收藏本站
《重庆医科大学》 2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

曲古抑菌素A促骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的筛选与验证实验

赵莉莉  
【摘要】: 背景在间充质干细胞(MSCs)的临床应用研究中,如何提高MSCs向心肌细胞的转化率是MSCs的研究热点。有研究表明,去乙酰化酶(HDAC)抑制剂通过阻断HDAC活性可以介导多种细胞的分化。也有文献报道曲古抑菌素A(TSA)可促进MSCs向成骨细胞和脂肪细胞分化。那么TSA是否能促进MSCs向心肌细胞分化成为我们关注的问题。 目的采用不同浓度TSA对MSCs不同时间的干预,筛选其抑制MSCs的HDAC活性适宜实验条件,并通过对干预后MSCs的肌钙蛋白T和Nkx-2.5、GATA-4基因表达的检测,验证TSA对MSCs向心肌细胞分化的促进作用。 材料和方法 1.100、300和500nmol/L的TSA对5-aza诱导后的MSCs分别进行6小时、24小时和48小时干预,比色法测定HDAC活性的变化。 2.上述不同浓度的TSA干预5-aza诱导后的MSCs24小时,连续培养3周,观察MSCs的形态变化并采用免疫荧光检测cTnT的表达,RT-PCR检测Nkx-2.5、GATA-4基因的表达。 结果 1.TSA干预后MSCs的HDAC活性较干预前有明显降低(P0.05);300和500nmol/L组HDAC活性较100nmol/L组显著降低(P0.05);300与500nmol/L组的HDAC活性无显著差异;三个浓度的24和48小时组较6小时组比较HDAC活性有显著降低(P0.05);24与48小时组的HDAC活性无显著差异。 2.干预后1周时MSCs细胞体积增大,呈棒状或球形,2周后集落内部细胞之间和邻近集落细胞之间出现连接,排列方向惭趋一致,3周时开始出现肌管结构。但随干预浓度和时间增加细胞死亡明显增加,细胞排列也趋于紊乱。 3.TSA干预后MSCs的cTnT表达较干预前有明显升高(P0.05), 300和500nmol/L组cTnT的表达较100nmol/L组明显增强(P0.05),而300与500nmol/L组cTnT的表达无显著差异。 4.TSA干预后MSCs的Nkx-2.5和GATA-4的表达随TSA干预浓度的增加而增强(P0.05),300和500nmol/L组较100nmol/L组有显著升高(P0.05),300与500nmol/L组无显著差异。 结论 1. TSA干预后MSCs的HDAC活性呈时间剂量依赖性抑制。 2. TSA能促进MSCs向心肌细胞分化。 3. 300nmol/L浓度的TSA干预MSCs24小时是其体外促进MSCs向心肌细胞分化的适宜实验条件。
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R541

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 张蕾,陈沅,田杰,张文,朱静;心肌细胞介导骨髓间充质干细胞的心肌样分化[J];第三军医大学学报;2005年16期
2 张文,田杰,江德勤,张蕾,朱静,陈沅;骨髓间充质干细胞体外分化为心肌样细胞相关调控基因的时序表达[J];中华心血管病杂志;2004年11期
3 吕铁伟,田杰,朱静,刘官信;大鼠骨髓间充质干细胞适宜分离和培养条件的研究[J];重庆医科大学学报;2004年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 叶发刚;夏长所;张卫兵;夏仁云;;兔骨髓间充质干细胞的分离、培养与鉴定[J];青岛大学医学院学报;2006年04期
2 朱静;邓兵;王金菊;田杰;王应雄;;5-aza诱导干细胞经乙酰化特异RNAi后心肌细胞发育相关基因检测[J];第三军医大学学报;2006年06期
3 朱静;冯川;李莉;邓兵;田杰;张晓萍;;干扰组蛋白乙酰化引发间充质干细胞心肌定向分化特定蛋白的异常表达[J];第三军医大学学报;2008年04期
4 沈兴;余更生;田杰;白永虹;朱静;刘官信;陈沅;;兔骨髓间充质干细胞心脏移植治疗扩张型心肌病的实验研究[J];第三军医大学学报;2008年12期
5 韦皓;陈沅;沈彪;赵璐;;BMP-13在C_3H10T_(1/2)干细胞向心肌样细胞分化过程中的作用[J];第三军医大学学报;2011年08期
6 张小飞;陈沅;田杰;李杨;王金菊;朱静;刘官信;;骨髓间充质干细胞体外分化为心肌样细胞过程中结构蛋白的发育[J];基础医学与临床;2006年07期
