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熊果酸对血管内皮细胞增殖的影响及其机制

李伟  
【摘要】:目的:通过体外观察熊果酸(Ursolic acid)对人类脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)中KDR(VEGFR2)、ERK1、p-ERK1、c-Jun、CyclinD1表达的影响,探讨熊果酸对HUVECs增殖的影响及其机制。 方法:体外培养HUVECs,经熊果酸按浓度梯度:0、5、10、20、40、80μmol/L处理36h和熊果酸20μmol/L按时间梯度:0、12、24、36、48h处理。MTT和台盼蓝染色法检测熊果酸对人类脐静脉内皮细胞增殖的作用;Western blot法检测KDR、ERK1、p-ERK1、c-Jun和cyclinD1蛋白的表达情况。免疫荧光法检测ERK1、p-ERK1、KDR蛋白的表达和细胞定位;激光共聚焦扫描显微镜检测ERK1蛋白的表达和移位情况。 结果:熊果酸对人类脐静脉内皮细胞的抑制作用呈剂量-时间依耐性(P0.05); HUVECs经熊果酸处理36h的半数抑制浓度为20μmol/L;Western blot结果显示熊果酸抑制KDR、ERK1、p-ERK1、c-Jun和cyclinD1蛋白的表达呈时间依耐性(P0.05);免疫荧光法显示,经熊果酸处理后,p-ERK1、ERK1、KDR蛋白的荧光强度比空白对照组和溶剂对照组明显减弱,且具有时间依耐性;激光共聚焦扫描显微镜显示经熊果酸处理的ERK1蛋白的荧光强度与空白对照组相比,明显减弱,且随着时间的增加,ERK1核内表达的荧光强度也逐渐减弱。 结论:熊果酸可经ERK信号通路抑制人类脐静脉血管内皮细胞的增殖。


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