PPC药效毒理学及作用机理研究

【摘要】： 目的：本论文运用现代药理学和现代分子生物学方法研究了新药葛根提取物PPC主要药效学、毒理学及其作用机理，在研究药物PPC治疗冠心病、心绞痛的基础上揭示出与心血管疾病相关的差异基因以及药物PPC作用的靶点基因，为心血管新药的研究提供了方法学和作用机理的参考。方法：在主要药效学和毒理学试验中，严格按照新药开发的技术要求进行了药物PPC治疗犬和大鼠急性心肌缺血的药效作用和急性毒性、长期毒性试验研究；在药物作用机理研究中，运用基因芯片技术筛选出正常组、模型组和治疗组的差异基因，并运用免疫组化、原位杂交、RT-PCR等技术分别对差异基因中的4种基因片段进行了研究。结果：药效学和作用机理研究表明，PPC可明显减轻心肌缺血犬及大鼠心肌缺血程度和范围，增加冠状动脉血流量和心输出量；降低心肌酶CK、ATPase、SDH的释放，不增加缺血心肌耗氧；降低血小板粘附聚集，抑制体外血栓形成。在药物作用机理研究中，通过基因芯片技术分别筛选出47个在模型对照组与正常对照组间有明显表达变化的基因，205个在药物处理组与模型对照组之间有显著性变化的基因，102个在药物处理组和正常对照组之间有显著性表达变化的基因；通过分析筛选出27个可能与药物疗效相关的基因；经免疫组化、原位杂交、RT-PCR等试验验证，PPC在治疗心肌缺血大鼠时对Hsp70、eNOS、HO-1和HO-2等基因产生了作用。结论：药效学试验表明葛根提取物PPC对犬及大鼠心肌缺血有显著的治疗作用：PPC作用机理研究认为，其抗心肌缺血作用与调控缺血心肌的Hsp70、eNOS、HO-1和HO-2基因表达有关；毒理学试验结果表明，PPC对小鼠连续灌胃的最大给药量为11.44g／kg；PPC对大鼠连续灌胃给药三个月，对大鼠体重增长、血液学、血液生化学、脏器重量系数和组织形态均无明显毒性影响，表明PPC的急性毒性和长期毒性较小，口服用药安全。