收藏本站
《成都中医药大学》 2016年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

藏药白花龙胆主流品种的亲缘关系、遗传多样性及药效学研究

张彩虹  
【摘要】:白花龙胆为大宗常用藏药,具有“解毒、利咽”的功效,是三味龙胆花丸等经典藏成药的重要原料。该药来源复杂,其主流品种有大花龙胆Gentiana szecheyii Kanitz、高山龙胆 G.algida Pall.、岷县龙胆 G.purdomii Marq.。其中大花龙胆为一级濒危藏药,资源可持续利用前景不容乐观,且化学成分与高山龙胆、岷县龙胆有明显的区别,缺失龙胆苦苷、獐牙菜苷等环烯醚萜类代表成分,药效物质基础不明;高山龙胆、岷县龙胆植物形态相似,品种间存在过渡类型,分类混乱。针对上述问题,本文应用ISSR分子标记技术及基于ITS2序列探索高山龙胆与岷县龙胆的亲缘关系并检测大花龙胆的遗传多样性,同时采用急性咽炎动物模型对大花龙胆进行不同极性部位的药效学研究。实验结果如下:(1)利用12条ISSR引物对高山龙胆2个居群、岷县龙胆3个居群,共72份样品进行PCR扩增,共得到161个扩增位点,多态位点百分率达92.54%。Nei基因多样性指数H在0.1818~0.1976之间,Shannon信息指数I在0.2634~0.2847之间。遗传分化系数Gst为0.4193,基因流Nm为0.6926,表明高山龙胆、岷县龙胆居群间遗传变异多,遗传多样性丰富,居群间基因交流匮乏,造成居群间遗传分化大。(2)高山龙胆与岷县龙胆的ISSR聚类图显示,当遗传相似系数为63%时,五个居群分为三类,其中居群GSW与居群GSY聚为一类,居群MXB与居群MXH聚为一类,居群MXR单独聚为一类。而居群MXR与居群MXH、GSW的遗传距离相同,并且居群GSW与居群MXH的种间遗传距离比高山龙胆种内居群GSW、GSY的遗传距离小,居群MXR与居群GSW的种间遗传距离比岷县龙胆种内居群MXR、MXB的遗传距离小。鉴于此,说明基于“株高、花朵数目、花梗长短”无法将高山龙胆与峨县龙胆明确区分开。若依据《中国高等植物》中“花冠斑点的有无”对高山龙胆与岷县龙胆进行定种,则ISSR聚类结果显示,部分高山龙胆与岷县龙胆聚在一起,同样无法将高山龙胆与岷县龙胆区分开。(3)高山龙胆与岷县龙胆的ITS2序列同源比对结果显示,五个居群72个个体的ITS2序列主要分为两种类型,而每类中均包含高山龙胆与岷县龙胆不同居群中的个体,遗传距离在0.0000~0.9984之间。基于ITS2序列及ISSR分析结果,建议高山龙胆与岷县龙胆两品种合并。(4)利用ISSR分子标记对大花龙胆进行遗传多样性分析。12条ISSR引物对大花龙胆四个居群60份个体进行扩增,多态位点百分率为89.80%,Ne 基因多样性指数H在0.1364~0.2070之间,Shannon信息指数I在0.2140~0.3168之间,遗传分化指数Gst为0.3434,基因流Nm为0.9560。与其他一些濒危植物相比,大花龙胆具有丰富的遗传多样性,遗传多样性主要来源于居群内的变异。说明大花龙胆处于濒危状态的压力不是遗传多样性缺乏造成的,多半来源于人为因素造成的环境压力及自身的生物学特性影响。(5)大花龙胆ITS2序列同源比对结果显示,大花龙胆所有个体的ITS2序列表现为高度一致性,不同居群内的ITS2序列较为稳定,不受环境、地理分布等影响。(6)将白花龙胆主流品种的ITS2序列与从GenBank数据库中调取的白花龙胆易混品种的ITS2序列一起,通过MEGA6.06构建系统发育树。结果显示,系统发育树与传统经典分类中的品种亲缘关系呈现一致性,除高山龙胆、岷县龙胆、高冷龙胆三者无法区分外,通过ITS2序列能将其他品种区分开,ITS2序列可作为大花龙胆的DNA条形码,用于大花龙胆及其混伪品的鉴别。