7 王金菊;田杰;吕铁伟;张小飞;朱静;李扬;陈沅;;大鼠MSCs诱导分化为心肌样细胞时离子通道基因的表达[J];基础医学与临床;2007年01期
8 李莉;朱静;冯川;田杰;;GCN5特异性质粒筛选及其对MSCs分化的影响[J];基础医学与临床;2008年06期
9 林建萍;田杰;刘官信;鲁荣;刘建平;智深深;朱静;;Islet-1在乙酰化调控网络中特异性辅助C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化[J];基础医学与临床;2012年04期
10 袁兵;谭燕;王盛兰;赵珊;王廷华;张云辉;;云南宣威肺腺癌原代细胞和肺腺癌细胞株XWLC-05体外形态学比较[J];昆明医学院学报;2011年08期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张卫兵;兔骨髓间充质干细胞联合自体富血小板血浆在周围神经再生中的作用[D];华中科技大学;2006年
2 王嫣;海藻酸钠凝胶上构建血管化组织工程骨的基础研究[D];重庆医科大学;2007年
3 张翊华;人胎儿骨髓间充质干细胞与小鼠糖尿病治疗[D];西北农林科技大学;2007年
4 王晗;人源羊水干细胞分离培养、生物学特性检测及诱导分化研究[D];西北农林科技大学;2008年
5 舒钧;软骨细胞、骨髓基质干细胞复合“双相”骨基质明胶修复兔关节软骨缺损的对比性研究[D];昆明医学院;2008年
6 李莉;间充质干细胞特化心肌细胞的组蛋白乙酰化修饰调控机制[D];重庆医科大学;2008年
7 冯川;SAHA促进间充质干细胞向心肌细胞分化及其作用机制探讨[D];重庆医科大学;2009年
8 杨辉;地黄多糖对MSCs向神经细胞分化过程中脑区相关基因和BMP4的影响[D];湖南中医药大学;2007年
9 孙敬和;心肌样微环境下黄芪甲苷联合5-氮胞苷诱导MSCs分化为心肌样细胞[D];广州中医药大学;2012年
10 谭艳;HGF及EGF体外诱导VEGF_(165)基因修饰BMSCs向肝细胞分化的研究[D];中南大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李朝中;不同途径移植骨髓间充质干细胞至心肌梗死大鼠的实验研究[D];昆明医学院;2011年
2 韦皓;BMP10和BMP13在C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化过程中的作用[D];重庆医科大学;2011年
3 董松波;5-氮胞苷体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究[D];郑州大学;2011年
4 凌占业;人与猕猴不同组织多能性干细胞相关基因和标志抗原的表达分析[D];四川农业大学;2011年
5 张晓芳;大鼠骨髓间充质干细胞同种异体移植治疗急性心肌梗死[D];山东大学;2005年
6 苑媛;体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究[D];第四军医大学;2006年
7 王文磊;1.小型猪骨髓间充质干细胞经心导管冠状动脉移植及其迁移和分化的实验研究 2.骨髓间充质干细胞多向分化潜能的实验研究[D];重庆医科大学;2006年
8 袁晓峰;同种异体MSC_s源性软骨细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究[D];昆明医学院;2007年
9 李润琴;人骨髓间充质干细胞体外定向诱导分化为心肌样细胞[D];石河子大学;2007年
10 王永;自体骨髓间充质干细胞心肌内移植对犬急性心肌梗死后血管密度及胶原含量影响的实验研究[D];安徽医科大学;2008年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 艾国平,粟永萍,闫国和,冉新泽,刘晓宏,罗成基,程天民;骨髓间充质干细胞的分离与培养[J];第三军医大学学报;2001年05期
2 张蕾;心肌肌联蛋白的结构及其生物学意义[J];国外医学(儿科学分册);2003年01期
3 吕铁伟,田杰,朱静,邓兵,江德勤,陈沅,钱永如;骨髓间充质干细胞体内诱导分化为心肌细胞[J];细胞生物学杂志;2004年02期
4 吕铁伟,田杰,朱静,钱永如;骨髓间充质干细胞体内诱导分化为心肌细胞的初步实验观察[J];重庆医科大学学报;2003年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈伟;王丽娜;姜艳芳;王金成;段德生;;5-氮杂胞苷对骨髓间充质干细胞向肌细胞增殖及分化的影响[J];吉林大学学报(医学版);2006年01期
