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《重庆医科大学》 2017年
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Hmox1调控BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨及成脂分化

刘晓骅  
【摘要】:目的:研究血红素加氧酶1(Heme oxygenase 1,Hmox1)对骨形态发生蛋白9(Bone Morphogenetic Protein 9,BMP9)诱导的间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)C3H10T1/2向成骨及成脂双向分化的影响及可能机制。方法:腺病毒Ad-BMP9感染C3H10T1/2,荧光定量PCR(q PCR)检测Hmox家族中Hmox1的基因表达变化,再用Western Blot检测HMOX1蛋白表达。用Hmox1的激动剂COPP和抑制剂ZNPP分别同BMP9共同处理C3H10T1/2,碱性磷酸酶(ALP)染色以及定量分析和茜素红S染色检测Hmox1对BMP9诱导的C3H10T1/2成骨分化的影响,油红O染色检测Hmox1对BMP9诱导的C3H10T1/2成脂分化的影响。构建过表达Hmox1的腺病毒(Ad-Hmox1),q PCR和Western Blot验证Ad-Hmox1的有效性。Ad-Hmox1与BMP9处理C3H10T1/2,ALP染色和定量分析检测成骨早期指标,q PCR检测相关转录因子Runx2、Dlx5、Id1、Id2和Id3基因表达情况,Western Blot检测RUNX2和DLX5蛋白表达情况;茜素红S染色检测钙盐沉积,q PCR检测骨钙素(Osteocalcin,Ocn)表达,Western Blot检测骨桥素(Osteopotin,OPN)以及OCN蛋白表达;油红O染色检测脂滴形成,q PCR检测成脂分化相关转录因子C/EBP?、C/EBP?、PPAR?2表达情况,Western Blot检测PPAR?,C/EBP?蛋白水平;Western Blot检测Hmox1对Smad1/5/8,MAPKs,PI3K/AKT以及Wnt/?-catenin信号的影响;细胞免疫荧光检测?-catenin的细胞核内聚集情况。结果:BMP9可促进C3H10T1/2细胞中内源性Hmox1表达;COPP可增强BMP9诱导下C3H10T1/2的ALP和钙盐沉积并且抑制脂滴形成,ZNPP可减少BMP9诱导下C3H10T1/2的ALP和钙盐沉积并且促进脂滴形成;构建的Ad-Hmox1可成功表达,其与BMP9共同作用下使成骨指标ALP、钙盐沉积以及成骨相关转录因子Dlx5、Runx2、Id2表达增加;反之,使脂滴形成及成脂相关转录因子C/EBP?表达减少;Hmox1对Smad1/5/8的磷酸化无影响,但可进一步增强BMP9诱导的p38磷酸化,减低ERK1/2的磷酸化水平,增加AKT在Ser473位点的磷酸化,增加细胞?-Catenin总量和?-Catenin在细胞核内的聚集。结论:Hmox1对BMP9诱导的C3H10T1/2成骨及成脂双向分化起着重要的调控作用,可促进BMP9诱导的成骨分化并抑制其诱导的成脂分化。在此过程中,Wnt/?-catenin信号扮演重要角色,并且MAPKs,PI3K/AKT信号也参与其中。
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R329.2

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 陈晓鹏;胡永成;方成;张丽娟;张荣信;黄文敬;;血红素氧化酶1在ADSCs增殖、凋亡和成骨分化的作用[J];天津医科大学学报;2015年05期
2 白海;王存邦;张玲;马晓慧;葸瑞;张茜;周进茂;;血红素加氧酶1在骨髓间充质干细胞中抗凋亡作用研究[J];中华医学杂志;2012年32期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 邓宁波;韩腾龙;曾元清;蒋知新;;人血红素加氧酶1过表达大鼠骨髓间充质干细胞对缺血缺氧环境损伤的耐受能力[J];中国组织工程研究;2017年29期
2 李侠;曹殿凤;朱华;陈晓文;;血清血红素加氧酶-1水平与矽肺患者纤维化发生发展的相关性[J];实用医药杂志;2015年06期
3 刘琳;白海;王存邦;魏玉萍;;黄芪多糖对人骨髓间充质干细胞增殖的影响[J];甘肃中医学院学报;2013年03期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 陈晓鹏;胡永成;方成;张荣信;王晗;何鑫;袁斌斌;;血红素氧化酶1在骨组织工程中的应用分析研究进展[J];中国修复重建外科杂志;2013年10期
2 刘颖斌;钱浩然;洪德飞;王建伟;李江涛;王许安;孔颖;马孝明;陈燕;陈德琴;翁伟宏;彭淑牖;;骨髓间充质干细胞对植物血球凝集素刺激的T淋巴细胞CD25表达的影响[J];中华医学杂志;2007年30期
3 霍思维;张毅;;间充质干细胞在造血调控中的作用[J];中国实验血液学杂志;2006年01期
4 武令启;白海;王存帮;杨小亮;赵强;杨义武;林梅;;间充质干细胞对异体B淋巴细胞增殖和凋亡的影响[J];中华医学杂志;2008年36期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈茜;肖盼;陈剑;蔡小芳;蔡继业;;原子力显微镜对人羊膜间充质干细胞成脂分化的观察[J];生物技术通报;2010年06期
