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《重庆医科大学》 2011年
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丹参素对肝星状细胞TGFβ_1/Smads/ERK信号通路的影响

唐静  
【摘要】:目的:探讨丹参素对肝星状细胞(HSC)的转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)/Smads/细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路的影响及其相互关系。 方法:体外分离培养大鼠HSC,MTT法筛选丹参素最适浓度;以最适浓度丹参素及ERK阻断剂(PD98059)作用于经TGFβ1处理的HSC,CCK-8法检测各组HSC增殖;免疫细胞化学染色法检测各组HSC的α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及Ⅰ、Ⅲ型胶原;RT-PCR检测各组HSC的Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表达;Western blot法检测各组Smad2/3、ERK1/ 2蛋白磷酸化及Smad7蛋白水平。 结果:0.0625-0.25mmol/L的丹参素可有效抑制HSC增殖,作为最适处理浓度;PD98059(100μmol/L)抑制TGFβ1诱导的HSC增殖(P0.01),丹参素剂量依赖性抑制TGFβ1诱导的HSC增殖(P0.01);TGFβ1促进细胞内α-SMA及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达(P0.01),PD98059及丹参素降低TGFβ1诱导的α-SMA及Ⅰ、Ⅲ型胶原水平(P0.01);PD98059可拮抗TGFβ1诱导的Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表达(P0.05,P0.01),丹参素下调Smad2、Smad3 mRNA水平,但上调Smad7 mRNA水平(P0.01);PD98059及丹参素抑制TGFβ1诱导的Smad2/3、ERK1/2蛋白磷酸化(P0.01),但对TGFβ1诱导的Smad7蛋白表达上调有不同效应(P0.01)。 结论:TGFβ1上调Smad2、Smad3 mRNA表达及蛋白磷酸化,进而诱导HSC增殖、活化及胶原合成。ERK通路可能参与HSC中TGFβ1诱导Smad基因表达及蛋白磷酸化过程。丹参素对TGFβ/Smad/ERK信号通路具有抑制效应。
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285.5

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