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《成都中医药大学》 2010年
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通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠的卵巢局部因子、激素水平的调控研究

方云芸  
【摘要】：目的：探讨通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠促排卵的作用机制,以阐明中医补肾方药治疗肾虚排卵障碍型不孕症的有效性。 方法：建立肾虚排卵障碍型不孕大鼠模型,随机分七组,为模型组、通脉大生片高剂量组、通脉大生片中剂量组、通脉大生片低剂量组、氯米芬组、右归丸组、正常组。从第70日龄,大鼠阴道开门,连续阴道涂片两个性周期(一个性周期为4-5天),若阴道上皮无周期性变化,呈持续性角化,提示造模成功,余剔除。于大鼠第80日龄起,连续灌胃5周后股动脉取血并处死动物,迅速剥离大鼠卵巢、子宫组织。血液离心后取上清液,放入-20℃冰箱内保存,以备后期检测。大鼠阴道脱落细胞检测采用巴氏染色法,子宫、卵巢甲醛固定后、脱水包埋,HE染色,光镜下观察子宫、卵巢组织形态学,应用免疫组织化学技术SP法检测大鼠卵巢局部IGF-1R的表达。应用ELISA法检测大鼠血清内FSH、LH、IGF-1含量,应用RI法检测E2、T的含量,所有数据的统计分析均在SPSS13.0软件的支持下完成。 结果：通脉大生片组与模型组比较,大鼠出现较规律的动情周期；子宫、卵巢组织形态学表明,通脉大生片组大鼠子宫内膜比模型组增厚,腺体数目增多(P0.01),子宫内膜由增生期向分泌期转化；通脉大生片组卵巢内病理性囊性卵泡比模型组明显减少,有少量成熟卵泡和黄体生成；通脉大生片组大鼠血清中FSH、LH水平高于模型组(P0.05),通脉大生片组血清中T水平低于模型组(P0.05)；与模型组比较,通脉大生片具有升高血清中E2水平趋势,但差异无显著性(P0.05)；通脉大生片组血清中IGF-1水平和卵巢局部IGF-1R的表达低于模型组(P0.05),差异具有统计学意义。 结论：1.肌注丙酸睾丸酮的雌性大鼠生殖功能下降,表现为阴道脱落细胞持续性角化,子宫内膜呈增生期,出现病理性囊性卵泡,无成熟卵泡和黄体生成,造模后血清中E2、FSH、LH水平低下,T升高,血清中IGF-1水平异常升高和卵巢局部IGF-1R表达异常增强。 2.通脉大生片可以改善肾虚排卵障碍型不孕大鼠的子宫和卵巢病理形态学和纠正体内性激素水平紊乱。通脉大生片可以增加子宫内膜腺体数,增加子宫内膜厚度,促进子宫内膜从增生期转化为分泌期；通脉大生片可以降低病理性囊性卵泡数,,有成熟卵泡生成和少量黄体生成,促进卵泡的发育成熟及排出；通脉大生片能够提高血清中FSH、LH水平,具有提高血清中E2水平的趋势,降低血清中T的含量,改善垂体和卵巢的内分泌功能。 3.通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠的卵巢局部因子IGF-1/IGF-1R的调控有一定影响。通脉大生片可以降低血清中过高的IGF-1水平,降低卵巢局部表达过高的IGF-1R。 4.提示补肾中药对肾虚排卵障碍型不孕症的治疗作用,可以通过调控性激素和卵巢局部因子来实现。
【关键词】：通脉大生片 肾虚 排卵障碍 卵巢局部因子 激素水平
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R285.5
【目录】：
  • 目录3-5
  • 缩略词中英文对照表5-6
  • 中文摘要6-8
  • Abstract8-10
  • 引言10-12
  • 1.材料与方法12-18
  • 1.1 实验材料12-13
  • 1.1.1 实验动物12
  • 1.1.2 实验条件12
  • 1.1.3 实验药物12
  • 1.1.4 实验试剂12
  • 1.1.5 实验仪器12-13
  • 1.2 实验方法13-18
  • 1.2.1 分组方法13
  • 1.2.2 模型构建方法13
  • 1.2.3 干预方法13-14
  • 1.2.4 指标检测方法14-17
  • 1.2.5 统计分析方法17-18
  • 2 实验结果18-26
  • 2.1 各组大鼠一般情况18
  • 2.2 各组大鼠动情周期的比较18
  • 2.3 各组大鼠子宫、卵巢病理形态学比较18-21
  • 2.3.1 各组大鼠子宫、卵巢外观的比较18-19
  • 2.3.2 各组大鼠子宫显微镜下形态学比较19
  • 2.3.3 各组大鼠卵巢显微镜下形态学比较19-21
  • 2.4 各组大鼠性激素水平21-23
  • 2.5 各组大鼠IGF-1、IGF-1R水平23-26
  • 3 讨论26-40
  • 3.1 中医对排卵障碍的病因病机认识26
  • 3.2 探讨中医肾与生殖的关系26-29
  • 3.2.1 肾藏精,主生殖27
  • 3.2.2 肾为天癸之源27-28
  • 3.2.3 肾为冲任之本28-29
  • 3.2.4 肾为月经之本29
  • 3.3 肾虚ASR模型的建立29-32
  • 3.3.1 肾虚ASR模型的构建方法29-30
  • 3.3.2 肾虚ASR模型构建成功的判断方法30-32
  • 3.4 通脉大生片的临床实验基础32-33
  • 3.4.1 通脉大生片的方解32-33
  • 3.4.2 通脉大生片的临床基础33
  • 3.4.3 通脉大生片的实验基础33
  • 3.5 通脉大生片对肾虚ASR的作用机理研究33-40
  • 3.5.1 通脉大生片对肾虚ASR卵巢子宫形态学的影响33-35
  • 3.5.2 通脉大生片对肾虚ASR性激素的影响35-37
  • 3.5.3 通脉大生片对肾虚ASR IGF-1、IGF-1R的影响37-40
  • 4 结论40-41
  • 5 问题与展望41-42
  • 致谢42-43
  • 参考文献43-48
  • 附录48-51
  • 综述51-63
  • 参考文献59-63
  • 后置部分63-64

【参考文献】
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