收藏本站
《重庆医科大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

新型基因及药物微泡载体系统的制备研究

王红红  
【摘要】:目的:利用生物素亲和素系统,将阳离子纳米脂质体连接在脂质微泡表面,制备一种新型基因微泡载体。 方法:1、将一定摩尔比的二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)与生物素化聚乙二醇二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(Bio-PEG-DSPE)置于甘油及PBS混悬液中,并加入微量异硫氰酸荧光素(FITC),充分混匀后,采用机械振荡法,制备生物素化脂质微泡(Bio-LMB)。同时,用二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)取代Bio-PEG-DSPE,采用相同方法制备非生物素化脂质微泡(LMB)作为对照。 2、取一定摩尔比的氢化大豆卵磷脂(HSPC)、3β-[N-(N′,N′-二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇(DC-Chol)、Bio-PEG-DSPE溶于适量氯仿,并加入微量罗丹明6G,充分溶解后,采用薄膜分散-膜挤压法,制备生物素化阳离子纳米脂质体(Bio-CNLP)。同时,取相同比例的HSPC与DC-Chol,采用相同方法制备非生物素化阳离子纳米脂质体(CNLP)作为对照。 3、将Bio-LMB与过量的亲和素4℃孵育30 min,静置后抽吸下层过量亲和素,同时加入过量Bio-CNLP,4℃继续孵育30 min。相同方法连接LMB与CNLP作为对照组。 4、取漂浮在上层的乳液,行激光共聚焦显微镜观察实验组与对照组的连接效果。 结果:激光共聚焦显微镜下Bio-LMB + Bio-CNLP组可见绿色Bio-LMB壁因连接Bio-CNLP而不光滑,周围可见数量不等的红色小圆形点状Bio-CNLP呈花环状聚集,而LMB + CNLP组LMB壁光滑,周围未见CNLP聚集。 结论:采用生物素亲和素连接系统,可将Bio-CNLP牢固连接于Bio-LMB表面,为探索新型基因微泡载体提供一种新思路,有望为肿瘤靶向基因治疗提供一种新方法。 第二部分脂质微泡-PLGA纳米微球复合体制备的实验研究 目的:采用碳二亚胺法,将PLGA纳米微球连接在脂质微泡表面,制备一种新型药物微泡载体。 方法:1、将一定摩尔比的二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、氨基化聚乙二醇二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(NH2-PEG-DSPE)置于甘油及PBS溶液的混悬液中,充分混匀后,采用机械振荡法制备表面带氨基脂质微泡(NH2-LMB)。 2、采用双乳化法制备普通乳酸/羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米微球(NP)。 3、取部分NP,采用碳二亚胺法活化其表面的羧基得到活化的PLGA纳米微球(NP-COOR)。 4、分别将过量NP与NP-COOR加入两管等量NH2-LMB中,4℃孵育,12、24、36、48 h后,取上层漂浮的乳液,在光镜下观察连接效果。 结果:12、24 h后,在光镜下两管微泡周围都未见纳米微球聚集。36 h后,NP + NH2-LMB组脂质微泡周围未见纳米微球的聚集; NP-COOR + NH2-LMB组部分脂质微泡周围可见少量纳米微球聚集。48 h后,光镜下NP + NH2-LMB组脂质微泡表面光滑,周围未见纳米微球的聚集;NP-COOR + NH2-LMB组脂质微泡表面不光滑,周围布满数量不等的小圆形的纳米微球,呈花环状。 结论:采用碳二亚胺法,可将PLGA纳米微球成功连接于脂质微泡表面,为探索一种新型药物微泡载体提供一种新思路,有望为肿瘤靶向药物治疗提供一种新途径。
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R730.5

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 龚金兰;汪森明;胡喜钢;曹漫明;张积仁;;肿瘤靶向性药物载体叶酸-壳聚糖微球的制备及特性研究[J];南方医科大学学报;2008年12期
