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《重庆医科大学》 2002年
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三氧化二砷(AS_2O_3)对人卵巢癌细胞株SKOV_3、3AO的作用及其机制的研究

宁燕  
【摘要】: 卵巢恶性肿瘤是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一,五年存活率较低,徘徊在25-30%。因卵巢癌极易发生腹腔转移,直接影响患者的寿命及生存质量,因此,探索有效的腹腔内化疗具有重要的临床意义。80年代初,我国学者发现As_2O_3治疗复发的急性早幼粒细胞白血病(APL)达到很高的缓解率,从此,掀起了国内外对砷剂抗肿瘤研究的热潮。尽管砷剂对血液系统肿瘤有了较深入的研究,但在实体瘤方面的研究尚不多见,As_2O_3对人卵巢癌的作用目前尚未见相关报道。本课题应用光镜和电镜观察,MTT法,流式细胞术,免疫组织化学,逆转录PCR等技术,从As_2O_3对人卵巢癌细胞生长的影响,及诱导凋亡的作用机制等方面进行探讨,为As_2O_3在实体瘤的临床应用提供实验依据。主要结果与结论如下: 1.不同浓度(2~20umol/L)As_2O_3均可抑制SKOV_3、3AO细胞增殖,且具有剂量和时间依赖性,As_2O_3对3AO细胞增殖抑制作用比SKOV3减弱;光、电镜均观察到As_2O_3作用SKOV_3、3AO细胞72h后出现凋亡形态学特征;流式细胞术分析显示:2uM As_2O_3作用SKOV_3 WP=8 细胞72h,出现亚G1峰、S期和G2/M期细胞明显增加,细胞周期阻滞于S+G2/M期;10uM As_2O_3作用3AO细胞72h,亚G1峰出现,且周期阻滞于S+G2/M期,而低浓度2、5uM As_2O_3作用3AO,只有G2/M期细胞增加,并未出现亚G1峰,提示As_2O_3对人卵巢癌细胞SKOV_3、3AO均有明显周期特异性生长抑制作用;低浓度As_2O_3主要干扰3AO细胞G2/M期的通过而抑制细胞增殖、并未启动凋亡,高浓度As_2O_3才启动了对3AO细胞的凋亡,说明As_2O_3对卵巢癌细胞株凋亡的诱导可能在作用剂量、细胞株类型及凋亡调控机制方面存在特异性。 2.本实验对人卵巢癌细胞SKOV_3、3AO线粒体跨膜电位(Δψm)检测显示,不同浓度As_2O_3均可诱导SKOV_3、3AO细胞Δψm的降低,且随浓度升高,下降愈明显,荧光显微镜下检测线粒体荧光强度变化发现As_2O_3作用SKOV_3、3AO 72h,线粒体荧光强度均明显减弱;电镜也观察到As_2O_3作用SKOV_3、3AO 72h后,线粒体明显肿胀,内嵴消失,基质透明呈气球样变,上述结果提示线粒体Δψm的下降是As_2O_3诱导细胞凋亡的重要环节。免疫流式和免疫组化检测显示As_2O_3能抑制SKOV_3、3AO细胞的Bcl-2蛋白表达。结合Bcl-2与活性氧在细胞凋亡中的密切关系,提示As_2O_3在诱导细胞凋亡中对Bcl-2蛋白表达的抑制,可能解除了Bcl-2抗氧化能力,从而使活性氧含量升高,直接损伤线粒体Δψm,从而导致凋亡发生。 3.探讨As_2O_3诱导SKOV_3、3AO凋亡中cPKCα与Ras信号途径 WP=9 的关系中发现,As_2O_3降低了SKOV_3 72h时H-Ras mRNA表达水平,而略降低了3AO 12h、24h、72h时H-Ras mRNA表达水平;As_2O_3明显升高cPKCα表达,cPKCα被持续活化;SKOV_3、3AO细胞C-Raf mRNA表达水平在As_2O_3作用24h时明显升高,C-jun mRNA表达则在As_2O_3作用12h、24h、72h时持续升高,上述结果提示H-ras可能未参与As_2O_3诱导的卵巢癌细胞凋亡信号传导途径,它并未直接激活C-Raf,而由活化的cPKCα参与C-Raf的激活,将细胞凋亡信号传递给C-jun,使其持续活化,最终将凋亡信号传递入核,诱发了细胞凋亡。 