收藏本站
《重庆医科大学》 2008年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

NK4对淋巴瘤抑制作用的实验研究

岑东  
【摘要】: 背景和目的 据UICC World Cancer Congress 2006报道,恶性肿瘤仍然是21世纪严重危害人类生命健康的主要疾病。全球年新发肿瘤病例约1100万,死亡700万,现患病例2500万。以此趋势,至2020年,每年新发病例将达1600万,死亡1000万。目前,我国年发病人数约200万,死亡150万;在城镇居民中,恶性肿瘤仍是死亡的主要原因。 研究表明肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)异常表达与恶性肿瘤的发生、发展、预后密切相关。HGF作为一种多功能细胞因子,主要经旁分泌(基质细胞)或自分泌(肿瘤细胞)途径产生,通过HGF/Met信号途径,激活受体酪氨酸激酶,使下游的信号分子磷酸化,产生系列的生物学效应,主要表现为丝裂原、能动原、形态发生原效应和促血管新生,促进肿瘤的生长、迁徙和侵袭。对霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤等研究发现HGF与淋巴瘤的发生、发展可能存在相互促进关系:HGF的高分泌促进淋巴瘤的发生、发展,而淋巴瘤细胞的增殖又促进HGF自分泌。还证实HGF水平与淋巴瘤的临床疗效、预后等密切相关,是一个值得进一步研究的指标。因此,阻断HGF/Met系统的信号转导可能成为抗肿瘤治疗的新策略之一。 就现研究而言,NK4是理想的HGF/Met信号途径阻断剂,其机制在于能全面拮抗HGF活性。NK4是HGF的一个含447个氨基酸残基的片段,保留了HGF与其受体c-MET的结合部位,能和HGF竞争性结合受体c-MET,但结合后不能使后者发生磷酸化,从而抑制HGF的诱导肿瘤生长、侵袭、迁徙和促血管新生等生物活性。研究证实NK4具二重功能:HGF的抑制剂和非依赖于HGF的血管新生抑制剂,具肿瘤治疗价值。对肺癌、大肠癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、胃癌、肝癌、多发性骨髓瘤、纤维肉瘤等多种恶性肿瘤的研究证实,NK4具有显著的抑瘤效应,是HGF相关研究中的重点之一。但迄今国内外尚无NK4对淋巴瘤抑制作用的相关研究。 直接使用NK4蛋白和通过载体介导NK4基因转染后的表达是目前主要的研究方法。后者最为常用,根据导入方式分直接导入和转染后导入两种技术。直接导入法不需转染细胞,可直接进行瘤内或腹腔内注射且可反复加强,但持续表达时间短。转染后导入法需先构建其表达载体,再以适当方法转染细胞,然后进行体内或体外实验,虽操作复杂,但因转染后可获稳定、高效表达,效果更理想。 因此,在本研究中我们试图通过NK4基因转染Raji细胞,探索NK4对淋巴瘤的抑制作用。拟综合应用分子生物学、细胞生物学、免疫组化等多项技术,如细胞培养、基因克隆、基因转染、半固体培养、实时FQ-PCR、免疫细胞化学、ELISA等,进行相关工作。 方法 在第一部分,根据靶序列设计引物,采用RT-PCR,获得NK4、c-MET和HGF的特异性目的片段,分别与载体pGEM-T Easy和pMD19-T Simple构建相应重组质粒,作为定量标准;优化反应条件和组分浓度,分别建立NK4 mRNA、c-MET mRNA和HGF mRNA相应的实时FQ-PCR,并进行方法学评价。 在维持底层胶琼脂糖浓度为0.5%的基础上,对上层胶琼脂糖浓度(0.1%~0.5%)和细胞浓度(100个/孔~5000个/孔)进行选择,改良琼脂糖半固体培养体系。 根据真核载体pVITRO2 MCS2的酶切位点,设计引物,经RT-PCR获得NK4和HGF全长片段,与载体pMD19-T Simple重组,鉴定确认序列正确后扩大、提纯,酶切后回收目的片段分别与和pVITRO2重组,构建重组真核表达质粒pVITRO2-NK4 Whole和pVITRO2-HGF Whole。 