收藏本站
《重庆医科大学》 2008年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

PPARγ在人胶质瘤细胞SWO-38中诱导分化作用机制的研究

王明华  
【摘要】: 目的: 了解PPARγ蛋白在人胶质瘤组织和细胞株中的表达,观察CDA-2对人胶质瘤细胞SWO-38 PPARγ蛋白表达的影响和对SWO-38细胞的诱导分化作用,并进一步探讨PPARγ在胶质瘤诱导分化中的作用机制,为胶质瘤诱导分化治疗提供治疗靶点,同时也为发展新的分化诱导剂提供靶标和科学依据。 方法: 1.应用免疫组化检测40例胶质瘤组织中PPARγ蛋白表达;RT-PCR和western blot检测人胶质瘤细胞SWO-38、U251和SHG-44中PPARγmRNA和蛋白表达;western blot检测三株胶质瘤细胞GFAP蛋白表达。 2. Western blot检测罗格列酮、ATRA和CDA-2在不同剂量和不同作用时间对SWO-38细胞PPARγ蛋白表达的影响;RT-PCR进一步了解CDA-2对SWO-38细胞PPARγmRNA表达的调节;免疫组化CDA-2对PPARγ蛋白亚细胞定位的影响。 3. MTT、集落形成实验检测CDA-2对SWO-38细胞活性及增殖能力的影响;FCM进一步了解CDA-2对SWO-38细胞周期的影响;HE染色、免疫组化和western blot从细胞形态和GFAP蛋白表达等方面检测CDA-2对SWO-38细胞的诱导分化作用。 4. PPARγ抑制剂GW9662预处理细胞后,通过MTT、集落形成实验、FCM和western blot等方法检测SWO-38细胞在细胞活性、增殖能力、细胞周期和GFAP蛋白表达等方面的变化,了解CDA-2对SWO-38细胞的增殖抑制和诱导分化作用与PPARγ之间的关系。同时,western blot检测CDA-2诱导SWO-38细胞分化过程中PTEN(p-PTEN)和COX-2蛋白的表达; GW9662预处理细胞阻断PPARγ活化,western blot进一步检测SWO-38细胞PTEN(p-PTEN)和COX-2蛋白在对照组( DMSO+CDA-2 )和抑制剂组(GW9662+CDA-2)的表达,探讨PPARγ在CDA-2诱导SWO-38细胞分化中的作用机制。 结果: 1. PPARγ在胶质瘤组织中阳性表达率仅为37.5%,在瘤旁脑组织中的阳性表达率为76.9%,二者间差异有显著意义(p0.05);PPARγ表达与胶质瘤分化程度无明显相关性(p0.05);PPARγmRNA和蛋白在SWO-38和U251细胞均有中表达,而SHG-44细胞中无表达;GFAP蛋白在SHG-44细胞中表达明显高于SWO-38和U251细胞(p0.05)。 2. Western blot结果提示罗格列酮、ATRA和CDA-2均可促进SWO-38细胞PPARγ蛋白表达,CDA-2 3mg/ml作用3 h即可明显促进细胞PPARγ蛋白表达;RT-PCR结果则表明CDA-2可促进SWO-38细胞PPARγmRNA表达;免疫组化检测结果显示对照组PPARγ蛋白在细胞质和细胞核中均有表达,CDA-2处理组PPARγ蛋白主要表达于胞核,即PPARγ蛋白出现核转位。 3. MTT和集落形成实验结果提示CDA-2抑制SWO-38细胞活性和增殖能力,中效抑制浓度(IC50)分别为2.33±0.37 mg/ml和0.51±0.01 mg/ml,其抑制作用呈时间和剂量依赖性增强;细胞周期检测提示在CDA-2作用下,G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,提示G1期阻滞;HE染色结果显示CDA-2 3 mg/ml作用72 h后SWO-38细胞胞体增大,核/浆比例减小,细胞突起增多变长;免疫组化和western blot显示细胞GFAP蛋白表达增强,瘤细胞表现出向成熟胶质细胞分化表型。 4. PPARγ抑制剂GW9662预处理SWO-38细胞后,与对照组(DMSO+CDA-2组)相比,MTT结果显示抑制剂组CDA-2对细胞的抑制作用减弱,二者的IC50分别为2.46±0.16 mg/ml及1.79±0.18 mg/ml(p0.05);集落形成实验结果显示抑制剂组CDA-2对细胞克隆形成的抑制作用下降(p0.05);FCM显示抑制剂组S期细胞增多(p0.05);western blot结果提示抑制剂组GFAP蛋白表达较对照组明显下降(p0.05),提示CDA-2对SWO-38细胞的增殖抑制和诱导分化作用与PPARγ有关。