收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

结直肠息肉发生、发展及恶变的机制研究

向丽  
【摘要】:目的:采用免疫组织化学方法在结直肠息肉,腺瘤,腺癌渐变过程中检测出有重要意义的分子标记,并通过跨胎盘RNAi技术干扰其在子一代小鼠的表达,构建BMP息肉小鼠模型,初步证实BMP、TLR3、TLR4在结直肠息肉发生、发展、恶变的机制中有重要作用。方法:1)应用免疫组织化学方法(sP法)检测MBP2,TLR4, TLR3,COX2在儿童结直肠幼年性息肉,儿童结直肠错构瘤样息肉,成人结直肠炎性息肉,结直肠腺瘤,结直肠腺癌组织中的表达情况;2)将孕鼠随机分Ringer’s液空白对照组(空白组)、pSES阴性对照组(阴性组)、pSES-SiBMP4实验组(实验组),采用跨胎盘RNAi技术,在孕鼠的尾静脉注射沉默BMP4基因的质粒,通过跨胎盘RNAi干扰子一代小鼠的BMP4的表达,分别于出生1周,8周,10周处死子代小鼠,解剖观察子一代小鼠的结直肠肠道息肉位置及数量情况。结果:一、免疫组织化学结果:1.BMP2在腺体组织中呈现弥漫均一细胞浆的棕黄色颗粒的表达,在儿童幼年性息肉组(OD68.65±18.15),儿童错构瘤样息肉组(OD34.8±18),成人炎性息肉组(OD42.9±10.24),结直肠腺瘤组(OD50.3±10.2)中的表达明显高于结肠腺癌组(OD19.1±5.3),在结肠腺癌组中明显降低的表达确有显著差异(p0.05)。2. TLR4的表达情况:1)儿童幼年性息肉组(OD4.05±1.36)与儿童错构瘤样息肉组之间的表达有显著差异性(p0.05);儿童幼年性息肉组与结直肠腺癌组中的表达有显著差异性(p0.05)。2)儿童错构瘤样息肉组(OD29.5±11)和结直肠腺瘤组的表达之间有显著差异(p0.05)。3)结直肠腺瘤组(OD16.2±6.5)的表达与结直肠腺癌组(OD47.6±11.5)之间的表达有显著差异(p0.05)。3. TLR3在儿童幼年性息肉组(OD270±90.42),儿童错构瘤样息肉组(OD191.3±47),结直肠腺瘤组(OD147.1±58),结直肠腺癌组(OD94.9±39.8)中的表达呈逐步下降趋势,在结直肠腺癌组中明显降低的趋势在相互比较中有显著差异(p0.05)。4.COX2的表达主要是弥散的表达在腺上皮的细胞胞浆和细胞核膜上,在儿童幼年性息肉组(OD60.7±20.7),儿童错结肠腺瘤组(OD69.1±31.5),结直肠腺瘤组(OD53.8±16.4),结肠腺癌组(OD60.5±20.4)中的表达均高于成人结直肠息肉组(OD12.65+4.21),但相互比较无显著差异(p0.05)。二、BMP息肉小鼠模型特点:1.运用RT-PCR,蛋白印迹法检测子一代小鼠结肠粘膜的BMP4的表达均较同周龄正常对照组显著降低;2.在出生后1周未见确切息肉样组织形成,第8周时可见包块样突起,经HE染色可见腺体上皮增生,病理证实为息肉形成,第10周包块突起明显,数量较8周增多,HE染色同样证实为结直肠息肉形成,未见腺瘤及腺癌样改变。结论:1)通过免疫组织化学的方法,证明在结直肠息肉,腺瘤,腺癌的渐变过程中有意义的三种分子标记:BMP缺失影响肠道的腺上皮的分化和增殖过程,导致结直肠息肉,腺瘤,腺癌的渐变过程;TLR3的低表达可能预示息肉恶变的高倾向;TLR4是结直肠息肉,腺瘤,腺癌的渐变过程的重要分子标记。2)通过跨胎盘RNAi技术首次成功构建了BMP息肉小鼠模型,为研究结直肠息肉发生、发展及恶变的机制奠定了实验室基础。通过本实验初步证实BMP,TLR3,TLR4参与了结直肠息肉的发生、发展和恶变机制。 目的:通过免疫组织化学的方法检测结直肠息肉,结直肠腺瘤,结直肠腺癌中不同分子标记的表达情况,为结直肠息肉,结直肠腺瘤,结直肠腺癌的渐变过程找到有意义的分子标记物。方法:应用免疫组织化学方法(sP)法检测MBP2、TLR3、TLR4、COX2在儿童结直肠幼年性息肉,儿童结直肠错构瘤样息肉,成人结直肠炎性息肉,结直肠腺瘤,结直肠腺癌组织中的表达情况。