4.研究As_2O_3对SKOV_3、3AO细胞周期及凋亡调控相关基因的影响,结果表明:As_2O_3降低了SKOV_3 CyclinA、CyclinB1、CyclinD1、CyclinE 蛋白表达水平,而只降低了3AO CyclinA、CyclinB1蛋白水平,CyclinD1、CyclinE未见明显变化,提示As_2O_3不仅参与了SKOV_3细胞G2/M期周期调控因子的调节,也对G1/S期调控因子发挥作用,对3AO细胞只参与G2/M期调控因子的调节,说明As_2O_3对不同类型肿瘤细胞的细胞周期调控具有差异性。As_2O_3对SKOV_3、3AO细胞p21 mRNA、p16蛋白表达增强,提示p21、p16参与了As_2O_3对SKOV_3、3AO细胞周期的阻滞,还可能参与了细胞凋亡的发生。As_2O_3对SKOV_3、3AO凋亡相关基因bcl-2、C-myc的研究表明:As_2O_3处理SKOV_3、3AO细胞后Bcl-2蛋白表达呈明显减低趋势,C-myc mRNA转录表达水平也逐渐降低,提示Bcl-2蛋白表达,C-myc mRNA转录水平的下降是As_2O_3诱 WP=10 导SKOV_3、3AO细胞凋亡的分子机制之一。 5.研究As_2O_3诱导卵巢癌细胞凋亡对其端粒酶活性及其作用机制的影响,结果显示:不同浓度As_2O_3作用SKOV_3、3AO细胞,其端粒酶活性随作用浓度的升高呈不断下降趋势,呈时间和浓度依赖性;RT-PCR检测端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA表达发现,As_2O_3作用SKOV_3、3AO 12h 、24h、72h时,均逐渐降低了hTERTmRNA表达水平,与端粒酶活性的下调变化相一致,提示端粒酶活性和hTERT mRNA表达在As_2O_3诱导SKOV_3、3AO细胞凋亡过程中共同发挥作用,两者密切相关,是诱导细胞凋亡的分子机制之一。
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R737.31

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 邓友平,林晨,张雪艳,陈洁平,肖培根,吴晣;三氧化二砷(As_2O_3)诱导人肺腺癌GLC-82细胞凋亡及分子机制的研究[J];癌症;1999年05期
2 李江涛,区庆嘉,魏菁;三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡的初步研究[J];癌症;2000年12期
3 倪建华,陈国强;砷的生物学作用及其在临床上的应用前景[J];国外医学.输血及血液学分册;1997年04期
4 高媛媛,徐洪雨,武俏丽,高光强,杨幼林;亚砷酸体外对人肝癌细胞株BEL-7402影响的初步研究[J];哈尔滨医科大学学报;2001年01期
5 王跃平,竺涵光,张志愿,邱蔚六;三氧化二砷抑制口腔鳞癌细胞增殖的研究[J];口腔颌面外科杂志;1999年03期
6 竺涵光,王跃平,张志愿,邱蔚六,陈万涛;三氧化二砷经导管动脉介入治疗口腔鳞癌(附三例报告)[J];口腔医学纵横;2000年01期
7 罗俊卿,闻勤生,焦成松;三氧化二砷诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用[J];临床内科杂志;2001年01期
8 童强松,曾甫清,鲁功成,朱朝晖;三氧化二砷抑制人膀胱癌细胞BIU-87体外生长的实验研究[J];临床泌尿外科杂志;2000年02期
9 秦叔逵,陈洪,陈惠英,刘文虎,马军,潘其声;三氧化二砷诱导人肝癌细胞株凋亡的初步研究[J];临床肿瘤学杂志;1998年02期
10 秦叔逵,钱军,陈映霞,吴达龙,刘秀峰,马军;三氧化二砷治疗原发性肝癌获缓解1例[J];临床肿瘤学杂志;1999年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴丽明,邱光清,陈丽娟,张锦周,庄志雄;莲须的遗传毒性研究[J];癌变.畸变.突变;2003年02期
