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清肝开窍祛风法对电点燃模型大鼠c-fos蛋白的表达及细胞凋亡的影响

杨东东  
【摘要】:目的 大鼠电癫痫模型的复制;研究宁痫煎剂对电点燃癫痫大鼠模型的细胞凋亡及基因表达的影响。 方法 利用改良的Goddard方法,建立大鼠电点燃癫痫模型。将造模成功的大鼠随机分为五组:模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、西药组。另取六只作为正常组,在造模成功后连续给于相应的药物28天后进行电刺激诱发癫痫,观察脑电、行为学变化,两小时后取海马区脑组织用免疫组化法测定Fos蛋白,并用TUNEL法做细胞凋亡的检测。 结果 行为学试验显示:宁痫煎剂能有效对抗大鼠电点燃癫痫模型所致癫痫发作,其抗癫痫发作率、发作级别、后放电阈值和潜伏期与模型组相比均有明显差异(p<0.01),其抗癫痫效应与药物剂量有关。与西药组相比,未见显著差异(p>0.05)。免疫组化试验显示:大鼠电点燃癫痫模型大脑皮层、海马c-fos阳性细胞较正常组表达增强,密集分布,染色较深;而四个药物治疗组则表达明显减少,分布稀疏,染色较浅。脑电观察:治疗后与首次点燃相比,治疗组的AD值稍有升高,癫痫大发作所需刺激强度增大;模型组AD值明显降低,诱发大发作所需刺激强度降低。电点燃癫痫大鼠海马区中药高剂量组、中药中剂量组与西药组都可以抑制细胞的凋亡,而低剂量组则与模型组无显著差异,细胞凋亡可见细胞核中有棕黄色颗粒。 结论 定痫煎剂能有效减少癫痫的发作频度,降低其发作程度,提高后放电阈值;抑制Fos蛋白的表达,各剂量组与西药组疗效相当,但治疗组各指标均未完全恢复到正常对照组水平。中药高剂量组、中药中剂量组与西药组都可以抑制细胞的凋亡,三者之间无显著性差异,中药低剂量组无明显抑制凋亡作用。


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