结果:1.BMP2在腺体组织中呈现弥漫均一细胞浆的棕黄色颗粒的表达,在儿童幼年性息肉组(OD68.65±18.15),儿童错构瘤样息肉组(OD34.8±18),成人炎性息肉组(OD42.9±10.24),结直肠腺瘤组(OD50.3±10.2)中的表达明显高于结肠腺癌组(OD19.1±5.3),在结肠腺癌组中明显降低的表达确有显著差异(p0.05)。2. TLR4的表达情况:1)儿童幼年性息肉组(OD4.05±1.36)与儿童错构瘤样息肉组之间的表达有显著差异性(p0.05);儿童幼年性息肉组和结肠腺瘤组之间的表达无显著差异(p0.05);儿童幼年性息肉组与结直肠腺癌组中的表达有显著差异性(p0.05)。2)儿童错构瘤样息肉组(OD29.5±11)和结直肠腺瘤组的表达之间有显著差异(p0.05);儿童错构瘤样息肉组与结直肠腺癌组的表达之间无显著差异(p0.05)。3)结直肠腺瘤组(OD16.2±6.5)的表达与结直肠腺癌组(OD47.6±11.5)之间的表达有显著差异(p0.05)。3. TLR3在儿童幼年性息肉组(OD270±90.42),儿童错构瘤样息肉组(OD191.3±47),结直肠腺瘤组(OD147.1±58)呈逐步下降趋势,在分别与结直肠腺癌组(OD94.9±39.8)的比较中有显著差异(p0.05)。4.COX2的表达主要是弥散的表达在腺上皮的细胞胞浆和细胞核膜上,在儿童幼年性息肉组(OD60.7±20.7),儿童错结肠腺瘤组(OD69.1±31.5),结直肠腺瘤组(OD53.8±16.4),结肠腺癌组(OD60.5±20.4)中的表达均高于成人结直肠息肉组(OD12.65+4.21),但相互比较无显著差异(p0.05)。结论:在结直肠息肉,结直肠腺瘤,结直肠腺癌的渐变过程中,BMP的缺失影响肠道的腺上皮的分化和增殖过程,导致结直肠息肉形成,甚至恶变;TLR3的低表达可能预示息肉恶变高倾向;TLR4是结直肠息肉,腺瘤,腺癌的渐变过程的重要分子标记。 目的:采用跨胎盘RNAi的方法沉默孕鼠的BMP4,导致子一代小鼠结直肠多发性息肉形成从而建立BMP结肠息肉小鼠模型,证明BMP参与小鼠结直肠息肉发生机制。方法:将孕鼠随机分Ringer’s液空白对照组(空白组)、pSES阴性对照组(阴性组)、pSES-SiBMP4实验组(实验组),采用跨胎盘RNAi技术,在孕鼠的尾静脉注射沉默BMP4基因的质粒,通过跨胎盘作用干扰子一代小鼠的BMP4的表达,分别于出生1周,8周,10周处死子代小鼠,解剖观察子一代小鼠的结直肠的息肉位置及数量。结果:1.运用RT-PCR,蛋白印迹法检测子一代小鼠的结直肠BMP4的表达均较正常同龄对照组显著降低;2.在出生后第1周未见确切息肉样组织形成,第8周时可见包块样突起,经HE染色可见腺体上皮增生病理证实为息肉形成,第10周包块突起明显,数量较第8周增多,HE染色同样证实为结直肠息肉形成,未见腺瘤及腺癌样改变。结论:1.首次成功建立了BMP结直肠息肉小鼠模型,证明BMP参与了结直肠息肉形成机制。2.跨胎盘RNAi技术在干扰基因表达方面有广阔的应用前景,值得进一步推广和完善。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 耿振宏;;结直肠息肉的病理学及临床意义[J];中国现代医药杂志;2007年09期
2 徐泉,李恭才,张宪生,高亚,郭正团,段怡涛;改良Soave’s术式在小儿结、直肠息肉疾病中的应用(附26例报告)[J];陕西肿瘤医学;1997年01期
3 ;诊断结直肠息肉多层面CT结肠成像有价值[J];河南医学研究;2004年04期
4 郭荣;吕燕;孙茜;贾欣永;;氩离子凝固术联合高频电切术治疗结直肠息肉102例[J];山东医药;2006年17期
5 郭荣;王明英;吕燕;曹允芳;;内镜下氩离子凝固术治疗结直肠息肉92例护理体会[J];齐鲁护理杂志;2007年02期
6 邵春法;王卫军;谢健进;应小妮;方钱;李剑锋;陆爱国;郑民华;;腹腔镜联合结肠镜治疗复杂、特殊类型的结直肠息肉[J];中国微创外科杂志;2011年05期
