧化应激的发生。综上所述,约氏乳酸杆菌BS15具有抗肥胖和预防非酒精性脂肪肝的作用,其主要机理是通过改善肠道菌群,降低肠道通透性、机体炎症、肝脏氧化应激和胰岛素抵抗。
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R575.5;R589.2

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