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《四川农业大学》 2004年
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可去除选择标记的转Bt基因抗虫玉米的研究

渠柏艳  
【摘要】:近年来,随着转基因作物品种的逐步推广应用和转基因食品的商品化,转基因作物对食品、环境和农业生产的安全性,越来越受重视。除目的基因而外,转基因操作中所使用选择标记基因的安全性更是倍受关注。除了对选择标记基因进行安全性评价以外,目前转基因研究的一个热点,即是通过共转化、位点特异性重组、转座子介导法重新定位、MAT载体系统等方法,建立可去除选择标记的基因转化体系,在转化筛选以后,去除选择标记基因。 本研究以携带Bt基因的pUBK质粒和具有两个转移DNA(T-DNA)结构域的pCDMAR-Hyg质粒为基础,通过酶切、连接构建可去除选择标记的双T-DNA单子叶植物表达载体pCDMAR-USBK-Hyg,其中一个T-DNA结构域含有外源抗虫基因Bt,另一个T-DNA结构域含有选择标记基因Hpt。用这一双T-DNA质粒转化农杆菌后,通过转化农杆菌菌株与玉米胚性愈伤组织的共培养,使双T-DNA携带的抗虫基因Bt和选择标记基因Hpt共转化玉米,经潮霉素梯度浓度培养基筛选,从阳性克隆分化再生植株。经对T_0代再生植株的PCR和PCR-Southern检测,初步证明外源Bt基因已整合到玉米基因组,并获得了可育的T_1代种子。
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S513

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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