7 蔡岳华;;一家两代7例家族性结直肠息肉病临床病理分析[J];实用肿瘤学杂志;1987年02期
8 林华蓉;;无痛肠镜下行结直肠息肉高频电凝切除术护理体会[J];现代临床医学;2007年03期
9 沈晓卉;陆爱国;马君俊;宗雅萍;胡伟国;王明亮;李健文;毛志海;董峰;臧潞;郑民华;;结直肠良、恶性息肉微创治疗的临床研究[J];中国微创外科杂志;2008年12期
10 王伟杰;李海;张东;师新荣;杨银学;;二甲肼诱发SD大鼠结直肠息肉模型探讨[J];宁夏医科大学学报;2011年02期
11 刘四君,缪作华;结直肠息肉和息肉病[J];赣南医学院学报;2004年01期
12 刘颖;;腹腔镜-内镜联合切除术治疗结直肠息肉:10年经验及随访[J];中国普外基础与临床杂志;2009年11期
13 朱红;;双镜联合下结直肠息肉摘除术的围手术期护理[J];右江医学;2010年04期
14 张文明;沈俊;张召珍;贺益萍;;结直肠息肉内镜下特点及治疗[J];中国癌症杂志;2010年08期
15 陆振一,张国成,孙炜,盛红,郑拓;结直肠癌合并息肉92例临床分析[J];中国肿瘤;2004年09期
16 虞哲科;董米连;林祖朝;陈光;屈统红;朱乃标;;结肠镜联合腹腔镜诊治直肠癌合并结直肠息肉的探讨(附25例报告)[J];中国内镜杂志;2007年12期
17 胡凤英,王晓霞;结直肠息肉与癌[J];医学综述;1999年05期
18 施宏,田高超,陈素玉,黄贺;结直肠无蒂息肉内镜电切术和套扎术对比分析[J];中华消化内镜杂志;2005年05期
19 方正;赵建农;郭大静;朱代华;钟维佳;;密度阈值在CT虚拟结肠镜诊断结直肠息肉中的临床应用研究[J];临床放射学杂志;2009年07期
20 李若群;叶春福;;外来建设者结肠镜的结直肠息肉检出情况分析[J];中国社区医师(医学专业);2010年09期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈栋;陈文斌;刘凡隆;徐向明;叶峰;王金海;林建江;;内镜下治疗结直肠息肉情况的初步比较分析[A];2011年浙江省肛肠外科学术大会暨结直肠肛门疾病诊治新进展学习班论文汇编[C];2011年
2 柳汝明;吴斌;唐尧;;舒林酸治疗结直肠息肉有效性及安全性的系统评价[A];2010年临床药学学术年会暨第六届临床药师论坛论文集[C];2010年
3 刘桂林;王志宇;张珊珊;;RNAi技术及其在抗禽流感病毒感染中的应用[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
4 宋少康;董雅娟;牛召珊;朱孟芝;柏学进;;RNAi技术及其研究应用进展[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
5 左洪亮;李海怡;高璐;钟国华;;RNAi作用机制及其在害虫防治领域的应用前景[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
6 苏玉虹;张俊峰;;在哺乳动物细胞内诱导持续性的RNAi研究策略[A];中国畜牧兽医学会养猪学分会第五次全国会员代表大会暨养猪业创新发展论坛论文集[C];2010年
7 吕小青;杨慧;李秋艳;李宁;;利用RNAi生产抗猪繁殖与呼吸综合征病毒转基因猪的研究[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
8 孙朕;樊宝良;;有效避免干扰素反应的RNA聚合酶Ⅱ启动子驱动表达长dsRNA的RNAi载体的设计、构建及初步验证[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
9 王琼;彭振辉;王万卷;耿松梅;牛新武;王梅;刘平;;RNAi对人类皮肤成纤维细胞COL1A1及COL3A1表达的影响[A];2010全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2010年
