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《四川农业大学》 2010年
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禽康散在CEF内抗NDV效果及对SPL增殖和NO分泌影响的研究

廖轶  
【摘要】: 鸡新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种急性、高度接触性传染病。该病是危害养鸡业发展的主要疫病之一,至今仍未得到有效控制。早期研究表明复方中药禽康散在体内具有明显的抗NDV作用。本课题在此基础上,研究复方中药禽康散防治鸡新城疫的细胞生物学机理,为该药临床应用及新药研发提供理论依据。为此进行一系列试验并取得如下结果: 1.禽康散对鸡胚成纤维细胞(CEF)增殖影响本试验将禽康散提取液(1g/ml)用培养液稀释成2-2、2-3、2-4、2-5、2-6、2-7、2-8、2-9、2-10g/ml九个浓度,按每孔0.1ml分别加入到体外培养的CEF中,通过测定细胞OD值变化,判定不同浓度中药对细胞增殖的影响。结果表明,禽康散在浓度为2-6、2-7、2-8g/ml时具有明显促进CEF增殖的作用,在浓度为2-2、2-3、2-4g/ml时具有明显抑制CEF增殖的作用。药物最大无毒浓度为2-5g/ml。 2.禽康散体外抗NDV作用本试验将2-5、2-7、2-9g/ml三个浓度中药提取液0.1ml和0.1ml NDV(200倍TCID50)以三种方式[即中药与病毒混合感作后加入(直接杀灭组)、先加入中药后接种病毒(预防组)、先接种病毒后加入中药(治疗组)]加入体外培养的CEF中,通过测定CEF OD值的变化判定各浓度中药在三个环节上的抗病毒作用。结果显示,直接杀灭组的病毒抑制率最高(0.749),表明禽康散对NDV的体外直接杀灭作用最好。预防组与治疗组的病毒抑制率分别为0.525、0.474,但两者无显著性差异。 3.禽康散对体外培养鸡脾淋巴细胞(SPL)增殖的影响本试验将禽康散提取液(1g/ml)用培养液稀释成2-2、2-3、2-4、2-5、2-6、2-7、2-8、2-9、2-10g/ml九个浓度,按每孔0.1ml分别加入到体外培养的鸡脾淋巴细胞中,通过MTT法测定细胞OD值变化,判定不同浓度中药对细胞增殖的影响。结果显示,禽康散在浓度为2-4、2-5、2-6、2-7g/ml时具有明显促进体外培养SPL增殖的作用,在浓度为2-2g/ml时具有明显抑制SPL增殖的作用。 4.禽康散对鸡脾淋巴细胞NO分泌的影响本试验将2-2、2-5、2-8g/ml三个浓度中药提取液0.1ml分别加入体外培养的SPL中,用试剂盒测定培养液中NO及一氧化氮合酶(NOS)含量,判定禽康散对淋巴细胞NO分泌的影响。结果显示,三个浓度中药提取液均能极显著增加NO及NOS含量,以中药浓度2-2g/ml组(接种量0.1ml,即25mg)效果最明显。 因此,禽康散可以通过促进CEF、SPL的增殖,通过促进SPL分泌NO来发挥抗NDV作用;禽康散在体外培养的CEF内对NDV具有强的杀灭作用。
【学位授予单位】:四川农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S858.31

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【参考文献】
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