收藏本站
《成都中医药大学》 2009年
加入收藏

肾虚证在糖尿病中的分布特征及其免疫遗传机制研究

谭从娥  
【摘要】： 背景 糖尿病(DM)具有复杂的遗传背景,而肾虚证也呈现一定的家族聚集倾向,因此,以DM为载体研究肾虚证是否具有遗传倾向及其分子基础,具有很强的针对性。家系和双生子由于遗传背景相似或相同成为研究有遗传特征疾病的经典样本。基因芯片技术能够大规模筛选特征基因,为实现DM肾虚证免疫遗传机制提供了有力的工具。本文在前期“证候一基因组”研究的平台上,首先论证肾虚证在DM群体及家系中聚集分布的假说,进而引入2型糖尿病(T2DM)家系、T2DM双生子及非家系T2DM患者为研究对象,从宏观证候到微观转录组,研究DM肾虚证在免疫遗传方面的分子机制,为DM从肾论治提供理论依据。 目的 ①通过大规模的DM四诊症状调查,分折其证候的分布与构成规律,揭示肾虚证在DM辨证分型中的地位。 ②通过对典型T2DM家系成员的辨证分析,探索肾虚证在DM家系中的分布特征。 ③基于基因表达谱技术筛选T2DM肾虚证免疫紊乱关键基因,探讨T2DM肾虚证发生的免疫遗传机制。 方法 ①宏观糖尿病证候的模型判别：根据自编DM四诊症状调查表对DM患者及T2DM家系进行调查,整合广义词典模型、因子分析、聚类分析等方法,结合专家诊断,挖掘肾虚证在DM中的分布特征。 ②微观特征基因的芯片筛选：借助基因芯片技术,精选典型T2DM肾虚证家系、双生子及非家系患者分3组设计基因表达谱试验,利用SAM、FatiGO+等多种数据库筛选DM肾虚证特征基因表达谱。 ③芯片结果的qPCR临床验证：对基因芯片筛选到的特征表达基因进一步采用qPCR方法进行验证。 结果 ①5010例糖尿病患者中肾虚证的分布调查：5010例DM患者的病位以肾为主,病性以虚为主,肾虚证在DM证候中呈集中分布趋势。 ②2038例患者的T2DM家族史调查：2038例患者中,有T2DM家族史者有444例,占总调查人数的19.57%；阳性T2DM家族史的患者的四诊症状定性总分明显高于阴性家族史患者(p0.01)；3个典型T2DM家系中肾虚证成员占总调查成员的比例分别为66.7%、50%和75%；同卵双生子具有病和证罹患的一致性,但存在着病情轻重程度的差异。 ③家系、双生子、非家系糖尿病患者基因表达谱研究：3组样本分别筛选到81、70、99个显著表达基因,GO、PATHWAY分析提示免疫基因及通路的显著表达为三组的共性特征,尤其是IL-10等白介素族基因及细胞因子通路在2组中出现显著表达。 ④6个免疫相关基因的qPCR验证：验证了AZU1、HLA-DRB5、CCR3、IL-10、IL-1β和IL20RA 6个基因,其中IL-10和IL-1β基因在T2DM肾虚证患者中的表达显著高于正常人(P0.05),而CCR3和IL20RA基因在T2DM肾虚证患者中表达显著低于正常组(P0.05)。 讨论 ①肾虚证是糖尿病的基础证候：整合模型判别及多元数学统计方法分析DM证候的共性特征,结果提示肾虚证是DM的基础证候。 ②肾虚证在糖尿病家系中呈现家族聚集性趋势：多个典型家系及双生子的辨证分析结果提示肾虚证在T2DM家系中呈现家族聚集性趋势,家系中肾虚证和DM有伴发倾向。 ③糖尿病肾虚证的关键病机之一是免疫紊乱的遗传相关性：白介素族及其受体基因,如IL-10、IL-1β、IL20RA等和细胞因子-细胞因子受体相互作用通路的显著表达,提示DM肾虚证的关键病机之一是免疫紊乱的遗传相关性。 ④免疫相关基因qPCR临床验证和基因芯片结果的一致性：4个基因CCR3、IL-10、IL-1β、IL20RA的qPCR验证结果和基因芯片筛选结果具有一致性,提示这四个基因与DM肾虚证关系更为密切。
【关键词】：肾虚证 糖尿病 免疫遗传 家系 双生子 细胞因子通路
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R259
【目录】：
  • 中文摘要14-16
  • ABSTRACT16-20
  • 缩略词20-22
  • 前言22-28
  • 1. 糖尿病病证结合研究的意义22-24
  • 1.1 糖尿病研究的重要性22
  • 1.2 中医药治疗糖尿病的优势22
  • 1.3 糖尿病辨证研究的现状及不足22-23
  • 1.4 肾虚证在糖尿病发生演变过程中的地位23
  • 1.5 糖尿病和肾虚证结合的病证结合研究方法23-24
  • 2. 多学科方法结合研究复杂疾病的意义24-25
  • 2.1 糖尿病和肾虚证的复杂疾病特性24
  • 2.2 多学科方法的整合研究复杂疾病的优势24-25
