收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

PRRSV感染Marc-145细胞的病毒形态发生学、细胞超微结构变化及细胞凋亡的研究

刘伍梅  
【摘要】:利用猪繁飧与呼吸综合征病毒四川分离株(PRRSV-SC1)感染体外培养的Marc-145细胞为模型,开展了以下两方面的研究:①利用透射电镜和超薄切片技术研究了PRRSV感染Marc-145细胞后不同时间病毒的形态发生学和细胞超微结构的变化:②利用光学显微镜观察、透射电镜观察、DNA Ladder、ELISA、TUNEL五种方法研究了PRRSV感染Marc-145细胞后不同时间所引起的细胞凋亡及其动态变化规律。 1、病毒的形态发生学 透射电镜观察结果显示,病毒粒子呈球形,有囊膜,大小约45—65nm,内含直径大小约25—30nm的核衣壳。病毒感染细胞后吸附于细胞膜表面,然后以细胞内吞方式进入细胞,内在化后释放核酸,在胞浆内复制,有的以出芽方式进入胞浆空泡获得囊膜,在空泡内聚集,然后空泡向细胞膜靠近,空泡膜与细胞膜融合,最后以细胞外分泌方式释放到细胞外;有的散在于细胞质中,游离向细胞膜,以出芽方式释放到细胞外并获得囊膜。 2、细胞超微结构变化 病毒感染细胞后细胞超微结构变化主要表现为:感染前期,细胞无明显超微结构变化。随着时间进程的发展,细胞超微结构发生一些变化:滑面内质网空泡化,粗面内质网轻微扩张:线粒体肿胀、嵴断裂、溶解,最后空泡化;核膜轻微扩张,细胞核染色质浓缩、呈新月状或环状附着于核膜内侧;有的核膜逐渐消失,核裂解,细胞膜内陷并将细胞内容物包裹,然后出芽,形成凋亡小体:然后整个细胞内的细胞器空泡化,其中包含有一种电子密度与核仁相似大小不一的颗粒,溶酶体和脂褐素,最后细胞裂解,破碎。 3、PRRSV感染Marc-145细胞后引起的细胞凋亡 (1) HE染色后,光镜下观察细胞凋亡情况,结果显示凋亡细胞变圆、变小,细胞核固缩,染色质被染成深蓝色或蓝黑包,胞浆呈淡红包。(2) 透射电镜观察,凋亡细胞胞浆浓缩,细胞核染色质凝聚,或呈新月状或环状附着于核膜内侧,或占据整个细胞核,有的核膜消失,核裂解,细胞膜内陷,将细胞内容物包裹,然后出芽,形成凋亡小体。(3) DNA Ladder、ELISA和TUNEL检测结果显示,PRRSV感染细胞后,随时间不同,其引起细胞凋亡的程度不同,与正常组细胞相比,在感染后的前24h,感染组调亡细胞与对照组相比差异不显著(P0.05),在感染后48h、72h、96h、120h感染组凋亡细胞与对照组相比差异极显著(P0.01)。在感染后72h细胞凋亡达到高峰,随后细胞凋亡水平又有所下降。在感染后144h,DNA Ladder无法检测到凋亡,ELISA法检测到低于正常组细胞的凋亡水平,TLNEL法检测到极少量的凋亡细胞。三种生化指标检测方法所检测到细胞凋亡及其动态变化规律基本一致。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 马米玲;郝雪峰;关贵全;刘志杰;李有全;刘爱红;;猪繁殖与呼吸综合征病毒HN-HW株全基因组分子特征分析[J];中国兽医科学;2011年08期
2 孙建富;郝建伟;荣福龙;姜力;姜丽萍;白宇;;猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定及ORF5基因的序列分析[J];中国畜牧兽医;2011年09期
3 杨彩然;杨宗泽;王金锋;房海;贺英;张艳英;高光平;史秋梅;;猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株NSP2基因的序列分析[J];黑龙江畜牧兽医;2011年13期
4 张善瑞;周艳君;朱建平;童武;姜一峰;童光志;;高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株感染性分子克隆的建立及拯救病毒的鉴定[J];中国预防兽医学报;2011年07期
5 张璐;刘宁宁;吴海珍;高继明;肖一红;周恩民;;非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链B羧基端多肽单克隆抗体的制备及鉴定[J];中国兽医科学;2011年07期
6 李彬;毛立;何孔旺;刘彦玲;温立斌;俞正玉;茅爱华;王小敏;张雪寒;郭容利;周俊明;倪艳秀;吕立新;;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)江苏分离株NJGC ORF5基因的克隆及遗传变异分析[J];江苏农业学报;2011年04期
7 张凤华;卢晓艳;徐红运;赵琳;刘玉松;范旭;夏平安;崔保安;;感染PRRSV Nsp2基因部分缺失变异株的仔猪抗体变化规律[J];华北农学报;2011年03期
8 李彬;何孔旺;温立斌;茅爱华;王小敏;张雪寒;倪艳秀;周俊明;肖少波;陈焕春;;我国长江流域PRRSV ORF3基因的遗传变异分析[J];华北农学报;2011年03期
9 王彬;汤德元;李春燕;王凤;曾智勇;张晓杰;甘振磊;;猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株ORF5基因原核表达的研究[J];猪业科学;2011年06期
10 王金凤;王占峰;韩庆安;孙继国;;河北省2010年猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传变异分析[J];广东畜牧兽医科技;2011年04期
11 李国江;冯立文;高磊;丁壮;张立春;;猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因及猪IL-18基因共表达真核表达系统的建立[J];中国兽医学报;2011年09期
12 Laila D;张锦秀;;猪繁殖与呼吸综合征病毒基因Ⅰ型的遗传和免疫学多样性[J];中国畜牧兽医;2011年07期
13 祝秀梅;吕志慧;牟克斌;;两株PRRSV分离株ORF5与Nsp2基因部分序列分析[J];免疫学杂志;2011年07期
14 刘宁宁;张璐;吕军华;高继明;吴海珍;肖一红;周恩民;;非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A羧基端在PRRSV感染Marc-145细胞中的作用[J];中国预防兽医学报;2011年08期
15 李彬;何孔旺;温立斌;俞正玉;茅爱华;王小敏;张雪寒;郭容利;倪艳秀;周俊明;吕立新;;我国苏皖地区PRRSV Nsp2和ORF5基因的遗传变异分析[J];中国兽医学报;2011年07期
16 郑其升;毕志香;李梅清;侯继波;陈溥言;;改良型痘苗病毒安卡拉株表达系统可删除筛选标记的双表达穿梭载体[J];生物工程学报;2011年06期
17 周艳;郑海红;高飞;田德斌;袁世山;;猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA依赖性RNA聚合酶中SDD功能区的突变分析[J];中国科学:生命科学;2011年08期
