收藏本站
《重庆医科大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

HBV cccDNA荧光定量PCR检测体系建立及初步应用研究

杨培  
【摘要】: 目的:建立HBV cccDNA荧光定量PCR检测方法,探讨总HBV DNA、HBV cccDNA在重型乙型肝炎中的作用及其相互关系,并进一步探索人工肝支持系统对重型乙型肝炎患者血清中总HBV DNA、HBV cccDNA的影响。 方法:用不同浓度质粒标准品建立荧光定量PCR标准曲线,并检测该方法的灵敏性及重复性;HBV DNA阳性的慢性乙型肝炎(轻度)患者血清标本提取物经Plasmid_SafeTMATP_dependent DNase酶切纯化后进行荧光定量PCR反应,验证该方法的特异性。以50例重型乙型肝炎患者人工肝血浆置换治疗前后血清作为检测标本,用已建立的荧光定量PCR方法对总HBV DNA、HBV cccDNA含量进行定量检测。用SAS8.0统计软件对结果进行统计学分析。 结果:成功建立了HBV cccDNA荧光定量PCR检测方法,线性范围为1×102~2.77×109拷贝/ml。经特异性酶切消化后慢性乙型肝炎(轻度)患者血清中未检测到HBV cccDNA,重型乙型肝炎患者血清中存在HBV cccDNA。在人工肝血浆置换前后总HBV DNA含量(log10值)分别为6.12,5.93(n=50,P0.05);HBV cccDNA含量(log10值)分别为5.14,5.04(n=50,P0.05)。总HBV DNA与HBV cccDNA之间有较好的相关性(r=0.78,P0.01)。总HBV DNA水平与PT(r=0.37,P0.01)、ALT(r=0.29,P0.05)、AST(r=0.39,P0.01)水平呈正相关;HBV cccDNA水平与PT(r=0.34,P0.05)、ALT(r=0.34,P0.05)、AST(r=0.40,P0.01)水平呈正相关。 结论:本研究结果显示,所建立的HBV cccDNA荧光定量PCR方法具有良好的线性范围,灵敏度、特异性及重复性均达到预期目标。重型乙型肝炎患者血清中存在HBV cccDNA。总HBV DNA与HBV cccDNA呈正相关;总HBV DNA、HBV cccDNA与PT、ALT、AST呈正相关,说明总HBV DNA、HBV cccDNA均能在一定程度上反映肝脏损伤程度且有较好的一致性。在人工肝血浆置换后重型乙型肝炎患者血清中总HBV DNA与HBV cccDNA含量明显降低,这为进一步探索人工肝支持系统通过干预乙型肝炎病毒复制模板而影响重型乙型肝炎结局的可能性打下基础。
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R450