10 王静;龚萍;马骁;龚炎长;彭秀丽;俸艳萍;李世军;;逆转录病毒介导的鸡Foxl2基因RNAi载体的构建[A];安全优质的家禽生产——第十五次全国家禽学术讨论会论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 向丽;结直肠息肉发生、发展及恶变的机制研究[D];重庆医科大学;2012年
2 杨德君;应用RNAi技术对大肠癌ECGF1基因生物功能的研究[D];吉林大学;2006年
3 马旭;RNAi抑制S100A4基因表达及其对骨肉瘤细胞侵袭、转移能力的影响[D];中国医科大学;2009年
4 李振华;LIMK1表达对人成骨肉瘤细胞生物学活性影响的体外研究[D];吉林大学;2008年
5 田保明;基于RNAi技术的BnFAE1基因沉默及对甘蓝型油菜芥酸合成的影响[D];华中农业大学;2010年
6 张明芳;RNAi沉默Notch1、Notch2对人胶质瘤U251细胞增殖的影响及其机制[D];福建医科大学;2010年
7 王凯;腺病毒载体介导靶向bFGF的RNAi对体外培养前列腺间质细胞bFGF表达及其增殖和凋亡的影响[D];中国医科大学;2009年
8 武向梅;RNAi沉默Bmi-1基因表达对MCF-7细胞生物学特性及阿霉素敏感性影响的研究[D];重庆医科大学;2010年
9 连海峰;RNAi抑制NRP2表达对胃癌细胞SGC7901生长及侵袭转移的实验研究[D];重庆医科大学;2010年
10 Muhammad Farooq Hussain Munis;[D];华中农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 章亚娣;内镜下结直肠息肉摘除术后出血并发症的研究[D];浙江大学;2010年
2 王斐;胆囊疾患与结直肠息肉相关性的探讨与中医体质分布规律研究[D];南京中医药大学;2012年
3 龚茂松;高清智能电子染色内镜对结直肠息肉样病变性质的预测研究[D];山东大学;2011年
4 刘岚;7298例结肠镜检查结果分析[D];山东大学;2010年
5 叶华景;CT虚拟结肠镜与电子肠镜在结直肠息肉诊断中的对比研究[D];汕头大学;2011年
6 和琼姬;转AtDCL2、AtDCL4和AtRDR6基因水稻研究[D];浙江师范大学;2010年
7 刘霞;腺病毒载体介导的RNAi抑制肺间质纤维化大鼠TGF-β1基因表达的研究[D];郑州大学;2010年
8 马冬芹;油葵PEPC基因保守序列的克隆及RNAi载体的构建[D];河北科技大学;2011年
9 赵留芳;RNAi介导survivin抑制鼻咽癌CNE-2裸鼠移植瘤的实验研究[D];昆明医学院;2011年
10 马玥;靶向hTERT的肝特异性RNAi载体的构建与鉴定[D];郑州大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 上海交通大学医学院附属仁济医院消化科 杨川华;4类便血要多留意[N];健康时报;2009年
2 北京世纪坛医院结直肠外科主任 罗成华;谁该定期做结肠镜[N];健康报;2009年
3 编译 李勇;RNAi药物研究或再升温[N];中国医药报;2011年
4 医学博士 科学松鼠会成员 致桦;美丽的干扰[N];中国经营报;2010年
5 上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科 郑民华 马君俊;腹腔镜结直肠手术远期疗效质疑的破解之路[N];健康报;2009年
6 记者 刘道安 通讯员 李哲;九成以上高危者未接受肠镜复查[N];健康报;2010年
7 吕兴晨;创新催生产业 科技改变民生[N];人民政协报;2011年
8 蒋立明;建立研发基地 开发高新技术[N];绍兴日报;2009年
9 由甲;找出大肠癌的危险因素[N];大众卫生报;2002年
10 朱翔 编译;大自然为何突然进化出了蝙蝠[N];北京科技报;2004年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978