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不同营养条件对大苞景天愈伤组织诱导及植株再生的影响研究

赵莉  
【摘要】:大苞景天(Sedum amplibracteatum)的带根全草药食兼用,也可观赏。然而种子繁殖极困难,植物自然资源匮乏,高山引种低海拔地区驯化栽培时病虫害发生严重。本文首先介绍了国内外对该属植物繁殖和化学成分的研究现状。试验以野生大苞景天为试验材料,通过单因子试验和正交试验,研究了不同营养条件对愈伤组织诱导、愈伤组织分化、芽生根的影响效应,获得了再生苗,旨在利用生物技术生产种苗,并为生物活性成分研究提供理论依据。研究结果表明: 1.一年中最佳的取材时期是4月份,外植体(茎段和叶片)成愈率高达100%,生长诱导值达88.57,茎段和叶片分别只需要4d和10d形成愈伤组织。其他取材时期,0~4℃低温处理后用200mg/LPVP溶液浸泡15~20min,有利于减轻外植体褐变。MS是外植体的适宜基本培养基类型。 2.愈伤组织诱导前期(接种1个星期后),2,4-D较NAA先诱导出茎段愈伤组织,呈白色颗粒状、结构致密,NAA较2,4-D先诱导出叶片的愈伤组织;后期(接种2个星期后),NAA比2,4-D所诱导出的愈伤组织生长势高,呈淡黄色或绿色颗粒状、结构蓬松。促进茎段和叶片愈伤组织诱导及生长的最佳生长素浓度分别是2,4-D0.2mg/L、NAA3.0mg/L、2,4-D0.5mg/L、NAA4.0mg/L;4.0mg/L 6-BA能使愈伤组织一直保持旺盛分裂状态,愈伤组织最先转绿,且一直较其他处理有更多的绿色芽点,分化率达75%;0.5mg/L TDZ促进愈伤组织形成、1.0mg/L TDZ促进愈伤组织的分化效果最好,生长诱导值和分化率分别达93.27、76.19%。 3.蔗糖和白糖能促进亢进分裂型愈伤组织的形成及生长、生物量的增加,尤以30g/L蔗糖、40g/L蔗糖和20gg/L食用白糖的诱导效果最好,鲜重增长率分别为415.11%、412.86%、421.23%,而葡萄糖只能诱导出衰败型愈伤组织。 4.对愈伤组织的诱导及生长促进效应最好的有机附加物质是450mg/LCH和300mg/L LH,生长诱导值分别为90.16、86.83;450mg/L CH还能促进愈伤组织分化出较多的芽点,分化率达83.87%。 5.茎段愈伤组织诱导和分化的主要影响因子分别是6-BA和蔗糖;叶片和茎段启动培养的最佳配方分别是MS+NAA5.0mg/L+6-BA1.0mg/L+蔗糖25g/L,MS+NAA3.0mg/L+6-BA1.5 mg/C+蔗糖30g/L,生长诱导值分别达88.04、84.43;愈伤组织分化的最佳配方是MS+6-BA4.0 mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖40g/L,分化率为75%。 6.生根的最佳配方:1/2MS+NAA2.0mg/L+蔗糖30g/L,生根率为100%,平均根数为8.0条,根多、细、长(约3.5cm)。


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