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吴茱萸碱抑制人结肠癌lovo细胞生长的实验研究

张醇  
【摘要】: 目的:探讨吴茱萸碱(evodiamine,evo)在体内体外对人结肠癌lovo细胞生长的影响以及可能的机制。 方法:MTT法检测吴茱萸碱对人结肠癌lovo细胞增殖的影响;流式细胞术分析细胞周期和凋亡的变化;western blot检测凋亡相关蛋白( procaspase-8,-9,-3 , Bcl-2,Bax )及周期相关蛋白( CyclinA, CDK2,CyclinB1,CDK1,cdc25c)的表达;caspase活性检测试剂盒检测caspase-8,-9,-3活性变化;激光共聚焦观察AIF, endoG的核异位现象;建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型并用吴茱萸碱,5-氟尿嘧啶(5-Fu),DMSO治疗,观察荷瘤鼠瘤体生长及体重情况;TUNEL检测肿瘤组织凋亡情况;western blot检测肿瘤组织procaspase-8,-9,-3蛋白的表达情况。 结果:吴茱萸碱可抑制人结肠癌lovo细胞的生长,引起lovo细胞周期停滞在S期并且细胞凋亡增加,procaspase-8,-9,-3蛋白表达以及Bcl-2/Bax蛋白表达比例下调且caspase-8,-9,-3活性均增高;激光共聚焦未观察到AIF, endo G的核异位现象;western blot检测到吴茱萸碱能使周期蛋白CyclinA, CDK2,cdc25c表达降低,而CyclinB1,CDK1表达在早期升高,晚期降低。体内试验中,吴茱萸碱能抑制人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长;TUNEL检测法观察到吴茱萸碱治疗后的肿瘤组织中TUNEL阳性细胞数增加;且肿瘤组织中procaspase-8,-9,-3蛋白表达降低。 结论:吴茱萸碱能通过激活caspase-8,-9,-3,降低Bcl-2/Bax蛋白表达比例从而诱导凋亡,通过下调CyclinA, CDK2,cdc25c的蛋白表达阻滞人结肠癌lovo细胞于S期,抑制细胞在体内体外的生长。


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