2 黄铁军;方光光;雷勇;;~(99m)Tc-D_2C_5用于人肝细胞癌肿瘤受体显像研究[J];河北医学;2007年10期
3 汪朝霞;王志刚;;超声微泡造影剂携基因或药物治疗研究[J];中国介入影像与治疗学;2006年04期
4 王秩秋;单良;王颂平;Alexandru Korotcov;梁兴杰;;转铁蛋白导向脂质体核磁造影剂纳米粒子(Tf~(NIR)-Lip~(NBD)-Magnevist)——一种肿瘤靶向磁共振造影剂[J];生物物理学报;2008年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张浩;孙健;;靶向给药系统的研究进展[J];山东畜牧兽医;2012年07期
2 张瑜;郭大静;;PLGA介导的分子影像学研究现状及进展[J];重庆医学;2012年30期
3 张琳琳;郎美东;;pH敏感性叶酸修饰羧甲基壳聚糖纳米粒子作为紫杉醇载体的研究[J];功能高分子学报;2013年02期
4 乔明艳;;紫杉醇纳米级给药系统研究概述[J];黑龙江医药;2010年05期
5 王玲昀;陈秋云;魏斌;;肿瘤诊断的MRI造影剂[J];化学进展;2010年01期
6 张亚东;陆洁;;~(99m)Tc标记的叶酸肿瘤显像剂[J];化学进展;2010年04期
7 沈爱军;董海青;温惠云;徐梦;李永勇;王培军;;钆类造影剂用于肿瘤靶向性成像[J];化学进展;2011年04期
8 费学宁;刘丽娟;朱森;刘玉茹;;叶酸受体介导的肿瘤靶向光学成像技术[J];化学进展;2011年08期
9 梅杰;程远;;超声微泡造影剂在聚焦超声开放血脑屏障中的应用[J];中国介入影像与治疗学;2008年06期
10 张艳;李俊来;;实时灰阶超声造影在乳腺肿瘤中的应用[J];中国介入影像与治疗学;2009年02期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 王志刚;;超声分子影像学研究进展[A];2010’中国西部声学学术交流会论文集[C];2010年
2 王志刚;;模态超声造影剂研究进展[A];2010年超声医学和医学超声论坛会议论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨闯;抗VEGFR2-奥沙利铂免疫脂质体对结直肠癌靶向治疗的研究[D];重庆医科大学;2011年
2 艾晓辉;多西环素在斑点叉尾鮰中安全使用及快速检测技术研究[D];四川农业大学;2011年
3 谢辉;用于大鼠脑胶质瘤磁共振成像的乳铁蛋白偶联的超顺磁性氧化铁纳米粒的研究[D];华中科技大学;2011年
4 范辉;超分子纳米粒作为抗肿瘤药物和基因协同给药体系的研究[D];浙江大学;2011年
5 梁进;纳米茶多酚的制备及其抗肿瘤作用研究[D];南京农业大学;2011年
6 朱梅;载VEGF高分子缓释微粒促进心肌梗死兔血管新生的实验研究[D];山东大学;2011年
7 宦梦蕾;肿瘤靶向阿霉素前体药物的设计合成及其活性研究[D];第四军医大学;2009年
8 廖锦堂;肝细胞癌超声造影定量参数与其分化程度和微血管密度相关性研究[D];中南大学;2008年
9 付赤学;超声激发载紫杉醇微泡跨血脑屏障靶向脑肿瘤的实验研究[D];第三军医大学;2008年
10 刘莹莹;液态氟碳纳米脂质微粒靶向识别存活心肌实验研究[D];华中科技大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 曹银;携带基因微气泡超声造影剂的研究[D];华东理工大学;2011年
2 徐小艳;乳腺肿瘤的超声造影与微血管密度的关联性研究[D];山西医科大学;2011年
3 孙晓莉;叶酸介导EGCG白蛋白肿瘤靶向纳米粒的制备工艺优化与表征[D];东北林业大学;2011年
4 魏洪芬;超声介导半乳糖化多西他赛长循环纳米粒靶向治疗荷人肝癌裸鼠移植瘤的实验研究[D];福建医科大学;2011年
5 吴菲;低功率射频诱导长春瑞滨热敏脂质体抗兔VX2肿瘤疗效的实验研究[D];河北北方学院;2011年
6 骆杰;靶向乳腺癌HER-2受体包裹紫杉醇的高分子超声造影剂的制备及初步实验研究[D];重庆医科大学;2011年
7 钱滢;超声辐照微泡介导双自杀基因系统对裸鼠乳腺癌体内抑瘤作用的研究[D];中南大学;2011年
