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《四川农业大学》 2005年
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小麦遗传转化参数优化及其应用研究

武丽敏  
【摘要】:本文以中国春性小麦新品种(系)为外植体,进行组织培养和遗传转化参数研究。在此基础上,将含有bar基因和GUS报告基因的质粒pDM803用基因枪法转化小麦,获得可育的转基因小麦植株,从而建立了适于中国春性小麦基因型的基因枪转化体系。主要研究结果如下: 1.本试验首次报道2,4,5-T和NAA对小麦愈伤组织培养反应的影响,特别是详细比较了它们与小麦组织培养试验中广泛应用的生长调节物质2,4-D之间的差异。在添加2,4.5-T的培养基中,幼胚胚性愈伤组织诱导率和愈伤组织鲜重增加量均高于添加2.4-D和NAA的培养基,且2,4,5-T显著抑制外植体萌发率。在添加2mg/L 2,4-D的MS基本培养基上,幼胚胚性愈伤组织诱导率高达33.50%;而成熟胚在添加4 mg/L 2,4-D的N6培养基上反应最好。 2.小麦幼胚愈伤组织分化频率(62%-76.39%)高于成熟胚愈伤组织分化频率(38.57%-47.76%)。对小麦愈伤组织进行干燥处理,适宜时间内可有效地提高外植体分化频率。不同外源激素组合(KT、6-BA、NAA、IAA、TDZ和ZT等)对小麦愈伤组织芽分化频率影响显著,0.5mg/L TDZ可明显提高芽分化频率。IBA0.5+NAA 0.25在生根培养中表现最佳,且加入氯化胆碱和多效唑,幼苗根系生长旺盛、粗壮,有利于移栽。 3.首次探讨在培养基中添加AgNO_3对普通小麦幼胚愈伤组织培养的影响。在培养基中添加适宜浓度硝酸银可显著提高胚性愈伤组织率和愈伤鲜重,且能降低愈伤组织褐化率。基因型和硝酸银浓度间的互作效应显著地影响胚性愈伤组织诱导率和愈伤组织鲜重增加指数。在小麦组织培养不同阶段,添加适宜浓度的硝酸银是十分必要的。
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S512.1

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