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《泸州医学院》 2009年
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大剂量甲基强的松龙联合胶质细胞源神经生长因子治疗急性脊髓损伤对细胞凋亡的影响

樊元胜  
【摘要】: 目的:观察早期大剂量甲基强的松龙(MP)和胶质细胞源神经生长因子(GDNF)联合对大鼠急性脊髓损伤(SCI)后的治疗作用,通过对损伤区细胞凋亡及细胞内活性氧水平测定比较,探讨治疗脊髓损伤的机理及有效治疗方案。方法:将大鼠按照改良Allen's法建立脊髓急性损伤模型,分为单纯脊髓损伤组(A组),大剂量甲基强的松龙治疗组(B组),胶质细胞源神经生长因子组(C组),甲基强的松龙(MP)和胶质细胞源神经生长因子(GDNF)组(D组),损伤经治疗后1、4、7、14、21天处死每组中相应批次动物,心脏灌注后及固定后,取出损伤节段区脊髓组织,酒精梯度脱水后行石蜡包埋切片,切片采用TUNEL试剂盒进行细胞凋亡的检测(免疫组化法)以及用2',7'-二氯荧光素二脂(DCFH-DA)探针行活性氧表达的测定(流式细胞仪),采用统计学软件SPSS11.5对所得数据进行t检验分析。结果:①凋亡指数(凋亡指数(AI)=凋亡细胞核数/总细胞核数)在脊髓损伤后开始增高,至伤后第7天达最高,A组:43.89%,B组:32.65%,C组:34.16%,D组:30.00%(A>C>B>D,P<0.0001),至伤后14天仍维持在较高水平,14天之后便开始下降,至第21天仍维持在较高水平,A组:14.45%,B组:12.39%,C组:13.98%,D组:8.7%(A>C>B>D,P<0.0001),差异有统计学意义。②运动神经功能评分:采用斜板实验,对脊髓损伤后的运动神经功能评估,A组在受伤后运动神经功能恢复较差,第7天时评分为:2.25,21天时为:4.75,D组则恢复较好,第7天时为:5.50,21天时为:6.51,B、C组介于A、D组之间,结果:A<C<B<D组,P<0.017,差异有统计学意义。③取损伤区脊髓组织,制成细胞悬液,标本上流式细胞仪行活性氧表达的测定,检测结果:D组<B组<C组<A组。D组细胞内活性氧水平最低,A组最高。结论早期大剂量MP联合GDNF治疗脊髓损伤,对损伤后脊髓结构和功能恢复有明显的促进作用,是治疗急性脊髓损伤的有效的治疗方案。
【学位授予单位】:泸州医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R651.2

【参考文献】
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