2 汪承润,闵莉,吴薇,薄军;钬元素对小鼠肝脏细胞DNA损伤的影响[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
3 杨林;自拟金牛桂附饮配合体外碎石治疗泌尿系结石68例[J];安徽中医临床杂志;2000年03期
4 邸海侠,刘富华;中医中药治疗白血病的进展回顾[J];安徽中医临床杂志;2000年03期
5 华少红,宋若会;咽康宁蒸汽吸入对扁桃体术后恢复的影响[J];中医药临床杂志;2004年03期
6 宋若会,高士俊,许春华,章冰;咽康宁蒸汽吸入加喉症泻火茶泡服治疗急性咽炎疗效观察[J];中医药临床杂志;2005年01期
7 顾伟民;顾瑞麟;徐惠平;费珍美;翁美玲;夏克容;;自制海金降脂胶囊治疗脂肪肝73例[J];中医药临床杂志;2005年06期
8 王史潮;吴剑静;吴春雷;吴云刚;胡永文;徐仲翔;;中西医结合治疗桡骨茎突骨折并发腕尺管综合征36例[J];中医药临床杂志;2007年01期
9 杨富志;;自拟益气化湿逐瘀方治疗2型糖尿病胰岛素抵抗疗效观察[J];中医药临床杂志;2010年06期
10 王瑞娜;唐茜;何凤发;;药用白术的药理作用及其综合开发利用[J];安徽农业科学;2010年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 林红;余娜莎;;中晚期原发性肝癌的中西医结合治疗[A];江西省首届中西医结合肿瘤学术研讨会论文集[C];2010年
2 李新民;党琦;;天佛参口服液(TFS)诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡及机理探讨[A];2011年中华名中医论坛暨发挥中西医优势防治肿瘤高峰论坛论文集[C];2011年
3 王亚群;孙贻安;宋爱莉;;阳和消块汤治疗乳腺增生病的临床研究[A];第十二次全国中医、中西医结合乳房病学术会议论文集[C];2011年
4 李福兵;;浅议蜈蚣的用法用量[A];重庆市中医药学会学术年会论文集[C];2010年
5 黄光英;刘艳娟;;补肾益气和血方改善小鼠子宫内膜容受性的研究[A];第六届全国优生科学大会论文汇编[C];2006年
6 温焕连;王晨龙;曾文铤;朱科伦;;三氧化二砷与顺铂合用对肝癌细胞HepG2的作用研究[A];广东省肝脏病学会2007年年会论文集[C];2007年
7 马少云;曹建斌;陈利新;方汉民;莫卫海;朱伍;黄辉春;林苗正;卜晗;;综合疗法治疗膝骨性关节炎124例临床总结[A];全国第六次骨病学术会议暨百名杰出骨科专家评选活动论文集[C];2005年
8 杨大平;李军;黄晓欣;张爱华;何云;谢政军;;细胞凋亡在燃煤型砷中毒肝损伤中的作用[A];贵州省环境诱变剂学会第二届学术交流会论文集[C];2005年
9 刘艳娟;黄光英;;健胎液对胚泡着床障碍小鼠着床期子宫内膜容受性的影响[A];首届赣鄂湘中西医结合(生殖内分泌)学术研讨会论文集[C];2006年
10 于国英;朱莉;韩志武;;鲐鱼消化道中蛋白酶提取条件的研究[A];2006年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2006年
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1 孙冰;平性药药性理论及其应用规律研究[D];山东中医药大学;2010年
2 韩美仙;基于药物重量实测的经方本原剂量研究[D];北京中医药大学;2011年
3 宋佳;经方50味药物在明代13位医家中的用量规律研究[D];北京中医药大学;2011年
4 杨培民;白花蛇舌草抗肿瘤有效部位黄酮和多糖的纯化及其脂质体复合物的研究[D];北京中医药大学;2011年
5 刘英霞;三氧化二砷(As_2O_3)抑制人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移作用机理研究[D];兰州大学;2011年