  • 3. 糖尿病肾虚证微观遗传特征研究—家系双生子研究方法25-28
  • 3.1 从遗传学角度切入糖尿病肾虚证研究的意义25
  • 3.2 家系及双生子样本研究糖尿病肾虚证的优势25
  • 3.3 基因芯片技术整合家系双生子研究的方法学平台25-28
  • 第一部分 肾虚证在糖尿病群体中的分布特征研究28-48
  • 引言28
  • 1. 资料与方法28-32
  • 1.1 糖尿病西医诊断标准28-29
  • 1.2 纳入标准29
  • 1.3 排除标准29
  • 1.4 肾虚证辨证标准29
  • 1.5 糖尿病四诊症状调查表29-30
  • 1.6 病例资料来源及内容30
  • 1.7 糖尿病病历资料症状术语规范30-31
  • 1.8 症状指标赋值31
  • 1.9 糖尿病调查结果的录入31
  • 1.10 数据分析方法31-32
  • 1.10.1 一般的数学统计方法31
  • 1.10.2 新型的模型判别方法31-32
  • 2. 结果32-43
  • 2.1 病例的一般信息32-34
  • 2.1.1 性别分布32
  • 2.1.2 年龄分布32-33
  • 2.1.3 病程分布33-34
  • 2.2 证候分布统计分析结果34-43
  • 2.2.1 症状出现频率描述34-35
  • 2.2.2 系统聚类分析35-36
  • 2.2.3 因子分析36-41
  • 2.2.3.1 各成分的公因子方差36-37
  • 2.2.3.2 采用方差最大旋转法后的因子载荷37-38
  • 2.2.3.3 因子载荷碎石图及散点图38-39
  • 2.2.3.4 提取的主因子及其辩证39
  • 2.2.3.5 根据因子得分矩阵进行系统聚类分析39-41
  • 2.2.3.5.1 聚类图39-40
  • 2.2.3.5.2 各因子聚类层次所解释的症状指标及其辨证40-41
  • 2.2.4 广义词典模型判别41-43
  • 2.2.4.1 广义词典模型判别得到的23个症状模块41-42
  • 2.2.4.2 将23个症状模块辨证组合得到的9个证候模块42-43
  • 3. 讨论43-48
  • 3.1 糖尿病四诊症状调查表的制定43-44
  • 3.2 病历资料的可靠性及可利用性44
  • 3.3 病历数据症状术语规范的必要性44-45
  • 3.4 多元统计方法在糖尿病肾虚证分布研究中的运用45-47
  • 3.4.1 聚类分析方法45
  • 3.4.2 因子分析方法45-46
  • 3.4.3 广义词典模型新方法的应用46-47
  • 3.5 肾虚证是糖尿病的基础证候47-48
  • 第二部分 糖尿病家系中肾虚证分布特征研究48-64
  • 引言48-49
  • 1. T2DM家族史背景调查49-52
  • 1.1 对象与方法49
  • 1.1.1 调查对象49
  • 1.1.2 调查内容49
  • 1.1.3 调查方法49
  • 1.2 调查结果49-52
  • 1.2.1 T2DM家族史阳性组和阴性组性别分布比较49
  • 1.2.2 T2DM家族史阳性组和阴性组年龄分布比较49-50
  • 1.2.3 T2DM家族史阳性组和阴性组病程分布比较50-51
  • 1.2.4 症状定性总分比较51
  • 1.2.5 相关因素logistic回归分析51-52
  • 2. 典型T2DM家系及家系双生子证候调查52-62
  • 2.1 调查对象52
  • 2.2 调查途径52-53
  • 2.3 调查方法53-54
  • 2.3.1 T2DM家系筛选标准53
  • 2.3.1.1 纳入标准53
  • 2.3.1.2 排除标准53
  • 2.3.2 糖尿病四诊症状调查表53
  • 2.3.3 双生子卵型鉴别方法53-54
  • 2.4 调查内容54
  • 2.5 结果54-62
  • 2.5.1 家系调查一般情况54
  • 2.5.2 四川彭州蒲姓T2DM家系54-57
  • 2.5.2.1 家系图54-55
  • 2.5.2.2 OGTT检测结果55
  • 2.5.2.3 糖尿病四诊症状调查表调查结果55-57
  • 2.5.3 成都陈姓双生子家系57-60
  • 2.5.3.1 家系图57
  • 2.5.3.2 OGTT检测结果57-58
  • 2.5.3.3 糖尿病四诊症状调查表调查结果58-59
  • 2.5.3.4 OGTT结果异常者和正常者之间症状总分比较59-60
