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《重庆医科大学》 2004年
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热应激对轴索损伤保护机制的实验研究

李峰  
【摘要】:目的:探讨大鼠视神经牵拉伤后HSP70、GABA表达的变化及热应激对其表达的影响。 方法:选择健康雄性Wistar大鼠57只,体重(250±20)g。动物随机分为4组:正常对照组(A组)3只、单纯视神经牵拉伤组(B组)18只、单纯热应激处理组(C组)18只、热应激预处理视神经牵拉伤组(D组)18只。其中对B组动物右眼视神经施予牵拉,热应激处理应用于C组动物、D组动物热应激预处理24小时后再施予牵拉,来自B、C、D组每个时间点的3只动物分别在4h、8h、16h、1d、3d、5d处死。利用光镜对节细胞和少突胶质细胞以及轴索进行形态学观察,采用SABC法进行免疫组化染色,检测HSP70、GABA表达的光密度值(OD值),对结果行t检验分析组间差异。 结果: 1. 组织病理学观察:视神经牵拉伤后RGCs和OLs的数量、形态以及轴索的结构发生明显的病理变化,热应激预处理再致伤后上述病理改变有了显著改善。 2. HSP70在RGCs和OLs的表达:HSP70阳性表达位于RGCs和OLs的细胞核、细胞浆内。① RGCs. A组HSP70呈弱阳性表达(OD值0.18±0.04,下同)。B组HSP70表达在各个时点明显增加,1d达到 WP=7 高峰(0.28±0.03)。C组HSP70阳性表达与A组比较也有明显增强,除5天外,差异均有显著性。D组HSP70阳性表达增强更加明显,其特点是在伤后早期更为显著,高峰时点比B组、C组提前(16h,0.31±0.05),维持时间比C组长。② OLs. A组HSP70呈弱阳性表达(0.15±0.03)。B组伤后8h(0.19±0.06)、16h(0.22±0.03)、1d (0.20±0.07)HSP70阳性表达明显高于A组,16h达到高峰(0.22±0.03),随后降至A组水平。C组HSP70阳性表达规律与RGCs相似。D组HSP70表达增强最为明显,高峰时点比C组提前(16h,0.25±0.04),维持时间比C组长。 3. GABA在RGCs和OLs的表达:GABA主要位于RGCs和OLs的细胞浆内。① RGCs. A组GABA呈阳性表达(0.27±0.02)。 B组伤后4h GABA阳性反应迅速减弱(0.22±0.06),8h降至最低(0.19±0.04),弱阳性反应持续至16h(0.24±0.04),随后升至A组水平。C组在热应激后GABA阳性表达迅速增强,维持至3d(0.30±0.04)。D组GABA阳性反应呈双相变化,8h(0.25±0.03)、16h(0.20±0.05)阳性反应强度明显低于A组、C组,1d(0.33±0.03)、3d(0.32±0.03)阳性反应强度明显强于A组、C组,5d(0.29±0.03)仍然强于A组。② OLs. A组GABA染色呈阴性(0.10±0.04)。B组伤后早期GABA阳性表达增强,8h最明显(0.15±0.06),1d至5d未见阳性染色。C组各时点均未出现GABA阳性染色。D组伤后早期GABA阳性表达明 WP=8 显增强,16h达高峰(0.16±0.03),随后阳性反应明显减弱,1d至5d未见阳性染色。 结论: 神经元及胶质细胞共同参与了轴索损伤后的病理过程。 轴索损伤后通过HSP70和GABA表达的变化所产生的神经保护作用是有限的。 热应激能使HSP70、GABA表达增强、延长和/或提前,提高其神经保护作用。
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R651.15

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