2 李莉;张发宝;高平进;杨黄恬;朱鼎良;;大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞诱导分化的体外条件研究[J];中国分子心脏病学杂志;2006年03期
3 王新生;崔慧先;马海东;孙黎;薄爱华;;黄芪诱导骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化[J];解剖学杂志;2007年05期
4 蔡磊;刘桂香;刘光萍;李雅娜;钱知勉;冯国营;;缺血再灌注大鼠脑匀浆上清对干细胞的诱导[J];四川解剖学杂志;2009年01期
5 张同方;万圣云;徐周纬;丁洋;;骨髓间充质干细胞在血管外科领域中的研究进展[J];中国普通外科杂志;2010年06期
6 张瑞;顾岩;郭善禹;;体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究[J];外科理论与实践;2007年02期
7 于丽;孙吉平;陈燕春;岳炳德;管英俊;;胰腺十二指肠同源框1基因在大鼠骨髓间充质干细胞向胰岛素分泌细胞定向分化过程中的作用[J];解剖学杂志;2007年03期
8 黄文燕;何俊峰;龙大宏;;神经生长因子转染骨髓间充质干细胞诱导分化成神经样细胞[J];解剖学研究;2007年03期
9 王梦洪;文渊;谢安;汪泱;张智亮;黄俊;;不同诱导条件对体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年42期
10 许刚;徐如祥;姜晓丹;周德祥;姚鹏飞;秦昆;蔡颖谦;邹雨汐;秦玲莎;唐艳萍;;绿色荧光蛋白基因腺病毒载体转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究[J];广东医学;2008年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王海萍;张雷;;催产素体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞[A];第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议论文集[C];2008年
2 曾俊义;汪泱;魏云峰;谢安;娄远蕾;张梅;;人类心肌匀浆上清液对骨髓间充质干细胞诱导分化的影响及相关基因的时序表达[A];第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛论文汇编[C];2008年
3 方艳芬;林美花;周星露;朱琼文;杨波;何俏军;;泛素-蛋白酶体系统参与的周期调节在全反式维甲酸(ATRA)诱导的白血病细胞分化过程中的作用研究[A];2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2009年
4 何国雄;李飞;李海标;梁志忠;潘志信;利玉欢;黄锦桃;;移植成人骨髓间质干细胞在脑梗死模型鼠的分化及功能恢复研究[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年
5 高毅;慕宁;唐力军;;体外诱导人骨髓多能成体祖细胞向肝样细胞分化的实验研究[A];肝脏病防治学术研讨会及新进展学习班专刊[C];2005年
6 李春蕊;刘文励;孙汉英;周剑锋;孟凡凯;;ERK信号传导途径在丁酸钠诱导SKM-1细胞分化中的作用研究[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年
7 余细勇;李晓红;;骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的分子调节机制研究[A];第九届全国心血管药理学术会议论文集[C];2007年
8 李东;欧阳建;李翠萍;陈军浩;;消癌平注射液对白血病细胞NB4作用的初步研究[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
9 贺新强;崔克明;;植物次生木质部细胞分化过程中的细胞编程死亡和次生壁构建[A];中国植物学会植物结构与生殖生物学专业委员会、江苏省植物学会2007年学术年会学术报告及研究论文集[C];2007年
