重楼提取物对SW480细胞的毒性作用及作用机制研究

【摘要】： 目的:以重楼提取液为作用因素,通过测定人结肠癌SW480细胞的抑制率,观察其形态学变化,分析人结肠癌细胞周期改变,研究重楼对人结肠癌SW480细胞增殖的影响;并在基因和蛋白质水平检测干细胞因子(Stem Cell Factor,SCF)在重楼作用后细胞内的表达差异,探讨SCF与人结肠癌治疗及发生发展的关系。 方法:采用10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL的重楼提取液分别与体外培养的SW480细胞作用12、24、36、48 h,用MTT方法检测对肿瘤细胞的抑制率。并以IC50作为实验用药物浓度,取对数生长期的SW480细胞,与重楼提取液作用24 h后,通过流式细胞术分析其对SW480细胞周期的影响。并通过RT-PCR和Western- Blotting方法测定SW480细胞干细胞因子的mRNA和蛋白质表达变化,探讨药物抑制作用与细胞内SCF含量之间的关系。 结果:各浓度重楼提取液均对SW480细胞有抑制作用,并存在明显的剂量-效应、时间-效应关系。重楼提取液作用后的细胞出现明显变性坏死的形态改变。流式细胞法分析细胞周期变化的结果显示:经重楼提取液处理后,SW480细胞在S期的分布比例下降,G0/G1期和G2/M期细胞分布增多(P0.05);同时干细胞因子表达增高,差异有统计学意义(P0.05)。 结论:重楼提取液对SW480细胞具有明显细胞毒性及抑制细胞增殖的作用,且这种作用有明显的剂量-效应、时间-效应关系。重楼提取液可使SW480细胞在S期的分布比例下降,G0/G1期和G2/M期分布增多,推测重楼可能通过抑制肿瘤细胞的蛋白质和DNA合成,抑制肿瘤细胞的有丝分裂,达到抑制肿瘤细胞增殖的目的。实验组SCF的mRNA及蛋白质的表达量均上调,提示重楼提取液可使SW480细胞内SCF表达量反应性增加,以对抗肿瘤细胞的损伤,而不是通过抑制SCF的表达起到抑制肿瘤细胞增殖的作用。