在第二部分,重组质粒pVITRO2-NK4 Whole和pVITRO2-HGF Whole以阳离子脂质体法分别转染Raji细胞,经潮霉素B筛选、RT-PCR、ELISA和免疫细胞组化等方法,鉴定转染细胞成功与否;通过绘制生长曲线、观察克隆形成能力和生长特点,评价NK4基因、HGF基因转染对Raji细胞生物性状的影响;采用实时FQ-PCR检测转染细胞c-MET mRNA的表达变化;采用ELISA检测NK4基因、HGF基因转染后的磷酸化c-MET蛋白的变化。综合以上结果评价NK4基因转染对Raji细胞的增殖、迁徙和侵袭的抑制作用。 此外,使用10 ng/ml HGF蛋白、100 ng/ml NK4蛋白分别处理NK4转染细胞、HGF转染细胞,通过观察克隆形成能力、生长特点、mRNA表达、磷酸化c-MET蛋白等指标的变化,评价NK4蛋白对Raji细胞的抑制作用和NK4基因转染对HGF蛋白的拮抗作用。 结果 在第一部分,我们构建了的重组质粒pGEM-T Easy-NK4、pGEM-T Easy-c-MET和pMD19-T Simple-HGF,分别作为NK4 mRNA、c-MET mRNA和HGF mRNA的定量标准。分别设计第二引物对和探针,优化了引物、探针、dNTPs和MgCl2的浓度和反应条件,建立了分别检测NK4 mRNA、c-MET mRNA和HGF mRNA的实时FQ-PCR。经方法学评价试验证实:NK4、c-MET和HGF的mRNA实时FQ-PCR的标准曲线斜率分别为-3.513±0.028、-3.680±0.073、-3.710±0.011,相关系数分别为0.999、0.996、0.998,扩增效率分别达92.6±1.0%、87.6±1.4%、86.0±0.4%;批内、日内、日间变异系数分别为2.1%、4.0%、6.8%,1.9%、3.9%、7.0%,2.5%、3.1%、8.3%;灵敏度分别达2、5、5拷贝/μl。 筛选后确定上层胶琼脂糖浓度为0.3%、细胞浓度为1000个/孔,结合0.5%琼脂糖底层胶建立半固体培养体系。经RT-PCR获得全长序列的NK4 cDNA和HGF cDNA,并由此构建了真核表达重组质粒pVITRO2-NK4 Whole和pVITRO2-HGF Whole,经PCR、酶切和测序等证实NK4 cDNA和HGF cDNA成功重组并保持序列完整和正确。在第二部分,重组质粒pVITRO2-NK4 Whole和pVITRO2-HGFWhole分别转染Raji细胞。潮霉素B筛选后的转染细胞经RT-PCR确认存在目的片段,培养液中NK4蛋白、HGF蛋白含量分别为4.14±0.19 ng/ml和5.38±0.31 ng/ml,免疫细胞组化结果呈阳性,提示转染成功,获得转染细胞株。 NK4转染细胞和HGF转染细胞达生长曲线峰值的时间分别为5天和3天,与对照组(未转染Raji细胞、空载体pVITRO2转染细胞均为4天)相异;前者形成的细胞团较小、边缘整齐、散在细胞少,而后者的细胞团松散、边缘不整齐、细胞呈扩散性生长;两组的c-MET mRNA分别为5.71±0.29和6.48±0.18,磷酸化c-MET蛋白分别为3.35±0.38 U/ml和4.96±1.18 U/ml ;克隆形成数分别为64.39±4.63/孔和124.61±5.16/孔,与对照组相比,差异显著(P0.001),两组间差异也具高度统计学意义(P0.001)。结果提示,NK4基因转染抑制了Raji细胞的生长,而HGF基因转染促进了其生长。 此外,NK4蛋白处理的HGF转染细胞组的克隆形成能力降低(89.78±5.38/孔)、处理后10 min的c-MET mRNA增高(7.67±0.20)、HGF mRNA表达显著增强(9.16±0.14)而磷酸化c-MET蛋白降低(8.97±1.19 U/ml);HGF蛋白处理的NK4转染细胞组的克隆形成能力明显增加(64.39±4.63/孔)、处理后10 min的c-MET mRNA明显增强(8.10±0.22)、NK4 mRNA(9.73±0.34)和磷酸化c-MET蛋白(65.24±2.04 U/ml)均显著增强,分别与对照组及未处理组的差异均有高度统计学意义(P0.001)。