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 樊代明;;消化病 几多“是”中几多“非”[J];医学争鸣;2010年02期
2 宋骏;夏长胜;;皖南地区乙型肝炎病毒基因型和亚型的分布特征[J];皖南医学院学报;2011年04期
3 余瑞芳;刘亚;刘怀印;;2004—2010年商丘市丙肝流行病学分析[J];河南预防医学杂志;2011年04期
4 ;看点[J];家庭之友(爱侣);2011年09期
5 邵爱东;张彦;;147例丙型病毒性肝炎临床治疗回顾性分析[J];中国医药导报;2011年23期
6 陈珺;;陈意教授治疗急慢性肝炎用药特色[J];中国中医急症;2011年07期
7 黄愈玲;毕锡明;梁雪莹;;广州市2005年-2009年从业人员乙肝病毒感染状况分析[J];中国卫生检验杂志;2011年07期
8 潘颖;管世鹤;;X蛋白的研究进展[J];国际检验医学杂志;2011年13期
9 张朝彬;王志宏;;长春市双阳区中小学生乙型肝炎病毒感染现况调查[J];辽宁医学院学报;2011年03期
10 ;《现代肝炎病毒分子生物学》第二版即将出版[J];中国肝脏病杂志(电子版);2008年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈欣如;侯岩岩;燕顺生;;肝炎病毒动物模型的研究进展[A];中国实验动物学会第六届学术年会论文集[C];2004年
2 吴志强;熊焰;;乙型肝炎病毒荧光定量检测与其血清标志物检测结果的相关性研究[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
3 冯育会;;浅谈肝炎病毒的致病特点[A];贵州省中西医结合学会中医诊断现代研究论文汇编[C];2007年
4 谭太昌;;HBsAg和HbcAb阳性患者血清前S1抗原检测的临床意义[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
5 苏海霞;闫永平;徐德忠;李端;卢娟;;乙型肝炎病毒前C/C和前S/S基因异质性及其与宫内感染关系的初步研究[A];全面建设小康社会:中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集(下)[C];2003年
6 郭振兴;季林祥;杨仁池;;干扰素治疗肝炎病毒相关性血小板减少[A];第十一届全国血栓与止血学术会议暨血栓栓塞性疾病(血栓与止血)基础与临床研究进展学习班论文摘要汇编及学习班讲义[C];2007年
7 赵振爱;;病毒性肝病的中医用药思路[A];中医药优秀论文选(下)[C];2009年
8 黄育华;盛国光;张建军;;海珠益肝胶囊的抗乙型肝炎病毒作用疗效观察[A];2002全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2002年
9 孟建中;;透析病人肝炎病毒重叠感染的问题[A];中华医学会肾脏学分会2004年年会暨第二届全国中青年肾脏病学术会议专题讲座汇编[C];2004年
10 王鸣;余育胜;周建平;雷文兰;张莉;;咸宁烟厂工人乙型肝炎抗原抗体系统检测结果分析[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 徐超;专家提出肝炎病毒检测新见解[N];科技日报;2010年
2 本报记者 李健 健文;专家指出文身和穿耳洞是潜在的肝炎病毒传播途径[N];中国消费者报;2010年
3 张孟军;美将两种肝炎病毒列为致癌物[N];科技日报;2005年
4 白庭;肝炎病毒的空气中能存活多久[N];农村医药报(汉);2007年
5 王有国;肝炎病毒争霸[N];家庭医生报;2006年
6 王有国;肝炎病毒争霸[N];家庭医生报;2006年
7 周华英;新肝炎病毒可经宫内母婴传播[N];大众卫生报;2002年
8 佘峥李静 顾影;国际顶尖科学家在厦向肝炎病毒宣战[N];厦门日报;2008年
9 蔡晧东;酒精是肝炎病毒的“帮凶”[N];家庭医生报;2005年
10 本报驻东京记者 张超;记录频刷:日本送别“新”的一年[N];法制日报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王宏卫;庚型肝炎病毒生物学特性及其与丙型肝炎病毒的比较研究[D];第二军医大学;2003年
2 阎瑾琦;丙型肝炎病毒重组复合表位抗原的免疫原性研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
3 赵伟;病毒性肝炎基因芯片诊断技术研究和临床应用[D];南京农业大学;2004年
4 陆荫英;乙型肝炎病毒相互作用蛋白编码基因的克隆化及新基因功能的初步研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2003年
5 刘晶;丙型肝炎病毒被膜蛋白的表达、纯化与应用研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2002年
6 梁雪松;IRES特异性抑制性RNA阻断丙型肝炎病毒基因表达的研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
7 毛红霞;丙型肝炎病毒不同基因亚型NS3蛋白酶比较及相关细胞蛋白的筛选[D];复旦大学;2003年
8 王怡;RDA技术分析病毒性肝硬化、原发性肝细胞癌相关基因的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
9 王刚;HBV感染HepG2细胞早期过程研究[D];山东大学;2005年
10 胡卫江;庚型肝炎病毒转基因小鼠模型的建立及其特性研究[D];第二军医大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 关岚;男性吸毒人群中丙型肝炎病毒感染状况及其影响因素的研究[D];中南大学;2003年
2 苏小平;乙型肝炎病毒preS2-S基因(adr亚型)转基因小鼠的建立[D];第二军医大学;2003年
3 葛军辉;乙型肝炎病毒变异型s基因疫苗逆转转基因小鼠免疫耐受的研究[D];第二军医大学;2003年
4 贺启贵;门脉高压性胃病病理初步分析[D];山西医科大学;2003年
5 韩香子;延边地区庚型肝炎病毒感染状况的研究[D];延边大学;2001年
6 张胜权;N-乙酰半胱氨酸(NAC)抗乙肝病毒(HBV)作用[D];安徽医科大学;2001年
7 赵书民;乙型肝炎病毒pres_2-s基因(ayw亚型)转基因小鼠的建立[D];第二军医大学;2002年
8 孙利;丙型肝炎病毒DNA疫苗的实验研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
9 彭翼飞;限制性显示PCR技术在丙型肝炎病毒基因芯片制备中的应用[D];第一军医大学;2001年
10 张伟;乙型肝炎病毒前S区不同片段的克隆、鉴定及与PreS1基因相互作用蛋白在酵母双杂交系统中的筛选[D];第四军医大学;2002年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026