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《四川农业大学》 2006年
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一粒系小麦种质资源分子生物学研究

马昭才  
【摘要】：一粒系小麦为二倍体小麦，包括栽培一粒小麦、野生一粒小麦和乌拉尔图小麦。作为多倍体小麦A染色体组的供体物种，一粒系小麦一直被认为是改良小麦的重要基因资源。本文采用APAGE、SDS-PAGE和RAMP标记研究了一粒系小麦之间的遗传关系，并对低分子量谷蛋白亚基基因以及α-醇溶蛋白基因进行了分离、克隆和序列分析。主要结果如下： 1．利用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Acid-polyacrylamide gel electrophoresis，APAGE)检测与分析表明，113份一粒系小麦醇溶蛋白位点存在丰富的等位变异，其醇溶蛋白带纹遗传相似性在0.100和0.960之间，平均变异系数为0.442。在供试材料中，乌拉尔图小麦的遗传多样性最高，而栽培一粒小麦的遗传多样性最低。聚类分析表明，一粒系小麦可分为两大类。在30份野生一粒小麦、41份栽培一粒小麦和42份乌拉尔图小麦中，鉴定的醇溶蛋白等位基因个数分别为37、33和38个，其等位基因平均遗传多样性系数分别为0.9378、0.9314和0.9251。 2．利用十二烷硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 (Sodium Dodecyl Sulphate-polyacrylamide Gel Electrophoresis，SDS-PAGE)检测与分析表明，在113份一粒系小麦材料中，共有7种1Ax和5种1Ay高分子谷蛋白亚基类型，形成20种亚基组合类型。在30份野生一粒小麦中，共有5种1Ax和4种1Ay亚基类型，形成12种亚基组合类型；在41份栽培一粒小麦中，仅发现2种1Ax和2种1Ay亚基类型，形成2种亚基组合类型。在42份乌拉尔图小麦中，也检测到2种1Ax和2种1Ay亚基类型，形成6种亚基组合类型。因此，高分子谷蛋白亚基的变异在野生一粒小麦中较高，而在栽培一粒小麦和乌拉尔图小麦中则相对较低。 3．应用RAMP标记对70份一粒系小麦的遗传多样性进行了检测与分析。结果表明，20对RAMP引物组合共扩增出99条带，平均每对引物可扩增出4.95条多态性带。
【关键词】：一粒系小麦 种质资源 遗传多样性 分子标记 基因克隆
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：S512.1
【目录】：
  • 论文独创性声明5
  • 关于论文使用授权的声明5-6
  • 摘要6-8
  • Abstract8-14
  • 第1章 文献综述与立题依据14-23
  • 1.1 前言14-15
  • 1.2 文献综述15-22
  • 1.2.1 分布与分类15
  • 1.2.2 起源与进化15-16
  • 1.2.3 细胞学16-17
  • 1.2.4 遗传学17-19
  • 1.2.5 种子储藏蛋白19
  • 1.2.6 分子生物学19-20
  • 1.2.7 生理学20-21
  • 1.2.8 农艺与品质性状21-22
  • 1.3 立题依据22-23
  • 第2章 一粒系小麦醇溶蛋白遗传多样性分析23-31
  • 2.1 前言23-24
  • 2.2 材料与方法24
  • 2.2.1 供试材料24
  • 2.2.2 方法24
  • 2.2.3 数据分析24
  • 2.3 结果与分析24-30
  • 2.3.1 醇溶蛋白多态性24
  • 2.3.2 醇溶蛋白遗传相似系数24-27
  • 2.3.3 醇溶蛋白聚类分析27
  • 2.3.4 醇溶蛋白等位基因的鉴定27-30
  • 2.4 讨论30-31
  • 第3章 一粒系小麦高分子谷蛋白亚基遗传变异研究31-36
  • 3.1 前言31
  • 3.2 材料与方法31-32
  • 3.2.1 供试材料31-32
  • 3.2.2 方法32
  • 3.3 结果与分析32-34
  • 3.4 讨论34-36
  • 第4章 一粒系小麦RAMP分子标记遗传多样性分析36-44
  • 4.1 前言36-37
  • 4.2 材料和方法37-39
  • 4.2.1 实验材料37
  • 4.2.2 DNA提取37
  • 4.2.3 RAMP检测37
  • 4.2.4 数据处理37-39
  • 4.3 结果与分析39-40
  • 4.3.1 RAMP多态性39
  • 4.3.2 遗传相似性系数39-40
  • 4.3.3 聚类分析40
  • 4.4 讨论40-44
  • 第5章 一粒系小麦ⅰ型低分子量谷蛋白亚基基因序列分析44-54
  • 5.1 前言44-45
  • 5.2 材料和方法45-47
  • 5.2.1 供试材料45
  • 5.2.2 基因组DNA提取45
  • 5.2.3 PCR引物设计、基因组DNA扩增及电泳分析45
  • 5.2.4 PCR产物回收、纯化45-46
  • 5.2.5 连接并转化46-47
  • 5.2.6 阳性克隆筛选47
  • 5.2.7 序列测定与比较分析47
  • 5.3 结果与分析47-52
  • 5.3.1 PCR扩增、目的片段克隆与测序47-48
  • 5.3.2 核苷酸和氨基酸序列分析48-51
  • 5.3.3 系统进化分析51-52
  • 5.4 讨论52-54
  • 第6章 一粒系小麦α-醇溶蛋白基因序列分析54-65
  • 6.1 前言54-55
  • 6.2 材料和方法55
  • 6.2.1 供试材料55
  • 6.2.2 基因组DNA提取55
  • 6.2.3 PCR引物设计、基因组DNA扩增及电泳分析55
  • 6.2.4 PCR产物回收、纯化55
  • 6.2.5 连接并转化55
  • 6.2.6 阳性克隆筛选55
  • 6.2.7 序列测定与比较分析55
  • 6.3 结果与分析55-62
  • 6.3.1 PCR扩增、目的片段克隆与测序55-56
  • 6.3.2 核苷酸和氨基酸序列分析56-57
  • 6.3.3 氨基酸序列一致性比较分析57-60
  • 6.3.4 氨基酸序列系统进化分析60-62
  • 6.4 讨论62-65
  • 参考文献65-82
  • 致谢82-84
  • 攻读博士学位期间发表的学术论文目录84

【引证文献】
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1 郭志富;类大麦属物种种子贮藏蛋白基因的分子克隆[D];四川农业大学;2008年
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【参考文献】
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【共引文献】
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【同被引文献】
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4 郭志富;类大麦属物种种子贮藏蛋白基因的分子克隆[D];四川农业大学;2008年
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2 本报记者 张洁　丁咏静 通讯员 李光宇;一粒小麦的升值方程式[N];保定日报;2011年
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