  • 2.5.4 北京吕姓双生子家系60-62
  • 2.5.4.1 家系图60
  • 2.5.4.2 临床生化检测结果60-61
  • 2.5.4.3 四诊症状调查表调查结果61-62
  • 2.5.5 双生子病证结合调查结果62
  • 3. 讨论62-64
  • 3.1 糖尿病家系中肾虚证的家族聚集性62-63
  • 3.2 同卵双生子病和证的罹患一致性63-64
  • 第三部分 糖尿病肾虚证家系双生子基因表达谱研究64-94
  • 引言64
  • 1. 试验对象64-65
  • 2. 材料与方法65-71
  • 2.1 标本的采集与分离白细胞65
  • 2.1.1 主要仪器与试剂65
  • 2.1.2 实验步骡65
  • 2.2 RNA 的提取65-67
  • 2.2.1 主要仪器与试剂65
  • 2.2.2 实验步骤65-67
  • 2.2.2.1 物品器械的去RNA酶处理65-66
  • 2.2.2.2 总RNA的提取66
  • 2.2.2.3 总RNA的纯化66-67
  • 2.2.2.4 RNA样品质量检测67
  • 2.3 基因芯片检测67-69
  • 2.3.1 基因芯片的制备67-68
  • 2.3.1.1 主要仪器与试剂67
  • 2.3.1.2 基因芯片的制备67-68
  • 2.3.2 对样品RNA进行荧光标记68
  • 2.3.3 基因芯片的杂交68-69
  • 2.3.3.1 主要仪器与试剂68-69
  • 2.3.3.2 基因芯片的杂交与清洗69
  • 2.3.4 基因芯片的扫描69
  • 2.3.5 芯片图像的采集与数据分析69
  • 2.4 基因芯片实验分组69
  • 2.5 基因表达谱数据分析工具69-71
  • 2.5.1 SOURCE69-70
  • 2.5.2 Gene Ontology(GO)70
  • 2.5.3 KEGG70
  • 2.5.4 SAM70-71
  • 2.5.5 FuncAssociate71
  • 3. 结果71-89
  • 3.1 蒲姓家系基因芯片检测结果71-75
  • 3.1.1 RNA样品质检结果71-72
  • 3.1.2 显著基因筛选结果72-75
  • 3.1.2.1 SAM plot72-73
  • 3.1.2.2 显著表达基因73-74
  • 3.1.2.3 81个显著表达基因GO功能注释74-75
  • 3.1.2.4 81个显著基因KEGG通路注释75
  • 3.2 吕姓双生子家系基因芯片检测结果75-79
  • 3.2.1 RNA样品质检结果75-76
  • 3.2.2 显著表达基因筛选结果76-79
  • 3.2.2.1 SAM plot76-77
  • 3.2.2.2 显著表达基因77-78
  • 3.2.2.3 70个显著表达基因GO功能注释78-79
  • 3.2.2.4 70个显著表达基因KEGG通路注释79
  • 3.3 非家系T2DM患者基因芯片检测结果79-84
  • 3.3.1 RNA样品质检结果79-80
  • 3.3.2 显著表达基因筛选结果80-84
  • 3.3.2.1 SAM plOt80-81
  • 3.3.2.2 显著表达基因81-82
  • 3.3.2.3 99个显著表达基因GO功能注释82-83
  • 3.3.2.4 99个显著表达基因KEGG通路注释83-84
  • 3.4 家系及双生子基因表达谱比较结果84-89
  • 3.4.1 吕姓双生子之间基因表达谱比较结果84-88
  • 3.4.1.1 相同差异表达基因84-85
  • 3.4.1.2 双生子相同差异表达基因GO功能注释85
  • 3.4.1.3 双生子相同差异表达基因KEGG通路注释85-86
  • 3.4.1.4 双生子之间差异表达基因GO功能类及Pathway比较86-88
  • 3.4.2 家系非家系差异基因表达谱比较结果88
  • 3.4.3 家系差异表达基因相关的疾病比较结果88-89
  • 4. 讨论89-94
  • 4.1 引入家系双生子样本研究糖尿病肾虚证的意义89-90
  • 4.2 糖尿病肾虚证差异基因表达谱分析90-92
  • 4.2.1 蒲姓家系基因表达谱分析90-91
  • 4.2.2 吕姓双生子家系基因表达谱分析91
  • 4.2.3 非家系糖尿病肾虚证的基因表达谱分析91-92
  • 4.2.4 双生子、家系及非家系差异基因功能比较研究92
  • 4.3 糖尿病肾虚证免疫遗传机制探讨92-94
