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《成都中医药大学》 2018年
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自体菌苗对金黄色葡萄球菌所致痤疮模型及皮肤菌群影响的实验研究

陈月  
【摘要】:目的探索自体菌苗对金黄色葡萄球菌所致痤疮的治疗效果及对皮肤菌群的影响。方法1.选择临床常用中药黄芩、连翘、苦参、白花蛇舌草,中药复方五味消毒饮,及西药盐酸克林霉素、甲硝唑,采用常量肉汤稀释法和琼脂法,测定其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的抑菌效果,分别从中、西药组中选取最低抑菌浓度值(minimum inhibitory concentration,MIC)最小者,为后续实验药物;2.选择雄性日本大耳白兔30只,随机分为空白组、对照组、中药组、西药组、菌苗组5组,每组6只。除空白组外,其余组别运用经典痤疮造模方法Kligman法~([1]),于家兔左耳耳管开口处,涂擦煤焦油及皮下注射S.aureus菌液,建立痤疮模型;造模成功后,分别予中、西药组涂擦药物,1日/次;菌苗组注射菌苗,5日/次;对照组涂擦生理盐水,1日/次。于治疗后第15天肉眼观察造模处皮肤情况。末次给药18h后对家兔心脏取血,然后迅速用打孔器在左耳标记处取皮肤组织块,最后空气栓塞将其处死。采用HE染色,于光镜下观察所取标本组织形态学的改变,检测并记录各组家兔血清中IL-1α的含量及皮脂腺直径、毛囊面积;3.采集造模处皮肤表面细菌,采用16S rDNA技术检测皮肤菌群多样性。结果1.中、西药对S.aureus的抑制效果中药黄芩、连翘、苦参、白花蛇舌草及中药组方五味消毒饮中,连翘抑菌效果最佳,MIC值为0.0078125g/ml;西药克林霉素及甲硝唑中,克林霉素抑菌效果最佳,MIC值为0.0078125μg/ml。2.成功建立兔耳S.aureus痤疮模型及自体菌苗对痤疮的疗效每日于兔耳内侧皮肤涂擦煤焦油0.5ml,1日/次,并皮下注射9×10~8CFU/mlS.aureus菌液0.1ml,3日/次,15日后可成功建立兔耳S.aureus痤疮模型;对于S.aureus所致兔耳痤疮模型而言,自体菌苗总体的治疗效果最佳,优于西药克林霉素和中药连翘水煎液。3.自体菌苗对家兔S.aureus所致痤疮皮肤菌群的影响自体菌苗能起到调控兔耳皮肤菌群的作用,降低皮肤表面致病菌梭形杆菌属、分枝杆菌属、分枝杆菌科的丰度,但对葡萄球菌丰度的改变无统计学意义(P0.05)。结论:自体菌苗能明显减轻家兔痤疮症状,降低实验动物血清中IL-1α的含量、缩小皮脂腺的直径和毛囊面积,同时也能调控兔耳皮肤菌群的丰度,故自体菌苗对抗炎性反应、调节皮脂腺分泌、缩小毛囊、调控皮肤菌群等方面均有一定的效果。
【学位授予单位】:成都中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R758.733

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