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SPECT-MRI双模式影像探针~(99m)Tc-Gd-DTPA-DG的制备及其实验研究

张伟  
【摘要】: 目的:①合成一种顺磁性脱氧葡萄糖类MRI对比剂二乙三胺五乙酸-脱氧葡萄糖钆盐(Gd-DTPA-DG),体外分析其弛豫时间,并探讨其在荷瘤裸鼠体内肿瘤信号改变的规律。②99mTc标记Gd-DTPA-DG,使其成为一种SPECT-MRI双模式影像探针,观察其稳定性,肿瘤细胞摄取情况及在荷瘤裸鼠体内的生物分布。方法:所涉及动物实验均符合相关法规伦理。①首先合成DTPA-DG,再与Gd2O3螯合,制得Gd-DTPA-DG。体外分析其弛豫时间。②建立荷瘤裸鼠体内实验模型,将裸鼠随机分成实验组与对照组(n=10),前者尾静脉注射Gd-DTPA-DG,后者尾静脉注射含相同Gd3+(浓度0.2mmol/kg)的马根维显(Gd-DTPA),采用GE1.5TMR2D反转恢复FSE T1WI序列(TR/TE=400ms/14.9 ms),踝关节线圈测量平扫及引入对比剂后15min、30min、60min、90min、120min瘤体信号强度。③对Gd-DTPA-DG进行99mTc标记需要的Gd-DTPA-DG、SnCl2·2H2O、pH、温度采用正交实验设计。采用薄层纸层析法(TLC)分析标记率,观察标记物的稳定性。④把标记的99mTc-Gd-DTPA-DG同99mTc-DTPA. 99mTc-DTPA-DG设立0.37MBq/L、3.7MBq/L、37MBq/L 3种放射性活度进行对照实验,各100μl加入宫颈癌Hela细胞中培养,2h后消化收集细胞,用γ计数法测量细胞的摄取情况。⑤将100μl的99mTc-Gd-DTPA-DG (37MBq/L)加入宫颈癌Hela细胞中孵育2h后放入电镜内观察药物在细胞中的分布情况。⑥将标记的99mTc-Gd-DTPA-DG注入裸鼠体内,注射药物后10min、30min、1h、2h、4h、24h测定血液、心脏、脑、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、肌肉、肿瘤中的每克组织百分注射剂量率(%ID/g)。⑦SPECT仪观察标记药物在裸鼠体内的分布。结果:所有结果均经过SPSS17.0统计。①所合成的Gd-DTPA-DG可提高肿瘤组织的对比度,与常规顺磁性对比剂Gd-DTPA相比具有相似的弛豫性能。②注射对比剂后15min左右肿瘤强化与平扫相比最明显(P0.001)。肿瘤强化方式表现为自肿瘤周边向肿瘤内部扩散,强化呈不均匀性。③99mTc-Gd-DTPA-DG放化纯度可达98.5%,体外放置6小时,放化纯度仍96%。④宫颈癌Hela细胞对99mTc-Gd-DTPA-DG的摄取率与99mTc-DTPA-DG在3.7MBq/L时差别没有统计学意义99mTc-Gd-DTPA-DG各活度间的细胞摄取率均明显高于对照组99mTc-DTPA,差异存在显著性意义(P0.001)。⑤电镜下可见药物99mTc-Gd-DTPA-DG明显分布于胞浆与胞核中。⑥2h后肿瘤组织对99mTc-Gd-DTPA-DG的摄取率约为1.48±0.12%ID/g,肿瘤与肌肉的放射性摄取比(T/NT)达2.91。⑦2h时肿瘤组织在SPECT仪上显影清晰。结论:采用放射性核素99mTc标记顺磁性对比剂Gd-DTPA-DG是可行的;通过体外细胞摄取及体内荷瘤裸鼠模型均证实其具有良好的肿瘤靶向性,是一种极具发展潜力的新型SPECT-MRI双模式影像探针。


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