收藏本站
《成都中医药大学》 2016年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

乌头霜霉病病原物鉴定及传播机制初步研究

欧洪  
【摘要】:乌头(Aconitum carmichaeli Debx.)为著名川产道地药材附子、川乌的原植物,在四川江油地区有悠久的种植历史。在乌头的种植过程中,极易发生各种病害,导致药材减产,影响了附子、川乌产业链的发展。乌头霜霉病是乌头种植过程中极易发生的一种叶类真菌病害,具有发病率高、传染性强、危害性大的特点,严重危害了乌头的健康。本实验动态跟踪研究了种苗繁殖地和药材栽培地乌头不同生长阶段感染霜霉病的病害症状表现,并对四川江油地区乌头种植地乌头霜霉病进行田间实地调查,对该地区的霜霉病发病率、病情指数进行了研究。根据病原菌形态学特征以及rDNA-ITS区序列两个方面对病原菌进行了鉴定,明确了病原菌的分类地位。同时初步研究了乌头霜霉病的传播机制,并建立了快速分子检测病原菌的方法。主要研究结果如下:1.调查了乌头霜霉病发病情况:根据对四川江油市太平镇乌头霜霉病的实地调查,统计了该地区霜霉病的发病率和病情指数。跟踪研究了种苗繁殖地和药材栽培地乌头不同生长阶段感染霜霉病的病害症状表现。乌头霜霉病主要危害乌头的叶片,在乌头不同的生长时期病害症状表现不同。乌头幼苗时期,叶片变灰绿色,开始卷曲;乌头成株时期,叶片变枯萎并向内卷曲;附子采收阶段,叶片染病变脆变黄,严重时导致植株死亡。结合该地区当年的天气情况以及发病率和病情指数进行分析,结果显示当年的雨水及气温与霜霉病的发病情况有一定的相关性。2.鉴定了乌头霜霉病病原菌种类:通过对乌头霜霉病叶上病原菌菌落挑取镜检,根据病原菌的孢子囊、孢囊梗、卵孢子形态确定该病原菌为乌头霜霉(Peronospora aconiti Yu)。采用OMEGA试剂盒提取病原菌DNA,并进行电泳检测其浓度和质量。采用真菌通用引物ITS1/ITS4和NL1/NL4引物对病原菌rDNA-ITS区域和28S D1/D2区域进行PCR扩增,测得序列长度为分别为892bp和741bp。提交序列至NCBI数据库获得登录号分别为KU161589和KU161590。邻接法(Neighbor-joining tree, NJ Tree)将序列分别构建系统发育树,结果表明,SM11样品均与霜霉属(Peronospora.)聚成一支。3.初步建立了乌头霜霉病快速检测方法:根据病原菌rDNA-ITS序列,设计出一对特异性扩增引物SMF1/SMR1.该引物能够从霜霉病原菌DNA中扩增出一条640bp的片段。通过特异性试验研究,结果显示,该引物能扩增出病原菌丝DNA而不能扩增出其他病原菌和乌头叶片,具有较强的特异性。引物灵敏度实验结果表明该引物最低能从4.38×10-4 ng/μL浓度的病原菌DNA中扩增出目的片段。初步建立的乌头霜霉病快速检测方法,为乌头霜霉病的实际检疫提供了基础。4.初步研究了乌头霜霉病发病机制:对江油地区引种的乌头和高海拔地区栽培的种苗进行石蜡切片,结果在部分乌头种苗内观察到了乌头霜霉卵孢子,证明乌头霜霉病发病与种苗是否带菌有关,其传播有可能是乌头霜霉卵孢子在种苗内越冬,等到春天天气转暖后,再萌发侵染乌头。对乌头霜霉病病叶进行超微结构观察,发现病原菌通过萌发出来的芽管从叶片气孔或者伤口侵入叶片。病原菌侵入叶片后,在细胞间产生吸器从寄主吸取营养,萌发孢囊梗,再产生孢子囊,循环侵染乌头植株。明确霜霉病的传播机制,能够从源头上对乌头霜霉病进行防治,具有重大的实际意义。
【学位授予单位】:成都中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S435.672