18 张倩;李晓霞;董昕欣;顾小雪;曹振;邓小雨;胡冬梅;刘奇;周智;遇秀玲;翟新验;田克恭;;猪细小病毒单克隆抗体的制备和鉴定[J];中国比较医学杂志;2011年09期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 徐引弟;王治方;张青娴;焦海燕;郭成留;;猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株与普通株二重RT-PCR鉴别方法的建立与应用[A];中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2008年
2 希尼尼根;程安春;汪铭书;陈孝跃;文明;周伟光;郭宇飞;陈斌;贾仁勇;;猪繁殖与呼吸综合征病毒四川分离株ORF5基因的克隆及序列分析[A];中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第七次学术研讨会论文集[C];2004年
3 邓雨修;李玉峰;姜平;蒋文明;汤景元;;不同引物RT-PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的比较研究[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年
4 朱连德;;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异和疫苗免疫保护[A];中国猪业发展大会暨中国畜牧业协会猪业分会第二届会员代表大会论文集[C];2007年
5 周艳君;安同庆;薛强;仇华吉;刘金霞;王云峰;田志军;彭金美;童光志;;猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的表达及其单克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
6 梁大明;;关于防控猪繁殖与呼吸综合征的反思[A];中国畜牧兽医学会养猪学分会2009年学术年会“回盛生物”杯全国养猪技术论文大赛论文集[C];2009年
7 李俊;王金宝;张祯涛;周顺;;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分子生物学研究进展[A];山东畜牧兽医学会养猪专业委员会第一届学术研讨会论文集[C];2007年
8 周婷;曾三杰;文心田;肖驰;;猪繁殖与呼吸综合征病毒重庆株的分离鉴定[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年
9 赵永刚;王志亮;王君玮;萨仁高娃;陈继明;童光志;;我国猪繁殖与呼吸综合征的流行现状与研究现状[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
10 李志杰;丁壮;高恩鹏;;猪繁殖与呼吸综合征病毒JL/07/SW株的分离鉴定及变异分析[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 高志强;猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组分子遗传特征分析[D];中国农业大学;2003年
2 仇华吉;猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-la株基因组解析及其囊膜蛋白结构与功能分析[D];东北农业大学;2001年
3 周艳君;猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定[D];东北农业大学;2005年
4 薛强;猪繁殖与呼吸综合征病毒双基因多组合DNA疫苗的构建及其免疫效力评价[D];中国农业科学院;2003年
5 唐勇;猪伪狂犬病鉴别诊断研究与猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组序列的测定[D];华中农业大学;2004年
6 田志军;表达PRRSV GP5蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其免疫效力的研究[D];东北农业大学;2005年
7 蒲静;PRRSV对猪肺泡巨噬细胞天然免疫功能影响的分子机制[D];中国农业大学;2005年
8 贺云霞;应用RNAi技术抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的研究[D];中国农业科学院;2006年
9 磨美兰;PRRSV感染对猪肺泡巨噬细胞外源性抗原加工递呈功能的影响[D];中国农业大学;2005年
10 王玉娥;猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白抗原表位的分析[D];中国农业大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘伍梅;PRRSV感染Marc-145细胞的病毒形态发生学、细胞超微结构变化及细胞凋亡的研究[D];四川农业大学;2005年
2 邵蕾;猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备及初步应用[D];吉林农业大学;2007年
3 周盛华;快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫胶体金诊断试纸条的研制[D];东北农业大学;2008年
4 袁婧;猪繁殖与呼吸综合征直接免疫荧光诊断方法的建立及其应用[D];东北农业大学;2008年
5 郭海龙;猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪体内细胞因子与病毒的定量检测[D];中国农业科学院;2002年
6 安同庆;利用噬菌体展示技术鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原表位[D];中国农业科学院;2004年
7 鲁韦韦;猪繁殖与呼吸综合征病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立[D];南京农业大学;2008年
8 王娜;猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞的差异蛋白组学研究[D];福建农林大学;2009年
9 崔盟;猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的间接ELISA检测方法的建立及初步应用[D];扬州大学;2009年
10 许立华;猪繁殖与呼吸综合征病毒N基因及其原核表达产物的检测应用[D];南京农业大学;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978