8 孙晓利;新型载基因自组装聚离子复合物胶束的研究[D];山东大学;2011年
9 刘东伯;靶向纳米造影剂C225-USPIO对EGFR高表达鼻咽癌CNE1细胞系磁共振免疫显像研究[D];华中科技大学;2010年
10 荣利;肝靶向半乳糖化棕榈酰壳聚糖聚合物胶束作为药物载体的研究[D];广东药学院;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 黄铁军;刘志恒;喻明霞;;人肝细胞癌转铁蛋白受体显像及靶向治疗研究[J];华中医学杂志;2007年01期
2 刘学兵;王志刚;许川山;;载药脂质超声微泡造影剂的制备及应用研究[J];中国介入影像与治疗学;2008年02期
3 冉海涛,任红,王志刚,郑元义,张群霞,李小东,许川山;包裹阿霉素的高分子材料微泡声学造影剂制备及显影效果实验研究[J];临床超声医学杂志;2005年04期
4 张亚萍;冉海涛;;超声激活卟啉类化合物治疗恶性肿瘤的研究进展[J];临床超声医学杂志;2008年11期
5 吴振宇,陈钟,黄华,田鹏鹏;离子凝胶法制备壳聚糖纳米微粒[J];南通大学学报(医学版);2005年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李肖蓉,邵力正,钱大钧;经静脉新型白蛋白微泡心肌声学造影的实验研究[J];中华超声影像学杂志;2003年04期
2 史京萍,王建华,李肖蓉,邵力正,张斌,卢春,吴文溪;超声介导自制白蛋白微泡和声诺维对体外报告基因转染效率的比较研究[J];南京医科大学学报(自然科学版);2005年06期
3 罗亮,李丽君,程永清,张雪娇,王一礼;多聚体超声造影剂微泡携带DNA能力研究[J];中国医学影像技术;2005年04期
4 张群霞,王志刚,冉海涛,孙建明,赵建农,郭大静,宋烈军;超声微泡介导VEGF基因治疗下肢血管闭塞[J];中国医学影像技术;2005年04期
5 张虎,王宏宇;微泡和超声 从诊断到治疗[J];中国民康医学;2005年08期
6 黄瑛,吕夕明,孙海燕,黄品同,黄福光;微泡型多囊肝的超声诊断[J];中国超声诊断杂志;2005年04期
7 全冠民;应用CO_2微泡增强的B超检查腺瘤性增生灶中的肝细胞癌[J];国外医学.肿瘤学分册;1994年03期
8 夏红梅,高云华,卞爱娜,谭开彬,刘平,刘政;亲血栓性靶向超声造影剂的制备及体外实验初步研究[J];中华超声影像学杂志;2004年11期
9 逯敏飞,程永清,李丽君,罗亮;微泡超声造影剂:一种新型的药物靶向载体[J];中国医学影像技术;2005年04期
10 罗支农,周姝,陈薏兰,郭会平,李晖,罗思英;手振微泡子宫输卵管声学造影的临床研究[J];中华超声影像学杂志;1997年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈茜;周青;汪迎晖;王潇;郭瑞强;;携抗ICAM-1抗体的Sono Vue微泡造影剂靶向识别受损内皮的实验研究[A];第十届全国超声心动图学术会议论文[C];2010年
2 杨伟;严飞;靳巧锋;陈娟娟;李露;郑海荣;;淋巴细胞靶向微泡造影剂的体外研究[A];中国声学学会第九届青年学术会议论文集[C];2011年
3 陈茜;周青;汪迎晖;王潇;郭瑞强;;携抗ICAM-1抗体的SonoVue微泡造影剂靶向识别受损内皮的实验研究[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
4 钟世根;王志刚;张群霞;骆杰;张辉;;载10-HCPT靶向脂质微泡的制备及体外寻靶能力实验研究[A];中国超声医学工程学会第八届全国腹部超声学术会议论文汇编[C];2010年
5 卞叶萍;李鹏;童嘉毅;陈龙;王庆捷;沈祥波;宋佳贤;;超声联合一氧化氮微泡体外干预大鼠骨髓间充质干细胞安全性的研究[A];中国微循环学会2011年全国学术会议论文汇编[C];2011年
6 周希瑗;;激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞膜通透性影响的实验研究[A];中国超声医学工程学会第七届全国眼科超声诊断学术会议论文摘要汇编[C];2009年
7 张群霞;王志刚;冉海涛;郑元义;李晓东;卢岷;;超声破坏微泡对心肌细胞膜通透性影响的研究[A];第十届全国超声心动图学术会议论文[C];2010年