提示NK4蛋白促进了HGF转染细胞c-MET mRNA、HGF mRNA的应激性表达加强,而抑制了克隆的形成和c-MET蛋白磷酸化; HGF蛋白有助于NK4转染细胞的克隆形成,促进c-MET mRNA、NK4 mRNA的表达和c-MET蛋白的磷酸化。 研究结论 1.构建了定量标准,分别建立了HGF mRNA、NK4 mRNA和c-MET mRNA相应的实时FQ-PCR。 2.建立了适宜的半固体培养体系。 3.构建了真核表达重组质粒pVITRO2-NK4 Whole和pVITRO2-HGF Whole。 4.成功转染Raji细胞,获得NK4基因转染细胞株和HGF基因转染细胞株。 5. NK4基因转染对Raji细胞具抑制作用,而HGF基因转染则具促进作用。 6. NK4蛋白抑制HGF基因转染细胞的生长,而NK4基因转染细胞对HGF蛋白具拮抗作用。
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R733.1

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赖人旭,张世能,Toshikazu Nakamura,袁世珍;NK4基因转染对裸鼠胰腺癌移植瘤生长的影响[J];癌症;2005年10期
2 王化丽;张淑兰;鲁艳明;姜继勇;朱晓钰;;肝细胞生长因子对卵巢癌细胞侵袭的促进作用及信号转导途径[J];癌症;2006年05期
3 陈俊忠;赵勇;徐嘉凤;刘青;刘圣活;张洪德;;肝细胞生长因子及其受体在胃癌组织中的表达[J];南方医科大学学报;2007年11期
4 陈盛亭,张学利,曾慧兰,李娟,童秀珍,钟隽,张涛;32例多发性骨髓瘤患者血清肝细胞生长因子水平测定的临床意义[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2005年02期
5 施为建;周巧云;蒋凤莲;鞠文东;王冬娥;陆小军;;血清肝细胞生长因子在大肠癌肝转移患者中的临床价值[J];临床肿瘤学杂志;2007年11期
6 郭运生;周文阔;;大肠癌中肝细胞生长因子mRNA的定量表达及其临床价值[J];山东医药;2007年03期
7 高霞,刁路明,陈洪雷,李恒,李蓓芸,邹祖玉,陈道平,刘铭球;肝细胞生长因子及其受体在非小细胞肺癌中的表达及意义[J];实用肿瘤杂志;2005年01期
8 肖娟,邹萍,黄士昂,胡中波,刘凌波,游泳;凋亡在脐血造血干/祖细胞冷冻损伤中的作用及其机制研究[J];中国实验血液学杂志;2004年01期
9 夏云金,高清平,万楚成,程范军,王为民,郭仁慈;肝细胞生长因子对ALL小鼠骨髓移植后GVHD和血清Th1/Th2相关细胞因子的影响[J];中国实验血液学杂志;2005年01期
10 冯仟佳,杨涛,解军,牛勃,韩锐,陈修贵,梁冬明;不同浓度NK4对多种肿瘤细胞侵袭能力的影响[J];中国药物与临床;2005年11期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 岑东,吕建新,裴仁治;肝细胞生长因子在血液学的研究进展[J];白血病.淋巴瘤;2003年04期
2 赵杨;徐树雷;申兴斌;;食管鳞癌肝细胞生长因子的表达及意义[J];承德医学院学报;2011年01期
3 赵杨;申兴斌;;HGF-c-met在消化系统恶性肿瘤中的研究进展[J];承德医学院学报;2011年02期
4 肖琳;唐良萏;;52例HGF在子宫内膜癌组织中的表达及其与血管生成的临床分析[J];重庆医学;2005年12期
5 谢斌;唐春;吴刚;陈平;;c-Met、MMP-2、MMP-9在肝细胞癌中的表达及临床意义[J];第三军医大学学报;2008年12期
6 高蕾;陈幸华;张诚;张曦;高力;梁雪;龚奕;彭贤贵;郝磊;王庆余;;BALB/c-nu/nu裸鼠造血微环境损伤模型的建立[J];第三军医大学学报;2009年05期
7 张维;李宝金;伊远学;吴立旋;刘晓平;陶剑平;;小干扰RNA特异性抑制淋巴细胞T-bet表达的研究[J];第三军医大学学报;2009年13期
8 胡明泰;哈小琴;高鹏;;肝细胞生长因子拮抗剂NK4抑制肿瘤的机制[J];第四军医大学学报;2008年01期