同时,western blot结果亦表明CDA-2可促进SWO-38细胞PTEN(p-PTEN)蛋白表达而抑制COX-2蛋白表达;Western blot进一步证实CDA-2对SWO-38细胞PTEN(p-PTEN)和COX-2蛋白表达的调控作用可部分被GW9662逆转,提示CDA-2对SWO-38细胞PTEN(p-PTEN)和COX-2蛋白的调控作用与PPARγ有关。 结论: 1. PPARγ与胶质瘤的发生相关,可为胶质瘤治疗提供新的靶点。 2. CDA-2可上调SWO-38细胞中PPARγ蛋白表达,同时促进其核转位,提示CDA-2可活化PPARγ蛋白。 3. CDA-2在体外实验中显示对SWO-38细胞的增殖抑制和周期阻滞作用;同时,CDA-2诱导SWO-38细胞趋于成熟分化,是一种良好的诱导分化剂。 4. CDA-2对SWO-38细胞的增殖抑制和诱导分化作用与PPARγ信号通路有关。PPARγ通过对PTEN(p-PTEN)、COX-2和GFAP等基因表达的调控参与胶质瘤的诱导分化。
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R739.41

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 司徒锐,王惠华,王锦环,何立朋,朱献伦,区惟芳;人脑恶性胶质瘤体外细胞系SWO—38的建立和生物学特性[J];癌症;1987年04期
2 赵雯,史景泉,卞修武,万瑛,卢佳友;反义GFAP对人恶性胶质瘤细胞系CHG-5增殖及分化的影响[J];第三军医大学学报;2004年18期
3 孙立军,黄强,王爱东,兰青,杜子威;苯丁酸钠对人脑胶质瘤细胞的诱导分化作用[J];苏州大学学报(医学版);2002年04期
4 孙立军,黄强;苯丁酸钠抗肿瘤的广谱诱导分化作用[J];中国新药与临床杂志;2001年06期
5 王红艳;钟雪云;涂永生;刘致中;;CDA-Ⅱ诱导人胶质瘤细胞分化与抑瘤的作用[J];中国药理学通报;2006年02期
6 郑爱红;庄英帜;曹建国;;罗格列酮对人肝癌SMMC7221细胞生长和分化的影响[J];中国药理学通报;2006年03期
7 李湛君,常慧兰,徐康森,张义兴;尿多酸肽对人肝癌细胞Smmu7721体内体外抑制作用[J];药物分析杂志;2001年03期
8 杜子威;徐庚达;王尧;刘振延;黄强;郭玉华;陈桂林;李斌;谈琪云;奚为乎;;人脑恶性胶质瘤体外细胞系SHG-44的建立及其特征[J];医学研究通讯;1984年12期
9 许良中,杨文涛;免疫组织化学反应结果的判断标准[J];中国癌症杂志;1996年04期
10 王红艳,钟雪云,刘致中,詹美意;尿多酸肽在人胶质瘤中的抗瘤作用[J];中国肿瘤临床;2005年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 余海;施瑞华;凌亭生;;食管鳞癌发生过程中TESTIN的表达变化及临床意义[J];安徽医学;2010年08期
2 黄健;李小宁;赵英伟;;人结肠直肠癌组织中B7-H4的表达及其临床意义[J];安徽医药;2009年08期
3 刘和凤;聂晨晨;周安胜;;HPLC-UV法测定苯丁酸钠片的含量及有关物质[J];安徽医药;2011年06期
4 张健,张宗城,张积仁,汪森明;Glob-N对胶质瘤细胞株SWO-38生长的体外实验研究[J];癌症;2000年03期
5 胡陆林,区穗芳;乳腺癌雌激素受体表达与p53、PCNA、AgNOR表达关系[J];癌症;2000年06期
6 冀学宁,王波,毛利民,王丽辉,吕申,张朝;间叶组织肿瘤中增殖细胞核抗原、p53、Rb基因产物表达及意义[J];癌症;2001年05期
7 李杰,许良中,吴炅;三种耐药基因蛋白表达在乳腺癌中的临床意义[J];癌症;2001年08期
8 王丽辉,刘大渔,陈英杰,候力,王波,毛利民,吕申;乳腺癌淋巴道转移潜能与癌细胞中钙粘素及金属蛋白酶的关系[J];癌症;2002年09期
9 施铭岗,黄强,董军,孙志方,兰青;诱导分化剂与细胞毒化疗药联合治疗可移植性人脑胶质瘤的实验研究[J];癌症;2002年10期
10 项达军,薛文群,冯一中,陆以农,陈萍倩,王嘉园;CD44v6、bcl-2和VEGF在子宫内膜腺癌中的表达及其意义[J];癌症;2003年06期
中国重要会议论文全文数据库 前9条
1 姚晖;姜晓刚;梁磊;梁颖;黄志恩;张继平;邓虹珠;;哈蟆油对雌性衰老大鼠肝脏组织p16,p21和cyclinD1蛋白表达的影响[A];共铸医药学术新文明——2012年广东省药师周大会论文集[C];2012年