6 代春美;基于大黄蒽醌、鞣质类物质作用于HK-2细胞的毒效相关性研究[D];成都中医药大学;2011年
7 叶强;附子应用环节活性物质变化与热性程度虚拟评价[D];成都中医药大学;2011年
8 许东芳;含杂环配体的稀土有机配合物的合成、表征及相关生物活性的研究[D];上海师范大学;2011年
9 龙白;槲皮素、地钱黄酮、DADS对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及相关作用机理的研究[D];中南大学;2010年
10 张斌;蜈蚣提取液的分离纯化与治疗肝细胞性肝癌机制的研究[D];中南大学;2010年
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1 戴伟;铁线莲皂苷对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及NF-κB表达的影响[D];南京医科大学;2010年
2 李琳;中药水蛭对糖尿病大鼠早期肾脏病变干预作用的实验研究[D];郑州大学;2010年
3 杨秦蘅;三氧化二砷对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231作用的初步研究[D];郑州大学;2010年
4 易帆;现代名医名家治疗崩漏的用药规律研究[D];湖南中医药大学;2010年
5 陈远校;泻肺逐痰丸治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(痰热壅肺证)的临床研究[D];湖南中医药大学;2010年
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7 高明;女贞子有效成分齐墩果酸对S180荷瘤小鼠P53蛋白表达及TNF-α的诱生作用[D];黑龙江中医药大学;2010年
8 瞿伟;益肺康心胶囊治疗慢性肺源性心脏病的疗效及其与PAF相关性的研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
9 李晓明;消瘀膏治疗血栓性外痔的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
10 孙晶晶;青蒿鳖甲汤干预BMSCs对AML-CR患者BMNC来源DCs诱导的影响[D];贵阳中医学院;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 邓友平,林晨,张雪艳,陈洁平,肖培根,吴晣;三氧化二砷(As_2O_3)诱导人肺腺癌GLC-82细胞凋亡及分子机制的研究[J];癌症;1999年05期
2 伍钢,周云峰,应大明,陈同辛,王耀平,林梓;三氧化二砷对神经母细胞瘤细胞增殖的影响[J];癌症;1999年03期
3 倪建华,陈国强;砷的生物学作用及其在临床上的应用前景[J];国外医学.输血及血液学分册;1997年04期
4 粟俭;药物诱导的肿瘤细胞凋亡研究进展[J];国外医学(肿瘤学分册);1995年01期
5 赵晓航,王秀琴,彭仁玲,阎水忠,吴旻;C-myc反义RNA特异性诱发人食管癌细胞程序性死亡[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1993年11期
6 邓友平,林晨,梁萧,陈洁平,付明,肖培根,吴旻;三氧化二砷诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡及Bcl-2保护作用的机制研究[J];中国科学C辑:生命科学;1999年04期
7 王跃平,竺涵光,张志愿;三氧化二砷在肿瘤治疗中的作用及展望[J];口腔颌面外科杂志;1998年04期
8 秦叔逵,陈洪,陈惠英,刘文虎,马军,潘其声;三氧化二砷诱导人肝癌细胞株凋亡的初步研究[J];临床肿瘤学杂志;1998年02期
9 谭立军,陈新宇,张岚,湯雪明,沈忠英,蔡维佳;DMSO和As_2O_3对人食管癌细胞增殖的抑制作用[J];上海第二医科大学学报;1999年01期