2 黄月琴;王松波;;骨髓间充质干细胞成肌和成脂分化的调控[J];中国生物化学与分子生物学报;2010年07期
3 张国华;屈长青;杨公社;;全反式维甲酸抑制猪脂肪间充质干细胞的成脂分化[J];中国生物化学与分子生物学报;2007年06期
4 潘志宏;韩宁;;P糖蛋白抑制对体外培养骨髓间充质干细胞成脂分化的影响[J];复旦学报(医学版);2010年04期
5 范正伟;张晾;潘杰;;TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞成脂分化特征[J];济南大学学报(自然科学版);2013年03期
6 吴伟;季菊玲;王奎栋;李智耀;龚雨琴;季煜华;;去乙酰化酶抑制剂TSA对间充质干细胞C3H10T1/2增殖和成脂分化的影响[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2011年03期
7 王奎栋;李智耀;吴伟;龚雨琴;季煜华;;SAHA抑制间充质干细胞C3H10T1/2的增殖与成脂分化[J];中国生物化学与分子生物学报;2012年06期
8 王新鲁;姬云涛;屈长青;;Rho激酶抑制剂Y-27632对C3H10T1/2细胞增殖与成脂分化的作用[J];中国生物化学与分子生物学报;2013年07期
9 张金超;刘丹丹;孙静;张大威;申世刚;杨梦苏;;Dy~(3+)对小鼠骨髓基质细胞成骨和成脂分化及成骨细胞横向分化为脂肪细胞的影响[J];科学通报;2008年22期
10 龚雨琴;季煜华;李智耀;王奎栋;;去乙酰化酶抑制剂TSA通过激活ERK和p38抑制间充质干细胞成脂分化[J];中国生物化学与分子生物学报;2012年01期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 王玉;朱国英;王建平;李旭芳;翟江龙;;辐射对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及向成骨和成脂分化的影响[A];中华医学会第七次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议论文汇编[C];2013年
2 刘丽忠;任茂文;黄凯;;人脂肪来源基质细胞原代培养和成脂分化[A];第四届华东六省一市整形外科学术会议暨2007年浙江省整形、美容学术会议论文汇编[C];2007年
3 邹玲玲;鲁红云;刘红;李玲玲;舒晓春;孙辽;谢丹红;;GLP-1对人脂肪干细胞增殖、成脂分化及脂代谢的影响[A];中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2013年
4 王平;杨光;李远栋;吴纯标;;荣筋片影响SAMP6鼠成骨-成脂分化关键调控因子的实验研究[A];第二十届全国中西医结合骨伤科学术研讨会、第二届中国医师协会中西医结合医师分会骨伤科学术年会、第十九届浙江省中西医结合骨伤科专业委员会学术年会论文汇编[C];2013年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 记者 白毅;骨髓间充质干细胞成骨与成脂分化平衡调控机制研究获进展[N];中国医药报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 高红伟;NCoR在骨髓间充质干细胞成脂分化中分子调控机制的实验研究[D];山东大学;2016年
2 宋宝全;人间充质干细胞成脂分化调控机制的研究[D];北京协和医学院;2016年
3 李文凯;嘌呤受体P2X7和P2Y2在大鼠骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化中的作用[D];华中科技大学;2016年
4 董平;RNA结合蛋白NOVA1调控间充质干细胞成脂分化的作用研究[D];北京协和医学院;2017年
5 贾兵兵;环腺苷酸信号通路调控人脂肪间充质干细胞成脂分化的作用研究[D];浙江大学;2012年
6 江书忠;猪脂肪沉积关键基因的筛选及锌指蛋白KLF13的功能研究[D];华中农业大学;2014年
7 李大虎;CKIP-1负控间充质干细胞成脂分化研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年
8 李海芳;β-肾上腺素受体在小鼠MSCs成骨、成脂分化中的作用[D];清华大学;2010年
9 肖静;p204在3T3-L1细胞成脂分化过程中的表达及功能研究[D];清华大学;2010年
10 胡丽;IGF1通过PPARγ-Axin2-Wnt信号通路促进内源性脂肪干/前体细胞成脂分化[D];华中科技大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李晓敏;健脾活骨方不同部位对体外骨髓间充质干细胞分化调节作用的研究[D];中国中医科学院;2015年
2 葛志敏;甲状旁腺激素对大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的影响[D];山西医科大学;2015年
3 杜蕾蕾;极低频电磁场对MSCs的作用及其机制研究[D];南京大学;2013年
4 曹美霞;过表达RhoA基因对C3H10T1/2细胞成脂分化作用的研究[D];安徽大学;2016年
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9 叶晶晶;胞外钙离子对猪BMSCs增殖和成脂分化的影响及作用机制[D];华南农业大学;2016年
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