  • 第四部分 糖尿病肾虚证免疫基因的QPCR验证94-113
  • 引言94-95
  • 1. 材料与方法95-101
  • 1.1 临床样本的采集95
  • 1.2 主要试剂及仪器95-96
  • 1.2.1 采集血样和分离白细胞所需试剂和仪器95
  • 1.2.2 提取RNA所需试剂和仪器95-96
  • 1.2.3 RNA专用试剂和耗材的处理96
  • 1.2.4 实时定量PCR实验试剂及仪器96
  • 1.3 引物的设计、合成及相关网站96-97
  • 1.4 实时定量PCR实验步骤97-100
  • 1.4.1 血样的采集和白细胞的分离97
  • 1.4.2 RNA的提取97-98
  • 1.4.3 RNA质量鉴定98
  • 1.4.4 cDNA第一链合成98-99
  • 1.4.5 目的基因片段的普通PCR扩增99
  • 1.4.6 实时定量PCR检测99-100
  • 1.4.6.1 配制主混液99
  • 1.4.6.2 荧光定量PCR循环条件99-100
  • 1.4.6.3 仪器的操作100
  • 1.4.7 各基因定量PCR扩增产物的鉴定100
  • 1.5 各基因mRNA相对表达水平分析100
  • 1.6 统计学分析100-101
  • 2. 结果101-108
  • 2.1 病例组和对照组四诊症状调查表评分结果101-102
  • 2.2 各样本RNA质检结果102-103
  • 2.2.1 各样本RNA紫外分析测定结果102-103
  • 2.2.2 各样本RNA质控图103
  • 2.3 实时定量PCR结果103-108
  • 2.3.1 扩增曲线和熔解曲线103-106
  • 2.3.2 各基因mRNA在两组样本中的相对表达水平比较106-107
  • 2.3.3 实时定量PCR结果与基因芯片结果比较107-108
  • 3. 讨论108-113
  • 3.1 病例的选择108-109
  • 3.2 实时定量PCR结果分析109-111
  • 3.2.1 CCR3109-110
  • 3.2.2 IL-10110
  • 3.2.3 IL-1β110-111
  • 3.2.4 IL20RA111
  • 3.3 细胞因子-细胞因子受体相互作用通路与T2DM肾虚证111-112
  • 3.4 基因芯片与定量PCR结果比较分析112-113
  • 结语113-115
  • 问题与展望115-117
  • 参考文献117-132
  • 致谢132-133
  • 文献综述——糖尿病流行病学研究策略及分子遗传学研究进展133-151
  • 1. 糖尿病临床流行病学研究概况134-137
  • 1.1 发病概况研究134-135
  • 1.2 糖尿病危险因素135-137
  • 1.2.1 家族史135
  • 1.2.2 肥胖135-136
  • 1.2.3 高血压136
  • 1.2.4 体力活动136
  • 1.2.5 年龄136
  • 1.2.6 睡眠136-137
  • 1.3 糖尿病中医证候流行病学研究137
  • 2. 糖尿病遗传流行病学研究策略137-139
  • 2.1 家系研究137-138
  • 2.2 双生子研究138-139
  • 2.3 双生子及其家系研究139
  • 2.4 遗传流行病学和基因芯片技术的结合139
  • 3. 分子流行病学及候选基因研究139-142
  • 3.1 胰岛素基因(INS)139-140
  • 3.2 过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARG)140
  • 3.3 肝细胞核因子4α(HNF-4α)140
  • 3.4 钙蛋白酶10(CAPN10)140
  • 3.5 钾离子内向整流通道蛋白J亚单位11号成员(KCNJ11)140-141
  • 3.6 磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚单位多肽(PIK3R1)141
  • 3.7 钾电压门通道KQT样亚单位1号成员(KCNQl)141
  • 3.8 转录因子7-L2(TCF7L2)141-142
  • 4. 展望142
  • 参考文献142-151
  • 附件1:128项糖尿病四诊症状调查表151-154
  • 附件2:采用方差最大旋转法后的20个因子载荷154-158
  • 附件3:广义词典模型新方法的计算数据158-161