9 柯霞;杨玉成;洪苏玲;;靶向EBV-LMP1脱氧核酶对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响[J];第四军医大学学报;2009年22期
10 陈汝福,孔宪和;胰腺癌基因治疗研究进展[J];肝胆外科杂志;2004年06期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 锁涛;胆囊癌细胞运动侵袭相关机制的研究[D];复旦大学;2004年
2 张维一;c-met在胃癌、残胃癌中的表达以及NK4对其表达的影响[D];第二军医大学;2004年
3 韩振国;肝细胞生长因子(HGF/SF)与肺癌转移的相关性研究[D];吉林大学;2005年
4 吴仲文;肠道微生态变化与移植肝CGD的相关研究[D];浙江大学;2006年
5 苏燕;低氧诱导因子-1对肝细胞生长因子基因表达调控机制的研究[D];中国协和医科大学;2006年
6 李玉香;人肝细胞再生因子表达载体构建及抗肝纤维化作用[D];吉林大学;2007年
7 张玉华;HGF通过MEK/ERK和PI3K/AKT信号途径影响人大肠癌细胞侵袭能力及VEGF表达[D];南京医科大学;2007年
8 林媚;基质型高分子药物缓释体系的研究[D];复旦大学;2007年
9 高蕾;人脐血源基质细胞促进巨核细胞增殖作用及机制探讨[D];第三军医大学;2008年
10 白华;NK4真核表达载体的构建及转染子宫颈癌细胞的相关研究[D];中国医科大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王家瑞;肝细胞生长因子对大鼠背部超长任意皮瓣存活率影响的实验研究[D];广西医科大学;2011年
2 王振宝;ERK/MAPK信号通路在人结肠癌细胞SW620增殖、移行中的作用[D];河北医科大学;2011年
3 李玲姝;糖皮质激素和硼替佐米体外干预对多发性骨髓瘤细胞BAFF/APRIL表达的影响[D];中南大学;2011年
4 肖扬;骨髓间充质干细胞调节树突状细胞治疗再生障碍性贫血的免疫机制研究[D];广州医学院;2010年
5 张相杰;巨噬细胞移动抑制因子对小鼠血管外膜成纤维细胞增殖、迁移及表型转换的影响及雷公藤内酯醇的抑制作用[D];广州医学院;2011年
6 王勇;NK_4因子原核基因工程表达体系的构建及生物学活性初步测定[D];山西医科大学;2003年
7 肖琳;HGF、c-Met、PCNA、MVD在子宫内膜癌组织中的表达及其意义[D];重庆医科大学;2004年
8 陈秀娟;卵巢癌患者血清、腹水HGF水平测定与组织HGF及c-Met受体表达的研究[D];山东大学;2005年
9 高力;白血病患者肝细胞生长因子的表达及其临床意义[D];第三军医大学;2006年
10 张萍;间充质干细胞抑制T淋巴细胞增殖减轻移植物抗宿主病机制研究[D];郑州大学;2006年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赖人旭,袁世珍,Toshikazu Nakamura;转染NK4基因对人胰腺癌SW1990细胞生物学特性的影响[J];癌症;2004年10期
2 岳文,裴雪涛;以胚胎干细胞作为启动细胞的造血干细胞工程及其应用前景[J];中国输血杂志;2002年06期
3 张曦,陈幸华,刘林,彭贤贵,孔佩艳,刘红,张怡,高蕾,钟永明,王庆余;人脐血CD34~+细胞体外DEXTER基质细胞培养的动态观察[J];第三军医大学学报;2003年14期
4 陈俊忠;徐嘉凤;叶红军;;肝细胞生长因子及其受体与胃癌[J];国际消化病杂志;2006年02期
5 赖人旭;肝细胞生长因子拮抗剂NK4在肿瘤中的研究进展[J];国外医学(肿瘤学分册);2002年02期
6 高蕾,陈幸华,张曦,彭贤贵,刘耀,孔佩艳,刘林,刘红,张怡;人脐血基质细胞对脐血CD34~+细胞体外扩增的作用[J];医学研究生学报;2005年06期
7 徐令,乔春平,黄绍良,李树浓,吴旋;体外定向诱导胚胎干细胞为造血细胞[J];科学通报;2000年08期