2 姚晖;姜晓刚;梁磊;梁颖;黄志恩;张继平;邓虹珠;;哈蟆油对雌性衰老大鼠肝脏组织p16,p21和cyclinD1蛋白表达的影响[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
3 孙建纯;;关于宁养疗护“本土化”建设的思考——三论“中国的宁养疗护需要什么?”[A];第七届全国癌症康复与姑息医学大会大会论文集和专题讲座[C];2011年
4 姚晖;姜晓刚;张继平;焦河玲;邓虹珠;;哈蟆油对D-半乳糖致雄性衰老大鼠肝脏组织STAT3蛋白的影响[A];2010年广东省药师周大会论文集[C];2011年
5 姚晖;姜晓刚;张继平;焦河玲;邓虹珠;;哈蟆油对D-半乳糖致雄性衰老大鼠肝脏组织STAT3蛋白的影响[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
6 赵红蕾;刁昱文;冯新;韩文瑜;雷连成;孙长江;;噬菌体展示肽库技术及在肿瘤研究中的应用[A];中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会(第三届中国兽药大会学术论坛)论文集[C];2010年
7 田杰;李冬云;许亚梅;董青;贾玫;陈信义;;尿多酸肽在血液肿瘤疾病中的应用——附2例典型病案报道[A];全国中西医结合血液学学术会议论文汇编[C];2010年
8 战晓农;赵学军;刘恋;黄燕;王雷;梁志;冯伟峰;;双氢青蒿素抑制结直肠细胞生长作用及其机理的研究[A];中医肛肠理论与实践——中华中医药学会肛肠分会成立三十周年纪念大会暨二零一零年中医肛肠学术交流大会论文汇编[C];2010年
9 黄学涛;王守志;王宇祥;冷丽;李辉;;鸡ACOX3基因5′侧翼区多态性与生长和体组成性状的相关研究[A];全球肉鸡产业论坛暨第二届中国白羽肉鸡产业发展大会会刊[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 宁萍;人ELAC2基因在肿瘤中的生物学功能研究[D];苏州大学;2010年
2 张丽;射干麻黄汤对慢性哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
3 曲中原;青龙衣抗肿瘤活性成分及其作用机制研究[D];北京中医药大学;2010年
4 卜强;RhoC和ROCK-1在前列腺癌中的表达及其对MAPK和Akt影响的实验研究[D];山西医科大学;2011年
5 郭万松;熊果酸对人膀胱癌T24细胞的抑制作用及其机制研究[D];吉林大学;2011年
6 吕子全;发育期全氟辛烷磺酸盐暴露对成年子代大鼠的糖脂代谢的影响及神经毒性研究[D];华中科技大学;2011年
7 徐洪斌;宫颈癌新辅助化疗和影响根治性治疗后预后因素的评估[D];华中科技大学;2011年
8 杨婧;Toll样受体4在肝癌CD4~+CD25~(high)FOXP3~+T细胞免疫调节中的机制研究[D];华中科技大学;2011年
9 崔烨;氧化应激在持续性肺纤维化中作用的实验研究[D];北京中医药大学;2011年
10 房艳辉;低密度脂蛋白对高糖背景下人腹膜间皮细胞转分化和细胞外基质蓄积的影响及其机制探讨[D];北京协和医学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王亚秋;三氧化二砷对雄激素非依赖性前列腺癌PC-3裸鼠移植瘤作用的研究[D];郑州大学;2010年
2 高菲菲;降钙素受体在骨肉瘤的表达及意义[D];郑州大学;2010年
3 卢瑞利;自噬相关基因Beclin1和PTEN在食管鳞癌中的表达和意义[D];郑州大学;2010年
4 杨丽敏;Paxillin、PTEN在胃腺癌组织中的表达及其临床意义[D];郑州大学;2010年
5 王琼叶;PTEN基因在食管鳞癌中表达和突变的研究[D];郑州大学;2010年
6 李静;Beclin1、Caspase3在宫颈鳞癌患者新辅助化疗前后癌组织中的表达及其意义[D];郑州大学;2010年
7 云新蕾;DLC-1和p130Cas在卵巢上皮性癌组织中的表达及其意义[D];郑州大学;2010年
8 武福军;罗格列酮对Aβ影响及其机制的研究[D];安徽农业大学;2010年
9 吴瑞华;雌孕激素受体、Ki-67在子宫内膜息肉中的表达及临床意义[D];苏州大学;2010年