(7)采用25%氨水化学刺激致大鼠急性咽炎模型,观察大花龙胆不同极性部位对模型大鼠组织病理形态学及血清IL-10、TNF-α表达的影响。结果显示,大花龙胆总浸膏、乙酸乙酯、正丁醇部位可快速修复大鼠咽喉部病变组织,与模型对照组相比,具有统计学差异(P0.05);大花龙胆总浸膏及正丁醇部位可明显减低大鼠血清中IL-10、TNF-α的水平,与模型对照组相比,具有显著的统计学差异(P0.01)。综合评价大花龙胆不同极性部位对大鼠咽喉部及炎症因子的影响,本研究认为大花龙胆总浸膏及正丁醇部位治疗急性咽炎效果显著。
【学位授予单位】:成都中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R285.5;S567.239

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 向丽;汤欢;成金乐;陈一龙;邓雯;郑夏生;赖智填;陈士林;;超微破壁饮片DNA条形码基原物种追溯[J];药学学报;2015年12期
2 刘鲁炯;;舒利迭联合十味龙胆花颗粒治疗支气管哮喘慢性持续期随机对照试验[J];中国中医药信息杂志;2015年11期
3 孙阎;李鑫鑫;赵立波;吕军;;高山龙胆种子萌发特性研究[J];中国农学通报;2015年31期
4 王秋霞;孙海;魏云洁;张舒娜;杨振;张亚玉;;龙胆属6种药用植物的ITS2序列分析[J];特产研究;2015年03期
5 宗留留;骆桂法;吴立宏;王峥涛;刘海青;赵丹丹;;藏药白花龙胆质量标准研究[J];中国中药杂志;2015年10期
6 谢艳;蒋路云;刘洋;张勤修;;三味龙胆花片联合雾化吸入治疗急性咽炎94例临床观察[J];中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志;2015年02期
7 吴波;李永波;饶建波;曾金祥;朱继孝;方香香;刘福青;李洪泽;韩风雨;钟国跃;;基于ITS2条形码的桔梗药材遗传多样性研究[J];中国中药杂志;2015年06期
8 张文江;樊长征;高金柱;王冰;郑靖铁;;十味龙胆花胶囊联合西药治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重临床研究[J];中国中医药信息杂志;2015年02期
9 马羚;马逾英;古锐;李振斌;张彩虹;穆向荣;;藏药“榜间嘎保”基原植物花粉粒及种皮微形态的扫描电镜观察[J];中药材;2014年10期
10 李振华;龙平;朱虹;张春红;李旻辉;;基于ITS2序列鉴定6种假龙胆属及3种近缘属植物[J];中国现代中药;2014年09期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 邓雪;王胜;;慢性阻塞性肺疾病急性加重期中医药治疗进展[J];中医药临床杂志;2015年09期
2 张春红;赵志英;哈斯巴特尔;李振华;武毛毛;邹德志;李旻辉;;蒙药——从传统实践到科学发展[J];中国中药杂志;2015年13期
3 朱继孝;曾金祥;张亚梅;钟国跃;刘福青;李洪泽;韩风雨;;不同产地桔梗镇咳祛痰作用比较研究[J];世界科学技术-中医药现代化;2015年05期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 钟世红;古锐;马羚;马逾英;泽翁拥忠;曹赟;张彩虹;;藏药白花龙胆品种考证与使用现状调查[J];中国中药杂志;2014年13期
2 赵莎;庞晓慧;宋经元;陈士林;;应用ITS2条形码鉴定中药材合欢皮、合欢花及其混伪品[J];中国中药杂志;2014年12期
3 杨霄;;中西医治疗急慢性咽喉炎现状[J];河南中医;2014年01期
