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《四川农业大学》 2015年
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叶酸对中期草鱼生长和肠道免疫的影响及其调控机制研究

石磊  
【摘要】:本试验旨在研究饲粮添加不同水平叶酸对生长中期草鱼生长性能、肠道免疫能力、紧密连接和抗氧化能力的影响及其作用机制。将初始体重为267.69±0.87 g的体格均匀、健康的草鱼随机分配到18个网箱中,设置6个叶酸水平,各组间初始体重差异不显著(P0.05),进行8周的动物实验,实验期间各处理分别投喂叶酸含量为0.10(对照组)、0.47、1.03、1.48、1.88和3.12mg/kg的饲粮。本研究结果显示:饲粮中适宜水平的叶酸显著提高中期草鱼的末重、增重百分比(PWG)、特异性增长率、摄食量和饲料效率(P0.05)。适宜水平叶酸显著提高草鱼肠道胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性、Na+/K+-ATP酶、碱性磷酸酶、肌酸激酶(CK)和γ-谷氨酰转移酶活性(P0.05),同时,适宜水平叶酸上调前肠、中肠和后肠CK和Na+/K+-ATPase alpha subunit isoform 1基因表达(P0.05),但是对肠道Na+/K+-ATPase alpha subunit isoform 8基因表达无影响(P0.05)。进一步研究发现,适宜水平叶酸上调肠道雷帕霉素靶蛋白和S6蛋白激酶1基因表达,但是下调草鱼肠道e1F4E结合蛋白基因表达(P0.05)。此外,适宜水平叶酸显著增加草鱼肠道酸性磷酸酶和溶菌酶活性以及补体C3的含量;显著下调草鱼肠道促炎细胞因子白介素1β、白介素8、肿瘤坏死因子α、信号分子核因子κBp65、IκB激酶(IKK) α、 IKK-β和IKK-γ的基因表达(P0.05);显著上调肠道抗炎细胞因子白介素10、转化生长因子β和核因子κB抑制蛋白(IκB)的基因表达(P0.05)。同时,适宜水平叶酸显著上调occludin、ZO-1和claudin-b在草鱼肠道的基因表达(P0.05),显著下调claudin-15、肌球蛋白轻链激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶在草鱼肠道的基因表达(P0.05)。同时本试验研究发现,适宜水平叶酸降低草鱼肠道的氧自由基、丙二醛和蛋白羰基的含量(P0.05),显著增加肠道还原型谷胱甘肽的含量以及铜锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)和谷胱甘肽还原酶(GR)的活性,显著降低肠道锰超氧化物歧化酶(MnSOD)活性(P0.05)。进一步研究发现,适宜水平叶酸显著上调草鱼肠道Cu/ZnSOD、CAT、GPx、GST、GR和核因子相关因子2基因表达,下调肠道MnSOD. Kelch样ECH联合蛋白1a (Keap1a)和Keap1b基因表达(P0.05)。在本试验条件下,以PWG为标识,确定中期草鱼(267-747 g)饲粮的叶酸需要量为1.60mg/kg饲粮。
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S965.112

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