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螺内酯通过miRNA-1调节大鼠心肌梗死后HCN通道蛋白表达的研究

余华东  
【摘要】:目的:多项研究发现心肌梗死(myocardial infarction, MI)后室性心律失常与超极化活化环核苷酸门控通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channel, HCN)基因在心室肌异常表达密切相关,最新证据已显示醛固酮阻断剂(aldosterone blockers, ABs)减少了心肌梗死病人室性心律失常的发生,但具体机制仍不明确。我们的研究探讨了螺内酯调节大鼠心肌梗死后缺血心室肌中HCN通道蛋白表达的机制,从而为醛固酮阻断剂在心肌梗死后抗室性心律失常的治疗提供理论基础。方法:通过开胸结扎冠状动脉左前降支的方法成功建立大鼠心肌梗死模型,心梗后24小时存活的18只大鼠随机分为三个组:MI组,Spironolactone组,Spironolactone+Antagomir-1组。6只Sham组的大鼠仅穿线通过左冠状动脉前降支而不结扎动脉。心肌梗死后一周取心梗大鼠的梗死周边区心肌组织,而假手术组取相对应的心肌组织,用荧光定量PCR方法检测HCN2、HCN4的mRNA水平和miRNA-1水平,用Western blot方法检测HCN2、HCN4的蛋白水平。结果:螺内酯明显增加了心肌梗死后miRNA-1的水平,而下调了HCN2、HCN4的蛋白以及mRNA水平。用antagomir-1沉默miRNA-1后明显增加了HCN2、HCN4的蛋白水平,然而对HCN2、HCN4的mRNA水平却无影响。结论:螺内酯能增加心肌梗死后缺血心肌中miRNA-1的表达,而上调的miRNA-1在转录后水平部分抑制了HCN蛋白的表达。这可能是螺内酯减少心肌梗死相关的室性心律失常发生的机制之一。


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