4 刘炜;葛正行;李波;;慢性阻塞性肺疾病患者中医体质分布特点及其与证候的关系研究[J];中国中药杂志;2013年20期
5 王芳;朱丽;赵明;康建军;邴丹珲;;不同处理对褐鳞苔草种子萌发的影响[J];中国农学通报;2013年22期
6 申波;;布地奈德雾化吸入治疗急性感染性喉炎,喉气管、支气管炎疗效观察[J];中国实用医药;2013年20期
7 李杰;武维屏;罗慧;张立山;冯淬灵;邱泽计;吴珺;张峰;董凤兰;刘福鼎;赵福成;齐莹;薛广伟;;中药化痰法对青霉素在慢性阻塞性肺疾病急性加重期大鼠肺组织中转运能力的影响[J];北京中医药大学学报;2013年06期
8 李树强;何启扬;蔡阳娥;;从炎症细胞因子研究清气化痰汤对慢性阻塞性肺疾病急性加重期的作用机制[J];中国中医药信息杂志;2013年05期
9 罗焜;马培;姚辉;辛天怡;胡燕;郑司浩;黄林芳;刘军;宋经元;;多基原药材秦艽ITS2条形码鉴定研究[J];药学学报;2012年12期
10 辛天怡;姚辉;罗焜;向丽;马晓冲;韩建萍;林余霖;宋经元;陈士林;;羌活药材ITS/ITS2条形码鉴定及其稳定性与准确性研究[J];药学学报;2012年08期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 蒋楠;;作物遗传多样性的保护和持续利用[J];德阳教育学院学报;2003年02期
2 张铧予;;人类遗传多样性探讨[J];科技风;2018年33期
3 ;遗传多样性影响人类思维[J];中国石油企业;2015年08期
4 兰彩妮;;浅谈生物遗传多样性[J];商业故事;2018年05期
5 ;“全国生物遗传多样性高峰论坛”将在昆明召开[J];生物化学与生物物理进展;2012年09期
6 褚嘉祐;李绍武;张亚平;;努力推动中国的遗传多样性研究[J];遗传;2012年11期
7 杨昭庆;禇嘉祐;;中国人类遗传多样性研究进展[J];遗传;2012年11期
8 谭玉莲;刘迎辉;熊丽娜;朱智;徐伟;曾波;;不同海拔高度的野古草的遗传多样性分析[J];西南师范大学学报(自然科学版);2009年02期
9 ;商业养殖减少了鸡的遗传多样性[J];北方牧业;2008年21期
10 梁琛;张建海;;畜禽遗传多样性的保护和分子评估[J];中国家禽;2005年14期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘公社;徐夙侠;刘志鹏;舒庆艳;;羊草种质资源遗传多样性的形态和AFLP分子标记评价[A];中国草学会牧草育种专业委员会2007年学术研讨会论文集[C];2007年
2 ;“全国生物遗传多样性高峰论坛”日程安排[A];全国生物遗传多样性高峰论坛会刊[C];2012年
3 沙伟;林琳;郑云梅;;小仙鹤藓遗传多样性分析[A];中国植物学会七十五周年年会论文摘要汇编(1933-2008)[C];2008年
4 刘延吉;耿书;;辽宁地区5种野生软枣猕猴桃RAPD遗传多样性分析[A];中国园艺学会猕猴桃分会第四届研讨会论文摘要集[C];2010年
5 张子学;杨冬梅;李杰勤;;白头翁RAPD体系的优化及其遗传多样性分析[A];全国作物生物技术与诱变技术学术研讨会论文摘要集[C];2005年
6 芒来;杨虹;;蒙古马遗传多样性研究进展[A];遗传学进步与人口健康高峰论坛论文集[C];2007年
7 顾万春;;森林遗传多样性及其资源的保存和利用[A];面向21世纪的中国林木遗传育种——中国林学会林木遗传育种第四届年会文集[C];1997年
8 毛培胜;王新国;黄莺;;分子标记技术在牧草遗传多样性研究中的应用[A];2009中国草原发展论坛论文集[C];2009年
9 周秋白;郑宇;周莉;桂建芳;;鄱阳湖鲫鱼遗传多样性分析[A];中国鱼类学会2008学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年
