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《四川农业大学》 2004年
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胆囊收缩素主动免疫对猪的营养生理效应及其机制的研究

袁中彪  
【摘要】:CCK是由小肠近端Ⅰ细胞和中枢神经细胞分泌的一种脑肠肽,具有刺激胰酶分泌和胆囊收缩、降低胃排空、调节小肠运动、促进胰岛中胰岛素和生长抑素释放的作用,同时CCK也是动物体内的一种饱感因子,参与调节动物的采食。动物体内CCK的分子形式较多,其中CCK_8具有CCK的全部生物学功能。本研究通过考察CCK_8主动免疫对猪生产性能、营养物质消化率、内分泌激素、胰腺的发育、胰酶活性及基因表达的影响来认识CCK主动免疫的营养生理效应及其可能机制。研究共包括二个试验。 试验一 CCK_8主动免疫对猪的生产性能及CCK基因表达的影响 试验选用体重为27.55±3.15kg的杜洛克×长白猪×约克夏(DLY)三元杂交阉猪10头,随机分为2组,每组5个重复,每个重复1头猪。试验组用370μgCCK_8与人血清白蛋白(hSA)的交联物(CCK_8-hSA)分别在试验第1、29、43和57天进行免疫,对照组用等量人血清白蛋白免疫。试验期为77天。整个试验期间,试猪自由采食和饮水。在试验的第71天,从前腔静脉采血,测定血清CCK_8的含量和CCK抗体滴度。试验结束时屠宰所有试验猪,迅速取出垂体和空肠前段,经液氮速冻后,-70℃下保存,测定CCKmRNA的含量。 结果显示: ①370μgCCK_8主动免疫后,与对照组相比,试验猪全期日增重和采食量分别提高了14.29%(P=0.23)和9.34%(P=0.34); ②370μgCCK_8主动免疫后,试验猪血清中CCK_8含量与对照组相比降低了19.77%(P<0.15),抗体滴度则升高了67.63%(P<0.01); ③试验猪的空肠和垂体中CCKmRNA的含量显著低于对照组(P<0.05)。 结果表明,370μgCCK_8主动免疫能提高猪血清中CCK抗体滴度、抑制猪空肠和垂体中CCK基因的表达,从而降低血清中CCK_8的浓度,趋于提高猪的采食量和生长速度。 试验二 不同水平CCK_8主动免疫对猪生产性能、胰腺功能、CCK及受体基因表达的影响试验选用体重为27.66±1.71kg的DLY三元杂交阉猪15头,随机分为3个处理,每个处理5个重复,每个重复1头猪。处理1、2和3的猪分别用由0μg、250μg和500μgCCK_8与人血清白蛋白交联后形成的抗原进行免疫,免疫的时间分别为试验第1、29、43和59天。试验期为74天。整个试验期间,试验猪自由采食和饮水。在试验的第1、15、29、 胆囊收缩素主动免疫对猪的营养生理效应及其机制的研究 书、59和73天,从前腔静脉采血,测定血清中CCK抗体滴度,或测定血清中CCKS、 胰岛素和瘦素的含量。试验结束时屠宰所有试验猪,迅速取出胰腺,纵向分为两部分, 一部分用4%的甲醛溶液固定,用于胰腺的组织学检查,另一部分胰腺与取出垂体和空 肠样品经液氮速冻后,于一70℃保存,侧定胰酶的活性及CCKmRNA和CCK一A受体 爪RNA的含量。 结果显示: ①ccK主动免疫对猪生产性能的影响存在着剂量效应关系,250雌CcKS主动免疫能 显著提高猪的全期采食量和日增重,与对照组相比分别提高了H.76%(P0.05)和 14.62%(P0 .05):而500林gCCK主动免疫有降低猪采食量和日增重的趋势; ②ccK主动免疫显著降低血清中胰岛素、瘦素和CcK。的浓度。250陀CC城主动免 疫后,猪第73天的血清中胰岛素、瘦素和cCK:的含量与o林gCC丸组相比分别降低了 21.39%(p0·05)·30.58%(p0.05)和29.00%(p0.05):500协gCCK:主动免疫使其分别降低 了23.57%(P0.05)、29.48%(P0.05)和37.72%(P0.05)。 ③CcK主动免疫能显著提高胰淀粉酶和胰脂肪酶的比活力‘250协g和500陀CCKs 主动免疫与对照相比,胰淀粉酶和胰脂肪酶的比活力分别提高了7.15%(P0 .05)、 1 15.15%(P0.05)和12.90%(P0.05)、94.70%(p0.05);500卜gCCKs主动免疫显著提高胰 蛋白酶的比活力,与对照组和250林gCCKs组相比分别提高了85.97%(p0.05)和 35.97%(P0.05)。 ④250腿CCKS主动免疫对胰腺组织学结构无显著影响。500件gCCK:主动免疫引起胰 腺组织病变,主要表现为胰腺组织空泡变性、细胞增生坏死、胰腺充血、出血以及酶原 颗粒减少。 ⑤CCK主动免疫后显著降低猪空肠、垂体和胰腺中CCK基因和CCK一A受体基因 的表达。与对照相比,250林gCCK:主动免疫使猪空肠、垂体和胰腺中CCK基因和CCK 受体基因的mRNA含量分别降低了37.02%(P0.05)、30.02%(p0.05)、22.400,0(P0.05) 和25.300,0(P0.05)、26.06%(P0.05)、20.43%(P0.05);500协gCeK:主动免疫则使 它们分别降低了44 .97%(p0 .05)、一8.67%(p0.05)、24.09%(p0.05)和 22.72%(P0.05)、10.48%(P0.05)、16.49%(P0.05)O 结果表明,250协gCCK:主动免疫显著提高猪生产性能,其机制是CCK主动免疫产 生的特异性抗体中和了部分内源性CCK,同时通过抑制CCK基因和CCK受体墓因的 表达降低了内源CCK的分泌量,减弱了CCK信号传导作用,从而部分解除了CCK对 采食的抑制作用。250陀CCKs主动免疫对胰腺发育和养分消化率无显著影响。500阵CCK 四川农业大学博士学位论文 主动免疫可进一步提高抗体滴度和抑制基因表达,但有降低猪生产性能的趋势。这表明 不同程度的CCK:主动免疫对猪生产性能的影响存在差异,免疫过度可能会损伤猪胰腺 的健康。 上述两个试验结果表明,CCK主动免疫可?
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S828

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