10 潘海邦;胃癌组织中CEACAM6、MMP-9的表达及其临床病理意义[D];兰州大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘民培,陈伟,马世英,安天义,邹燕玲,初俊杰,吕振涛,张白洁,武宪荣;单克隆抗体SC13A的识别抗原在乳腺癌中的表达及其意义[J];癌症;1992年05期
2 赵彤,朱梅刚,黄宗义, 张亚历,张素娟,李梅芳;肺癌癌基因蛋白产物同步检测的对比分析[J];癌症;1995年01期
3 罗其中;脑胶质瘤诱导分化治疗的研究进展[J];中华神经医学杂志;2003年04期
4 陈自强,卞修武,辛榕,殷育松;人脑胶质瘤细胞系CHG-5的建立及其生物学特性的分析[J];第三军医大学学报;1999年12期
5 李伟生,黄强,董军,兰青,孙志方;苯丁酸钠诱导分化治疗可移植性人脑胶质瘤实验研究[J];中华神经外科疾病研究杂志;2002年02期
6 艾兆伟,查锡■,汤华,陈惠黎;视黄酸对人肝癌细胞的逆转作用——生物学研究[J];生物化学杂志;1990年02期
7 王娴,黄建瑾,李旭芬,张苏展;化疗对晚期胃癌患者细胞免疫功能的影响[J];实用癌症杂志;2001年03期
8 王志红,林菁;盐酸小檗碱对HL-60细胞增殖与分化的影响[J];中国药理学通报;2004年11期
9 周亭芳,庄英帜,曹建国;罗格列酮增强顺铂抑制人肺腺癌细胞增殖作用[J];中国药理学通报;2005年01期
10 李湛君,常慧兰,徐康森,张义兴;尿多酸肽对人肝癌细胞Smmu7721体内体外抑制作用[J];药物分析杂志;2001年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 付锐;徐航;涂汉军;罗杰;张力;;全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞分化的影响[J];现代肿瘤医学;2010年07期
2 林先和,李隆贵;5-氮杂胞苷诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化过程中PPARγ表达及其作用[J];第三军医大学学报;2004年06期
3 任黔川;彭芝兰;谭欣;;PPARγ在卵巢浆液性囊腺癌中的表达[J];重庆医学;2009年23期
4 束敏峰;;神经胶质瘤诱导分化的实验研究进展[J];中山大学研究生学刊(自然科学.医学版);2011年01期
5 赵颖,叶平;PPARγ及其激动剂影响心室重塑、心力衰竭的病理生理机制[J];武警医学院学报;2004年04期
6 严勇,赵甲山;神经胶质瘤治疗展望[J];国际神经病学神经外科学杂志;2005年05期
7 朱文博;;神经胶质瘤诱导分化治疗的研究进展[J];中山大学研究生学刊(自然科学、医学版);2008年01期
8 林先和;过氧化物酶体增殖物激活受体与代谢综合征[J];心血管病学进展;2004年02期
9 方静,田雪飞,谌贻璞;过氧化酶体增殖体激活受体γ及其配体与肾脏疾病的关系[J];国外医学.内科学分册;2004年03期
10 成峰,沈建华,罗小民,沈竞康,杨一鸣,沈旭,蒋华良,陈凯先;PPARγ激动剂的研究进展[J];中国药物化学杂志;2003年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张涛;王占祥;陈玉英;;MicroRNA与胶质瘤研究进展[A];中国医师协会神经外科医师分会第六届全国代表大会论文汇编[C];2011年
2 余细勇;李晓红;;骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的分子调节机制研究[A];第九届全国心血管药理学术会议论文集[C];2007年
3 李晓红;余细勇;林秋雄;单志新;钟久昌;黄薇;杨敏;林曙光;;微环境中骨髓干细胞向心肌细胞分化的基因表达研究[A];第六届海峡两岸心血管科学研讨会论文摘要集[C];2007年
4 王斌;卞修武;平轶芳;姜建勇;赵林涛;余世沧;王喆;;靶向胶质瘤干细胞药物筛选模型及诺帝抗胶质瘤干细胞作用的研究[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
5 王红艳;钟雪云;刘致中;;CDA-Ⅱ诱导人胶质瘤细胞分化与抑瘤的作用[A];中华医学会病理学分会2005年学术年会论文汇编[C];2005年
6 徐庆生;张小兵;周永庆;;胶质瘤干细胞及其放疗敏感性[A];2011年浙江省神经外科学学术年会论文汇编[C];2011年