10 毕黎琦;刘波;马翠丽;郭嘉隆;;BXSB狼疮鼠胸腺及T细胞分化异常在发病中的作用及其免疫调节研究[A];第十二届全国风湿病学学术会议论文集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 施嘉奇 通讯员 王姿英;探索中药对干细胞分化的作用[N];文汇报;2009年
2 王姿英;中英合作中药调控干细胞分化研究启动[N];中国医药报;2009年
3 陈超;科学家发现引发细胞分化的分子通道[N];科技日报;2010年
4 赵炜;骨髓间充质干细胞可减轻排异反应[N];健康报;2004年
5 记者 毛黎 冯卫东;美开发出使干细胞分化成肌肉的基因开关[N];科技日报;2009年
6 张佳星;分化之路 殊途同归[N];科技日报;2008年
7 岳阳;我国学者初建HIF-1α介导白血病细胞分化新理论[N];中国医药报;2006年
8 张佳星;干细胞分化路径存在差异性[N];中国矿业报;2008年
9 刘霞;诱导多功能干细胞“不忘”原初组织[N];科技日报;2010年
10 本报记者 刘垠;中国干细胞研究应向大动物实验平台挺进[N];大众科技报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王楠;磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C调节成体干细胞分化和凋亡的研究[D];山东大学;2007年
2 周一鸣;干细胞分化及其对急性肝衰竭大鼠治疗的实验研究[D];第三军医大学;2005年
3 张翊华;人胎儿骨髓间充质干细胞与小鼠糖尿病治疗[D];西北农林科技大学;2007年
4 李卓;同种异体骨髓间充质干细胞联合生长因子移植治疗心肌梗死的实验研究[D];中国医科大学;2008年
5 杨印祥;NRSF参与间充质干细胞向神经元及胰岛细胞分化的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
6 邢小丽;大鼠视网膜匀浆上清液体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞实验研究[D];天津医科大学;2008年
7 梁峰;组织工程肝单元构建的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
8 安刚;体外诱导人骨髓间充质干细胞向类视网膜色素上皮细胞分化的研究[D];中国医科大学;2007年
9 杨海云;脊髓骨髓间充质干细胞促进损伤脊髓修复和神经干细胞的分化[D];吉林大学;2009年
10 王新生;黄芪诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化及机制研究[D];河北医科大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 赵莉莉;曲古抑菌素A促骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的筛选与验证实验[D];重庆医科大学;2009年
2 汪蕾;“心肌样”环境诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究[D];武汉大学;2005年
3 李玲巧;细胞培养芯片的研制及芯片内骨髓间充质干细胞分化控制的前期研究[D];厦门大学;2009年
4 徐路尧;Rac1与骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化过程关系的研究[D];苏州大学;2008年
5 谢甲琦;剪应力诱导骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化的研究[D];第四军医大学;2009年
6 周俊松;骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化过程的可塑性研究[D];苏州大学;2008年
7 毛路;大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞诱导分化的研究[D];苏州大学;2008年
8 丁洋;大鼠骨髓间充质干细胞来源的血管内皮细胞贴附ePTFE的实验研究[D];安徽医科大学;2008年
9 陈雪;低密度脂蛋白诱导骨髓间充质干细胞向平滑肌样细胞分化的作用研究[D];华中科技大学;2008年
10 林晓斌;鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化肝干细胞的研究[D];汕头大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026