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡延玉;伍光庆;;乌头的组织培养与再生植株[J];植物生理学通讯;1985年05期
2 高文韬;王壮;王新波;王旭东;张杨;;乌头的研究进展[J];北华大学学报(自然科学版);2009年02期
3 张志远;中药乌头中乌头碱含量测定[J];郑州牧业工程高等专科学校学报;1996年02期
4 杨宇;刘吉平;王明安;;贵州乌头杀虫生物碱的研究[J];农药学学报;2010年04期
5 汤建才;陈建业;;土壤理化性质与乌头植物有效成分的相关性研究[J];西南师范大学学报(自然科学版);2011年01期
6 肖小河;陈士林;尹国萍;陈善墉;;乌头品质生态学研究(第1报)[J];中药材;1990年11期
7 符华林;樊琴;;川西北高原露蕊乌头的乌头碱分离及定量测定技术[J];江苏农业科学;2007年03期
8 劉国鈞,张榮生;新疆的烏头[J];新疆农业科学;1964年07期
9 林静,何毅;乌头组培快繁的技术探讨[J];贵州科学;1998年02期
10 张荣祥;赵德刚;;黔产乌头挥发性化学成分的GC-MS分析[J];贵州农业科学;2011年12期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李文军;陶长戈;彭成;;乌头碱在大鼠体内的药代动力学研究[A];'2008临床中药学学术研讨会论文集[C];2008年
2 邱俏檬;卢中秋;俞继芳;金小慧;;乌头碱急性中毒的临床特点及救治[A];2007年浙江省急诊医学学术年会论文汇编[C];2007年
3 王朝虹;文蛟;何毅;;液相色谱-质谱联用测定乌头碱血药浓度及其药代动力学参数的方法学研究[A];2004年全国有机质谱学术交流会论文集[C];2004年
4 邱俏檬;卢中秋;俞继芳;金小慧;;乌头碱急性中毒的临床特点及救治[A];第十二届全国复苏与中毒学术会议论文汇编[C];2007年
5 邱俏檬;卢中秋;俞继芳;金小慧;;乌头碱急性中毒的临床特点及救治[A];浙江省中西医结合学会急救医学专业委员会第三次学术年会暨省级继续教育学习班论文汇编[C];2007年
6 刘影;单宏丽;孙宏丽;周宇宏;董德利;杨宝峰;;乌头碱对大鼠心室肌细胞胞浆钙及L-型钙电流的影响[A];中国病理生理学会动脉粥样硬化专业委员会五届一次会议论文集[C];2002年
7 陈信义;王笑民;侯丽;刘雪强;;乌头碱抗耐药性人口腔鳞状上皮癌细胞耐药机制的初步研究[A];第十届全国中西医结合肿瘤学术大会论文汇编[C];2006年
8 姜贵全;高文韬;庞久寅;;HPLC法测定吉林地区三种乌头双酯型生物碱含量[A];第二届中国林业学术大会——S11 木材及生物质资源高效增值利用与木材安全论文集[C];2009年
9 徐高杰;付敏;刘文涛;王钊;;乌头碱的心肌毒性效应研究[A];第六届海峡两岸心血管科学研讨会论文摘要集[C];2007年
10 杨仓良;;乌头类有毒中药在风湿病中的应用[A];全国第十一届中西医结合风湿病学术会议论文汇编[C];2013年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 叶乃卫;乌头:既祛风湿也易中毒[N];医药经济报;2003年
2 陈春明;乌头类药物中毒6因[N];中国中医药报;2006年
3 胡献国;《满城尽带黄金甲》与乌头[N];大众科技报;2007年
4 陈春明;乌头类药物中毒6因[N];中国中医药报;2008年
5 吴新荣 王顺年;药物中毒救治要点[N];农村医药报(汉);2006年
6 邢跃文;川乌炮制和毒性的关系[N];农村医药报(汉);2005年
7 张存龙;附子临床应用八项注意[N];中国中医药报;2006年
8 陈文贵;中草药中毒会有哪些表现?[N];大众卫生报;2005年
9 衣晓峰 于文艺 李建辉;自制药酒饮用 不幸断送生命[N];健康报;2004年
10 张志;中草药没毒 多服没问题[N];农村医药报(汉);2006年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 刘雪强;乌头碱逆转耐药性人口腔上皮鳞状癌细胞分子机制研究[D];北京中医药大学;2005年
2 尹永强;牛磺酸镁抗乌头碱、哇巴因诱发心肌细胞心律失常的电生理学研究[D];天津医科大学;2012年
3 王岚;附子大黄不同配伍层次对阳虚便秘的治疗作用及其机制研究[D];成都中医药大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 余丞浩;双酯型乌头碱致心肌细胞自发性钙释放机制研究[D];中国中医科学院;2015年
2 欧洪;乌头霜霉病病原物鉴定及传播机制初步研究[D];成都中医药大学;2016年
3 王红;鞣酸刺乌头碱的制备、表征及应用[D];内蒙古农业大学;2015年
4 刘敏;乌头炮制标准的建立及其炮制工艺的初步研究[D];第二军医大学;2006年
5 胡海燕;附子大黄成分配伍对结肠ICC的作用机制研究[D];成都中医药大学;2013年
6 杨凯;产乌头碱内生真菌的分离、鉴定及固体培养基的优化[D];西北农林科技大学;2013年
7 汪玲芳;牛磺酸镁抗乌头碱诱发心肌细胞心律失常的电生理学研究[D];天津医科大学;2010年
8 欧丽娜;藏药榜那质量标准研究[D];成都中医药大学;2014年
9 乔艳玲;两种常用中草药多成分快速分析方法的研究[D];中国协和医科大学;2009年
10 吴平;附子生物碱提取分离与水解规律研究[D];成都中医药大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026