8 陈盛亭,李扬秋,张学利,陈少华,钟隽,张涛;多发性骨髓瘤患者血管内皮生长因子、碱性纤维母细胞生长因子、肝细胞生长因子血清浓度的临床意义[J];临床荟萃;2004年08期
9 贡元,朱鼎良;RT-PCR检测血管外膜成纤维细胞中肝细胞生长因子及其受体基因的表达[J];上海医学;1999年07期
10 崔琳,纪萍,于建宪;胃癌组织中HGF/c-Met的组织芯片检测及其与肿瘤血管生成关系[J];齐鲁医学杂志;2005年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 周春华;于海;高春芳;包广宇;;肝细胞生长因子对系膜细胞增殖及TGF-β1启动子活性的影响[J];中国现代医学杂志;2006年22期
2 陈娟;余英豪;;淋巴瘤基因治疗相关技术的研究进展[J];实用癌症杂志;2010年01期
3 李文君;李校堃;蔡绍晖;戚仁斌;苏志坚;肖健;吴志玲;;肝细胞生长因子拮抗放线菌素D诱导的肝细胞凋亡及机制探讨[J];中国病理生理杂志;2006年05期
4 徐娟;哈小琴;唐瑜;昌业伟;;重组腺病毒Ad-HGF抑制博来霉素致大鼠肺纤维化的作用[J];第四军医大学学报;2008年05期
5 李丽霞;张英;杨志诚;王玉洲;罗伟仁;;白细胞介素-21对Burkitt淋巴瘤细胞株Raji增殖及C-myc表达的影响[J];实用医学杂志;2008年15期
6 哈小琴;刘登瑞;杨小龙;吕同德;高明太;唐瑜;昌业伟;;携带肝细胞生长因子基因的减毒沙门氏菌对小鼠免疫功能的影响[J];中国免疫学杂志;2008年12期
7 李红;谈顺;;HGF与TGF-β1和P-选择素在恶性肿瘤转移中的作用[J];中国热带医学;2010年10期
8 顾永耀;贺菽嘉;王华;曾晶晶;;反义寡核苷酸对淋巴瘤细胞Livin基因表达及细胞凋亡的影响[J];中国现代医学杂志;2010年16期
9 赵春华;曲凡;赵孝先;刁玉巧;朱秀丽;陈健;李梅;;As_2O_3对淋巴瘤Raji细胞抑制效应及其Id4基因表达的影响[J];中华肿瘤防治杂志;2010年17期
10 刘燕;陈必良;哈小琴;李富军;;重组腺病毒肝细胞生长因子对乙型肝炎病毒感染滋养层细胞的抑制作用[J];西北国防医学杂志;2010年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王艳芳;李艳莹;克晓燕;;Notch信号在淋巴瘤细胞中的表达以及对增殖的影响[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
2 宋卫青;吕维红;陈华波;;内毒素诱导肝细胞凋亡及肝细胞生长因子的抑制作用[A];第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2006年
3 颜次慧;杨铭;李双静;熊冬生;;抗CD20 ScFv-TRAIL融合蛋白的构建表达及其对BJAB淋巴瘤细胞生长的抑制作用[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
4 沈建国;王林波;;肝细胞生长因子基因转染对胃癌MKN-45细胞凋亡抑制作用的研究[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
5 龚红霞;路青;冯琦;池嘉昌;许建荣;;小鼠淋巴瘤模型建立及MRI信号特征变化的定量研究[A];中华医学会第16次全国放射学学术大会论文汇编[C];2009年
6 杨锡贵;;恶性淋巴瘤的诊断[A];山东省第四届“CSCO——山东”首届肿瘤化疗学习班论文汇编[C];2009年
7 陈鸣;管明;;肝细胞生长因子对兔上颌窦黏膜修复的研究[A];2007浙江省耳鼻咽喉—头颈外科学术会议论文汇编[C];2007年
8 国风;孙爱宁;王文娟;周鹏;陈子兴;;非传统性NF-κB活性与TRAF3在霍奇金淋巴瘤细胞中的作用机制[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
9 周春华;于海;;HGF对系膜细胞增殖及TGF-β_1启动子活性的影响[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年