10 杨昭庆;褚嘉祐;;中国人类遗传多样性研究进展[A];全国生物遗传多样性高峰论坛会刊[C];2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 张雯雯 通讯员 高洁;少数民族庭院有效保存物种遗传多样性[N];中国科学报;2012年
2 记者 张梦然;两种主要传疟蚊子遗传多样性公布[N];科技日报;2017年
3 记者 胡德荣;亚洲人群遗传多样性研究获最新成果[N];健康报;2009年
4 胡云章;绚丽的民族文化 丰富的遗传多样性[N];大众科技报;2008年
5 本报记者 游雪晴;中国的人类遗传多样性研究成果丰硕[N];科技日报;2001年
6 记者 华凌;遗传多样性影响人类身高和思维[N];科技日报;2015年
7 卞晨光;保护家畜遗传多样性刻不容缓[N];中国畜牧兽医报;2012年
8 通威;加强鳜种改良 提高遗传多样性水平[N];中国渔业报;2015年
9 肖力伟 译;中国栽培的大豆品种 遗传多样性变异丰富[N];农民日报;2011年
10 复旦大学教授 中国科学院院士 金力;流动的基因[N];光明日报;2014年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孔杰;海岛棉遗传多样性及对纤维性状的关联分析与转录组学分析[D];中国农业大学;2018年
2 余惠文;柚遗传多样性及叶片渐绿性状突变研究[D];华中农业大学;2018年
3 白立景;比较基因组学鉴定我国野猪亚种分类及其遗传多样性分析[D];中国农业科学院;2017年
4 夏法刚;薏苡种质资源遗传多样性及药食品质研究[D];福建农林大学;2013年
5 李琦;麦田雀麦生物生态学特性与遗传多样性研究[D];山东农业大学;2017年
6 解庆;柴松分类地位与遗传多样性研究[D];西北农林科技大学;2015年
7 尹淑英;紫花苜蓿的种子功能性状及SSR分子标记的遗传多样性[D];兰州大学;2018年
8 Saif Ul Islam;中巴蜻蜓分布和遗传多样性及其相关单链DNA病毒鉴定[D];福建农林大学;2018年
9 汪焕;扬子鳄饲养种群交配体系及对种群遗传多样性的影响[D];安徽师范大学;2018年
10 任海龙;金花菜的遗传多样性及连锁图谱构建[D];扬州大学;2017年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张彩虹;藏药白花龙胆主流品种的亲缘关系、遗传多样性及药效学研究[D];成都中医药大学;2016年
2 赵娜;上海地区重引入獐(Hydropotes inermis)遗传管理研究[D];华东师范大学;2018年
3 饶佳;四川草坡省级自然保护区大熊猫生境选择及遗传多样性研究[D];西华师范大学;2018年
4 黄琦;热带亚热带四座典型大型深水水库盔型溞遗传多样性和遗传结构的时空异质性[D];暨南大学;2018年
5 赵珊;黑龙江省玉米弯孢霉叶斑病病原种类鉴定及遗传多样性分析[D];东北农业大学;2017年
6 李雯雯;森林疫霉的分类鉴定和遗传多样性研究[D];中国林业科学研究院;2018年
7 金建楚;湖南地方稻品种表型性状与SSR遗传多样性研究[D];湖南大学;2018年
8 孟祥善;黄芪ISSR和ITS分子标记遗传多样性及有效成分的关联性分析[D];宁夏大学;2018年
9 郭秀霞;不同西葫芦品种及其亲本遗传多样性分析[D];山西农业大学;2017年
10 李莎;西南地区辣椒种质资源评价及遗传多样性分析[D];四川农业大学;2017年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026