10 石熠慧,谭立军,李慧,史桂英,石学耕,汤雪明;AS_2O_3对消化道肿瘤细胞凋亡作用的研究[J];上海第二医科大学学报;1999年03期
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1 龚萍;李红霞;张素梅;;CCM、TPA诱导人卵巢癌细胞株skov_3 mtDNA突变的研究[J];山东医药;2011年16期
2 ;卵巢肿瘤[J];国外科技资料目录(医药卫生);1999年06期
3 马淑状;田秀珠;;1,25二羟维生素D3与顺铂对卵巢癌细胞株HO-8910生长及凋亡影响[J];中国药物与临床;2008年11期
4 龙娟;吴诗琦;刘志权;陈刚;卢运萍;李静;周洪源;王世宣;马丁;;层粘素及其受体在人卵巢癌细胞中的表达和意义[J];中华妇幼临床医学杂志;2009年06期
5 黄谟婉;马英;;细胞凋亡抑制蛋白IAP家族与卵巢癌关系研究进展[J];重庆医科大学学报;2007年06期
6 陈葳;李旭;任娟;刘勤;杨玉琮;程小丽;付伟;张明慧;;顺铂诱导人卵巢癌细胞耐药及凋亡的实验研究[J];医学研究杂志;2003年05期
7 单靖珊;赵可新;胡建平;;人卵巢癌细胞株3AO诱导凋亡的研究进展与评价[J];中国医院用药评价与分析;2008年09期
8 龚萍;李红霞;张素梅;;佛波酯诱导人卵巢癌细胞株SKOV3线粒体DNA突变的研究[J];实用妇产科杂志;2011年06期
9 张少华;高尚风;郝志明;王英;;As_2O_3诱导人卵巢癌细胞株HO8910凋亡和端粒酶活性的关系[J];西安交通大学学报(医学版);2008年04期
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1 周彩云;罗红;;超声造影在卵巢肿瘤诊治方面的应用发展[A];中国超声医学工程学会第三届全国妇产及计划生育超声医学学术会议论文汇编[C];2010年
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1 高建军;肝癌治疗潜在靶点c-Met及肿瘤靶向治疗效果及机制研究[D];山东大学;2012年
2 郭玉琪;Siltuximab单克隆抗体对卵巢癌中IL-6介导的信号传导通路的影响[D];郑州大学;2011年
3 何春容;ZNF217与卵巢癌顺铂化疗敏感性的相关性及其机制的研究[D];南方医科大学;2010年
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7 高敏;NAC1/FOXQ1分子通路在上皮性卵巢癌发生发展中的作用及机制研究[D];山东大学;2013年
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1 怀其娟;理冲生髓饮对人卵巢癌细胞株SKOV3信号转导基因表达的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
2 张旭;双氢青蒿素对人卵巢癌细胞株HO-8910凋亡作用的实验研究[D];山西医科大学;2013年
3 王熙月;理冲生髓饮药物血清对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞凋亡基因表达的影响[D];黑龙江中医药大学;2011年
4 霍森烨;姜黄素对人卵巢癌细胞株SKOV-3增殖和凋亡的影响[D];山西医科大学;2011年
5 银晶晶;小蘖碱对人卵巢癌细胞株SKOV-3增殖和凋亡的影响[D];山西医科大学;2011年
6 宋霞;大蒜素对人卵巢癌细胞株A2780的作用及机制[D];泰山医学院;2011年
7 谷芳;双氢青蒿素对人卵巢癌细胞株SKOV-3增殖和凋亡的影响[D];山西医科大学;2011年
8 李莉琛;CO_2人工气腹环境对人卵巢癌细胞株SKOV_3增殖的影响[D];南昌大学;2012年
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