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《四川农业大学》 2005年
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伪狂犬病病毒主要毒力基因功能的研究

阳爱国  
【摘要】:本试验通过研究PRV主要毒力基因缺失后对病毒在细胞中的增殖规律、猪的致病性、组织器官内的分布定植、免疫原性等方面影响,反向论证了伪狂犬病病毒TK、gI和gE等主要毒力基因的功能。 1.TK基因 TK基因缺失毒株D1和野毒Fa株的细胞培养特性发现:D1株对Vero细胞、IBRS2细胞、Marc145细胞、MDBK细胞、ST细胞均较敏感,其增殖均与野毒Fa株相似。对照组PRV Fa强毒攻毒可导致仔猪大脑、小脑、三叉神经、心脏、肝脏、肺脏、肾脏、淋巴结、扁桃体等9个器官发生明显病变;D1组PRV Fa强毒攻毒可导致肝脏、肺脏、淋巴结、扁桃体4个组织器官发生明显病变。PRV Fa对照组在10个组织中均检测出PRV;而D1免疫组用强毒攻毒后,在大脑、小脑、肺脏中未检测出PRV,其余组织均检测出PRV。结果表明:(1)TK基因是PRV复制的非必需基因,TK基因失活不影响病毒的正常增殖。(2)TK基因是主要毒力基因,其缺失引起PRV毒力丧失或极显著地降低;在中枢神经对病毒的复制起主要作用。TK基因与PRV在大脑、小脑、三叉神经、肾脏、心脏的定植和毒力相关;(3)TK基因对病毒嗜神经性,缺失后有抗潜伏感染的特性。 2.gE/gI基因 gE/gI基因缺失毒株D2对上述5种细胞均较敏感,其在细胞增殖并引起细胞病变之能力均不如PRV Fa株明显。对照组PRV Fa强毒攻毒可导致上述9个器官发生明显病变;D2组PRV Fa强毒攻毒可导致肝脏、淋巴结、扁桃体3个组织器官发生明显病变。PRV Fa对照组在10个组织中均检测出PRV;而D2免疫组强毒攻毒后,在大脑、小脑中未检测出PRV,其余组织均检测出PRV。结果表明:(1)gE和gI基因产物所形成的复合体对病毒在细胞上的增殖功能:促进病毒在细胞间扩散;影响病毒从细胞的释放:促进细胞间融合。(2)gE/gI基因也是重要的毒力基因,gE/gI基因与PRV在肺脏的定植和毒力相关。缺失gE/gI双基因后的毒株,引起PRV毒力丧失或极显著地降低;该复合体介导PRV在神经组织的扩散途径,其中gE基因是PRV经三叉神经节侵入中枢神经组织所必需的基因,起主要作用;其缺失后的PRV只能到达一、二级神经元,不能到达三级神经元,阻止强毒由外周神经向中枢神经系统传播。(3)gE/gI基因具有嗜神经性,缺失后有抗潜伏感染的特性。 3.gE/gI/TK基因缺失gE/gI/TK三基因后的D3对上述5种细胞均敏感,在细
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S852.65

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