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《四川农业大学》 2009年
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小鼠硒蓄积性毒性试验及其残留测定研究

陈明涛  
【摘要】: 本研究根据现在国内外为了补硒而出现大量的富硒饲料、富硒食品以及人为添加硒的情况,以昆明(KM)种小鼠作为动物模型,采用灌胃方式染硒,先进行急性毒性试验,确定小鼠硒LD_(50)值;再进行30d蓄积性毒性试验,通过系统研究硒对小鼠生长性能,生理功能,组织硒、血硒残留的影响,为生产安全肉制品和食品监督部门对食品安全监管提供科学的参考依据。 急性毒性试验方法:将60只小鼠按体重随机分为对照组、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ6个处理组,每组10只,雌雄各半,分笼饲养。以亚硒酸钠(Na_2SeO_3·5H_2O)作为硒源,采用一次性灌胃方式染毒,以小鼠体重计,5个染硒组分别按9.93mg/kg、12.42mg/kg、15.52mg/kg、19.40mg/kg、24.25mg/kg剂量浓度梯度递增灌胃,对照组灌胃等量超纯水,进行急性毒性试验。试验期间记录小鼠临床症状以及死亡情况。并对死亡小鼠进行病理解剖观察及组织切片观察。 急性毒性试验结果表明: 小鼠经口一次性灌胃的LD_(50)值为15.86mg/kg,其95%可信区间范围为14.04~17.92mg/kg。小鼠解剖观察及组织切片观察结果说明,小鼠硒急性中毒死亡的原因是心肌衰弱及呼吸衰竭。肝脏和心脏是硒急性中毒的主要靶器官。 蓄积性毒性试验方法:将40只小鼠按体重随机分为对照组、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ4个处理组,每组10只,雌雄各半,分笼饲养。以亚硒酸钠(Na_2SeO_3·5H_2O)作为硒源,采用灌胃方式染硒,以小鼠体重计,3个染硒组分别按0.317mg/kg(1/50 LD_(50))、1.586mg/kg(1/5 LD_(50))、7.93mg/kg(1/2 LD_(50))剂量梯度递增灌胃,对照组灌胃等量超纯水,进行30d蓄积性毒性试验。试验过程中测定小鼠的生长性能,每10d尾静脉采血进行白细胞分类计数,30d后处死小鼠进行剖解观察,器官组织病理学观察,计算脏器指数,测定血液生化指标及肝脏、肾脏、肌肉、血液中硒的残留量。 蓄积性毒性试验结果表明: 硒水平为0.317mg/kg时,对小鼠的生长性能有明显的促进作用。该剂量组小鼠全期净增重12.19g/只(对照组11.00g/只),全期增重率47.00%(对照组43.64%),全期采食量195.65g/只(对照组180.81g/只),全期料体比16.05(对照组16.44)。当硒水平增加为1.586mg/kg和7.93mg/kg时,会明显降低小鼠的生长性能。这两组的小鼠与对照组相比,全期净增重分别下降了1.82g/只和5.56g/只,全期采食量分别下降了20.32g/只和63.09g/只,全期料体比分别升高了1.04和5.20。说明当染硒剂量达到一定程度后,随着染硒剂量的增高,小鼠生长受阻现象越明显。 7.93mg/kg的硒水平会造成小鼠血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)的活性显著提高,证明了高硒对动物肝脏有明显的损害作用。与剖解观察肝脏有明显肿大以及颜色变化相一致。 当硒水平为7.93mg/kg时,对小鼠肝脏、肾脏等器官组织造成了不同程度的损伤。肝脏出现细胞浊肿、胞浆疏松、颗粒变性、空泡变性。肾脏出现肾小球体积增大,毛细血管出血;肾小管上皮细胞胞浆嗜酸性增强,颗粒变性。 原子荧光分光光度计法对小鼠肝脏、肾脏中硒残留测定的结果:对照组的肝硒残留量为0.087mg/kg,肾硒残留量为0.145mg/kg;Ⅰ组(0.317mg/kg)的肝硒、肾硒残留量分别为0.125mg/kg、0.257mg/kg,是对照组的1.44倍和1.77倍,说明0.317mg/kg的染硒剂量与小鼠对硒的需求量比较接近;Ⅱ组(1.586mg/kg)肝硒、肾硒残留量分别为0.240mg/kg、0.381mg/kg,是对照组的2.76倍和2.63倍,说明1.586mg/kg的染硒剂量已经超过小鼠对硒的需求量;Ⅲ组(7.93mg/kg)的肝硒、肾硒残留量分别为0.993mg/kg、1.257mg/kg,是对照组的11.42倍和8.67倍,说明7.93mg/kg的染硒剂量远远的超过小鼠对硒的需求量。 硒在小鼠体内的蓄积系数为5.5,说明硒具有轻度蓄积性。 上述结果说明低剂量硒对机体有促进生长的作用;随着硒剂量增加,对机体生长出现阻碍作用;高剂量硒对机体肝、肾等组织有明显的损害作用;而且硒在机体组织中有蓄积作用。因此,虽然硒是人和动物不可缺少的微量元素,但也不能摄入过多,否则,会造成对机体的损害。
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R114

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