7 王鹏;高松源;李文良;;PPARg激动剂对脑胶质瘤细胞粘附分子表达的抑制作用[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
8 羊裔明;孟文彤;张开基;李健;邓承祺;刘霆;贾永前;刘志刚;黄杰;龚玉萍;;丹参酮ⅡA治疗急性早幼粒细胞白血病的研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
9 何龙;宋文刚;徐红梅;张明徽;于益芝;周向阳;孙卫民;曹雪涛;;PPARγ量控调节单核巨噬细胞对LPS与CpG DNA的反应性[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年
10 潘冬生;;多基因修饰胶质瘤细胞疫苗的抗肿瘤免疫反应[A];中国医师协会神经外科医师分会第六届全国代表大会论文汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 哈尔滨血液病肿瘤研究所教授 马军衣晓峰 整理;诱导分化 治疗恶性肿瘤[N];健康报;2007年
2 刘宇;胶质瘤治疗又有新突破[N];黑龙江经济报;2009年
3 记者 匡远深;让胶质瘤干细胞不再“繁殖”[N];健康报;2011年
4 张献怀;全国癫痫外科脑胶质瘤治疗研讨会举行[N];科技日报;2005年
5 衣晓峰 冯宇曦;中药三氧化二砷有望成为治疗胶质瘤新药[N];中国医药报;2011年
6 本报记者 朱国旺;脑胶质瘤治疗——手术仍居中心地位[N];中国医药报;2005年
7 记者 施嘉奇 通讯员 王姿英;探索中药对干细胞分化的作用[N];文汇报;2009年
8 王姿英;中英合作中药调控干细胞分化研究启动[N];中国医药报;2009年
9 陈超;科学家发现引发细胞分化的分子通道[N];科技日报;2010年
10 雷诺岛;彻底击毙毁灭性疾病[N];医药经济报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王明华;PPARγ在人胶质瘤细胞SWO-38中诱导分化作用机制的研究[D];重庆医科大学;2008年
2 王爱东;胶质瘤发生、发展、治疗的靶细胞与靶分子研究[D];苏州大学;2008年
3 栾世海;MiRNA-126和miRNA-34a在胶质瘤细胞中功能的实验研究[D];复旦大学;2010年
4 陈儇;氯化甲基汞抗鼠胶质瘤细胞作用的体内外实验研究[D];吉林大学;2007年
5 赵能江;notch-1基因在胶质瘤中的作用及对Akt-mTOR通路的调控[D];福建医科大学;2010年
6 陶帮宝;Stathmin在胶质细胞瘤表达及其化疗药物敏感性研究[D];第二军医大学;2011年
7 苏静;抑制细胞内氯通道对胶质瘤肿瘤生物学特性影响的研究[D];吉林大学;2010年
8 李巧玉;神经生长因子在人脑胶质瘤中的表达特点及其临床意义[D];江苏大学;2011年
9 贺菽嘉;胶质瘤相关抗原MAGE-D4基因重组、表达特性分析及抗体血清学检测[D];广西医科大学;2010年
10 赵世斗;OCT4假基因在胶质瘤和乳腺癌中的表达及其意义的研究[D];山东大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王红艳;CDA-Ⅱ对人胶质瘤细胞增殖抑制和诱导分化的实验研究[D];暨南大学;2005年
2 陈宝敏;胶质瘤干细胞生物学特性比较及放射耐受机制的初步研究[D];苏州大学;2010年
3 陈亮;CD82/KAI1和CD9/MRP-1在神经胶质瘤细胞株中的表达及表达意义的初步研究[D];重庆医科大学;2010年
4 蒋召志;BMP4对胶质瘤细胞促分化作用的研究[D];吉林大学;2009年
5 薛进展;Rho/ROCK通路对人U87胶质瘤细胞侵润转移能力调节作用的体外实验研究[D];河南科技大学;2011年
6 王震东;在胶质瘤细胞中抑制FoxM1表达对其增殖和凋亡的影响初探[D];湖南大学;2010年
7 孙关;STAT3介导反义miR-21调控hTERT表达抑制胶质瘤细胞生长[D];南京医科大学;2011年
8 叶云;PDCD4基因在人脑胶质瘤组织中的表达及意义[D];苏州大学;2010年
9 孟葳;3.0TMRI弥散张量成像在脑肿瘤诊断及胶质瘤分级诊断的价值研究[D];广西医科大学;2010年
10 李超;胶质瘤源性exosome的提取及其蛋白组成研究[D];吉林大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026