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《重庆医科大学》 2007年
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JAK2/STAT3信号通路介导TTX心肌保护作用的实验研究

刘胜中  
【摘要】: 目的:探讨JAK2/STAT3信号通路在河豚毒素(tetrodotoxin, TTX)心脏停搏液保护缺血再灌注心肌中的作用及其机制。 方法:取Wistar大鼠24只,随机分成对照组、TTX组和TTX+AG490组,每组8只。对照组:开胸取左心室肌作为缺血前对照。TTX组:建立离体心脏Langendorff-Neely灌注模型,预灌注K-H缓冲液30min后,灌注4℃TTX心脏停搏液,停搏心脏并低温维持60min,复灌K-H缓冲液60min后,取左心室肌备用。TTX+AG490组:操作同TTX组,但预灌和复灌时均在K-H缓冲液中加入JAK2抑制剂AG490(5μmol/L)。采用免疫组化法测定心肌组织中p-STAT3,Bcl-2和HSP70表达量(protein expression index,PEI);Western blot测定心肌组织中p-STAT3含量;比色法测定心肌匀浆液中SOD活性和MDA含量;TUNEL检测心肌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)。 结果:免疫组化法测定的p-STAT3 PEI在对照组、TTX组和TTX+AG490组分别是2.65±0.15%、18.19±1.68%和6.91±1.03%,提示经TTX处理后的心肌组织中p-STAT3蛋白表达较缺血前明显增加(P0.05),而加用AG490处理后的心肌组织中p-STAT3蛋白表达较TTX组明显下降(P0.05)。Western blot测定心肌组织中p-STAT3含量,结果与免疫组化一致。 Bcl-2 PEI在对照组、TTX组和TTX+AG490组分别是2.96±0.69%、23.40±1.19%和11.47±1.15%,提示经TTX处理后的心肌组织中Bcl-2蛋白表达较缺血前明显增加(P0.05),而加用AG490处理后的心肌组织中Bcl-2蛋白表达较TTX组明显下降(P0.05)。 HSP70 PEI分别是对照组2.52±0.58%、TTX组22.63±1.15%和TTX+AG490组14.40±1.20%,提示经TTX处理后的心肌组织中HSP70蛋白表达较缺血前明显增加(P0.05),而加用AG490处理后的心肌组织中HSP70蛋白表达较TTX组明显下降(P0.05)。 Bcl-2蛋白表达与p-STAT3蛋白表达呈正相关(r=0.743,P0.05), HSP70蛋白表达与p-STAT3蛋白表达亦呈正相关(r=0.826,P0.05)。 心肌匀浆液中SOD活性(U/mgprot)在对照组、TTX组和TTX+AG490组分别是6.55±0.81、20.56±1.16和13.55±1.17,MDA含量(nmol/mgprot)分别是3.13±0.31、8.55±0.53和15.52±1.04;提示经TTX处理后的心肌匀浆液中SOD活性较缺血前显著升高(P0.05),MDA含量亦显著增加(P0.05);而加用AG490处理后的心肌匀浆液中SOD活性较TTX组显著降低(P0.05),MDA含量却明显增加(P0.05)。 对照组、TTX组和TTX+AG490组的心肌细胞AI分别是1.31±0.11%、6.92±1.11%和16.21±1.40%,提示经TTX处理后的心肌细胞AI较缺血前明显增加(P0.05),而加用AG490处理后的心肌细胞AI较TTX组明显增加(P0.05)。 结论:JAK2/STAT3信号通路介导了TTX心脏停搏液对缺血再灌注心肌的保护作用。其可能的机制是:TTX通过激活JAK2/STAT3信号通路,活化STAT3,上调抗凋亡蛋白Bcl-2和HSP70表达,减少心肌细胞凋亡;同时增强SOD活性,减少MDA产生,从而减轻心肌缺血/再灌注损伤。
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R654.1

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【参考文献】
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