10 袁彪;张永荣;赵忠;赵胜;;重组腺病毒-肝细胞生长因子基因治疗缺血性心脏病短期安全性与疗效学研究[A];中华医学会第七次全国胸心血管外科学术会议暨2007中华医学会胸心血管外科青年医师论坛论文集心血管外科分册[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 孙金花;替卡格雷:血小板抑制作用更强更安全[N];中国医药报;2011年
2 格林期货 李冬梅;短暂喘息之后 油价继续狂奔[N];中国证券报;2006年
3 ;俄专家认为抗氧化剂对癫痫有抑制作用[N];中国高新技术产业导报;2001年
4 记者 王春;我学者认知一个新的蛋白质结构域[N];科技日报;2004年
5 乔健;“凡乐”对冠状病毒具有一定抑制作用[N];医药经济报;2003年
6 华文;俄专家认为抗氧化剂对癫痫有抑制作用[N];中国医药报;2001年
7 胡进之;美加息周期近尾声游资再度布局中国[N];第一财经日报;2006年
8 郭茹;人民币“加速”跑:只因美元在贬值[N];第一财经日报;2008年
9 伏新顺;调味佳品多良药[N];家庭医生报;2007年
10 本报记者 李雁争;业界:成品油提价对经济抑制作用有限[N];上海证券报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 岑东;NK4对淋巴瘤抑制作用的实验研究[D];重庆医科大学;2008年
2 岳丹;NK4及TRPC6阳离子通道调控HGF对前列腺癌的生物学作用[D];中国医科大学;2010年
3 唐友红;高效靶向调控突变型Bik基因促淋巴瘤细胞凋亡研究[D];中南大学;2010年
4 吴润叶;基于磁共振成像的早期上呼吸道结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤侵犯特征及预后因素研究[D];北京协和医学院;2012年
5 周一军;肝细胞生长因子对晚期糖基化终产物诱导人血管内皮细胞凋亡的抑制作用及其机制的研究[D];中国医科大学;2006年
6 王倩;他汀类药物对SD乳鼠心肌成纤维细胞增殖的抑制作用和凋亡的诱导作用及其信号转导通路研究[D];河北医科大学;2010年
7 祝荫;慢病毒载体介导NK4基因修饰骨髓间充质干细胞靶向治疗胃癌的实验研究[D];南昌大学;2010年
8 何艳华;生理浓度糖皮质激素对内毒素诱导的心肌炎症的抑制作用及机制研究[D];广州医学院;2011年
9 胡玉琳;脱氧核酶及锁核酸核酶对HepG2.2.15细胞HBsAg、HBeAg表达抑制作用的研究[D];吉林大学;2006年
10 王春辉;格尔德霉素治疗脑胶质瘤及其与肝细胞生长因子相关性研究[D];吉林大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 冯青俐;肝细胞生长因子与急性冠脉综合征的相关性研究[D];郑州大学;2005年
2 刘明铭;肝细胞生长因子在正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中的表达[D];四川大学;2005年
3 包怀鸣;血清肝细胞生长因子在胃癌中的表达及意义[D];苏州大学;2007年
4 阳虹;血清肝细胞生长因子与慢性充血性心力衰竭的相关性研究[D];吉林大学;2008年
5 张劼;2型糖尿病肾病患者肝细胞生长因子的水平及其临床意义[D];山西医科大学;2008年
6 高霞;肝细胞生长因子在非小细胞肺癌中的表达及意义[D];武汉大学;2005年
7 金香淑;非霍奇金淋巴瘤患者血浆肝细胞生长因子水平测定及其临床意义[D];中南大学;2007年
8 凌跃新;肝细胞生长因子在胃癌患者血清中的表达及其临床意义[D];复旦大学;2008年
9 周伟;肝细胞增殖、凋亡与肝纤维化逆转的关系及机制探讨[D];重庆医科大学;2005年
10 宋丽;肝细胞生长因子在哮喘大鼠气道内的表达及血管紧张素受体拮抗剂的影响[D];郑州大学;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026