8 纪毅璞;左岩;成惠峰;徐志伟;彭佳良;张洋;;高透明无微泡复合防火玻璃研究[A];2010全国玻璃技术交流研讨会论文集[C];2010年
9 程娟;徐斐燕;顾胜利;陈亚青;;超声微泡造影剂介导EGFP对兔眼视网膜转染效率的实验研究[A];中国超声医学工程学会第三次全国浅表器官及外周血管超声医学学术会议(高峰论坛)论文汇编[C];2011年
10 王志刚;凌智瑜;冉海涛;任红;黄爱龙;刘杞;赵春景;唐海林;宫琳;蒲世玉;钱妍;;超声微泡造影剂对心肌组织的生物学效应及介导VEGF基因转染大鼠心肌的实验研究[A];庆祝中国超声医学工程学会成立20周年——第八届全国超声医学学术会议论文汇编[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 胡连荣;“纳米微泡”原理挑战交叉学科[N];大众科技报;2004年
2 韩彬 通讯员 韩建栋 祁双虎;微泡技术:杀入市场的黑马[N];中国石油报;2004年
3 唐爱平实习生 龚卓 通讯员 张莉;三一研制成世界首台高效微泡沥青砂浆车[N];湖南日报;2007年
4 赵碧君;三一重工研制成高效微泡沥青砂浆车[N];上海证券报;2007年
5 邓常青夏天;三一重工创新产品成功应用[N];证券时报;2007年
6 ;前景诱人的治疗性超声[N];中国中医药报;2002年
7 汪炳青 周李帅;矿大副校长荣获中国工程界最高奖项[N];中华新闻报;2008年
8 伍振;京津城际轨道施工创造三项全国记录[N];中国质量报;2007年
9 ;治疗性超声前景光明[N];中国医药报;2002年
10 ;奇葩盛开满园香[N];中国医药报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 皋月娟;微泡增强的超声空化阻断肝脏和肝肿瘤微循环的实验研究[D];第二军医大学;2010年
2 胡敏;超声微泡介导基因转染防治移植静脉再狭窄的实验研究[D];华中科技大学;2010年
3 王冬;纳米级微泡增强乳腺肿瘤显像效果及高强度聚焦超声消融效果的实验研究[D];重庆医科大学;2012年
4 区文超;脂质微泡的制备及血小板受体靶向微泡构建的初步研究[D];第一军医大学;2004年
5 王兴华;超声及微泡造影剂介导质粒GFP转染小鼠骨骼肌的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
6 吴爵非;携VCAM-1单抗磁性靶向微泡评价动脉粥样硬化斑块早期炎症[D];南方医科大学;2011年
7 郝亚宁;超声微泡介导HGF转染大鼠损伤面神经的促进作用[D];重庆医科大学;2013年
8 张波;一种新型基因载体—纳米级超声微泡的制备及其介导PNP/Fludarabine自杀基因系统治疗肝癌的实验研究[D];中南大学;2010年
9 康娟;载多西紫杉醇脂质超声微泡联合超声靶向微泡破裂对肝癌作用的实验研究[D];重庆医科大学;2010年
10 修建成;微泡空化对大鼠微血管组织结构的影响及其意义[D];第一军医大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 韩楠;超声破坏微泡对大鼠皮肤创面愈合影响的实验研究[D];大连医科大学;2010年
2 杨燕;携pDsRed2-N1-CD/UPRT融合基因的超声微泡对肺癌细胞的杀伤作用[D];重庆医科大学;2011年
3 赵洋;微泡增强的超声空化抑制兔VX_2肿瘤生长和转移的实验研究[D];第三军医大学;2010年
4 童林艳;微泡造影剂开放血脑屏障和转基因的实验研究[D];重庆医科大学;2004年
5 黄鹏宇;纳米微泡与SonoVue微泡的超声造影对比及其对动脉粥样硬化斑块的靶向性研究[D];浙江大学;2010年
6 黄泽君;超声辐照载诺帝脂质微泡抗兔VX2肿瘤血管生成的实验研究[D];第三军医大学;2010年
7 张雪娇;包膜微泡超声造影剂的制备研究[D];西北工业大学;2005年
8 胡广全;携带RGD环寡肽序列靶向超声微泡结合对比超声评价动脉血栓形成的实验研究[D];南方医科大学;2010年
9 赵敏;L-Selectin靶向微泡声学特性的初步实验研究[D];遵义医学院;2010年
10 唐艳;超声微泡造影剂介导p53基因转染宫颈癌HeLa细胞的基础研究[D];重庆医科大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026