三种珍稀濒危观赏竹种遗传多样性研究

【摘要】：本研究利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术，对三种珍稀濒危观赏竹种筇竹(Qiongzhuea tumidinoda Hsueh et Yi)、大叶筇竹(Qiongzhuea macrophylla Hsuehet Yi)、溪岸方竹(Chimonobambusa rivularis Yi)居群间及居群内遗传多样性进行了研究。通过基因组多态性分析，筛选出13个随机引物对筇竹、大叶筇竹，22个溪岸方竹样品进行扩增，得到清晰可重复且多态性明显的条带。在NTSYS程序中，统计这些扩增产物用来计算遗传相似性系数和遗传距离，建立UMPGA(不加权算术平均法)聚类图。在此基础上，探讨了珍稀濒危竹种在保护生物多样性中的价值、策略，并提出三种珍稀濒危竹种保护对策和建议，及其在园林景观营造中的应用。 本实验得到如下结果： 1．RAPD反应程序和反应体系的优化结果：三个竹种的RAPD最优PCR反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性1min，36℃退火1min，72℃延伸1 min30sec，共45个循环；72℃最后延伸10 min；4℃保持。RAPD分析适宜的扩增条件为20μL PCR反应体积，10×Taq酶配套缓冲液(2μL)；1.25UTaq酶；75ng模板DNA；45ng引物；1.88mmol·L~(-1)MgCl_2；0.19 mmol·L~(-1)dNTP。 2．随机引物对三个竹种扩增结果的多态性分析表明：筇竹4个群体共53个个体，13个随机引物共扩增出254条带，其中236个为多态性条带，占92.91％。大叶筇竹3个群体共36个个体，共扩增出250条带，其中236个为多态性条带，占94.40％。溪岸方竹4个群体共24个个体，用22个随机引物共扩增出375条带，其中350个为多态性条带，占93.33％。 3．用多态位点百分率分析三个竹种的居群遗传多样性结果：筇竹2个居群的群体遗传多样性比较，马边大风顶的略高于宜宾筠连的；马边大风顶筇竹3个亚居群的遗传多样性高低顺序为：马边大风顶2(平均海拔1750米)＞马边大风顶1(平均海拔1654米)=马边大风顶3(平均海拔1839米)。马边大风顶大叶筇竹3个亚居群的遗传多样性高低顺序为：马边大风顶3(平均海拔2120米)＞马边大风顶2(平均海拔2030米)＞马边大风顶1(平均海拔1915米)。邛崃天台山溪岸方竹4个亚居群的遗传多样性高低顺序为：五同岗2(平均海拔

【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：S795