  • 附件4:双生子卵型相似判断表161-162
  • 附件5:公开发表的学术论文、专著及科研成果162-165

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王振;;糖尿病肾病的防治工作不可耽误[J];糖尿病新世界;2011年09期
2 徐玉梅;;糖尿病肾病食疗方[J];健康生活;2011年08期
3 韩履祺;宋跃飞;高峰;王琴;王世荣;钱雅玉;;于家菊教授治疗糖尿病肾病经验[J];中国中西医结合肾病杂志;2011年07期
4 舒展;;糖尿病肾病的治疗概况[J];中国医学工程;2011年05期
5 葛丹枫;章可谓;甘莉;;补肾泄浊汤治疗糖尿病肾病氮质血症42例[J];中国中医药科技;2011年04期
6 闫香梅;;中药治疗糖尿病肾病58例临床分析[J];中国社区医师(医学专业);2011年21期
7 邱慧琳;;糖尿病肾病饮食注意要点ABCD[J];食品与健康;2000年02期
8 刘红梅;;将糖尿病肾病阻断在可逆转期[J];大家健康;2010年02期
9 张海燕;;糖尿病肾病健康教育的研究进展[J];中国社区医师(医学专业);2011年19期
10 王宇霞;;中西医结合治疗晚期糖尿病肾病30例[J];中国民间疗法;2011年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王子坪;瞿金鸿;;活血化瘀治疗糖尿病肾病临床观察[A];中华中医药学会中医、中西医结合治疗常见病研讨会论文集[C];2007年
2 尹绍峰;;从络辨治糖尿病肾病[A];中华中医药学会第二十一届全国中医肾病学术会议论文汇编（下）[C];2008年
3 宋立群;周波;马艳春;孙许涛;张立净;肖洪彬;;糖尿病肾病的中医治疗研究及展望[A];第十一届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2010年
4 顾连方;;糖尿病肾病防治及中西医结合治疗[A];第六届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2000年
5 陆安錩;;清上补下汤治疗中糖尿病肾病的体会[A];全国第七届农村基层中西医结合学术暨工作交流会论文汇编集[C];2002年
6 陈博宇;柳红芳;;糖尿病肾病中医辨证论治概况[A];第十次全国中医糖尿病大会论文集[C];2007年
7 叶朝阳;;晚期糖尿病肾病的治疗评价[A];2008年全国中西医结合肾脏病南京论坛论文汇编[C];2008年
8 陈雪茹;;2型糖尿病人皮肤自体荧光值与糖尿病肾病的关系[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
9 朱爱霞;郭素芳;庄辉;;糖尿病肾病的护理体会50例[A];全国第二届中医中西医结合肾脏病临床进展学术研讨会论文集[C];2007年
10 浦春;;糖尿病肾病基因多态性的研究进展[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 上海二医大内分泌科 教授 宁光;什么是糖尿病肾病[N];家庭医生报;2004年
2 王敏 曹蕾;糖尿病肾病的临床治疗[N];农村医药报（汉）;2003年
3 主持人 向红丁博士;糖尿病肾病须早防早治[N];人民政协报;2002年
4 四川大学华西医院肾脏内科主任 付平;糖尿病肾病诊治要抓“早”[N];健康报;2008年
5 陕西省人民医院临床营养室 张英;三低一少 助糖尿病肾病康复[N];健康报;2009年
6 北京电力医院内分泌科 赵若楠;8个要点预防糖尿病肾病[N];健康时报;2009年
7 刘奕深;糖尿病肾病的防治对策[N];潮州日报;2009年
8 江苏省南京市中大医院 陆青松;糖尿病肾病每日组合餐[N];健康时报;2009年
9 湘雅二医院 张红;防治糖尿病肾病(四)：保护肾功能[N];大众卫生报;2009年
10 郑柳涛 北京中医药大学;“三观”治疗糖尿病肾病[N];中国中医药报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 谭从娥;肾虚证在糖尿病中的分布特征及其免疫遗传机制研究[D];成都中医药大学;2009年
2 王颖辉;糖尿病肾病证候演变及其中医药干预研究[D];北京中医药大学;2010年
3 张翥;Megalin在糖尿病肾病大鼠的表达及干预措施对其作用的实验研究[D];四川大学;2005年
4 陈春元;糖尿病肾病越南东医文献研究及261例临床病案回顾分析[D];广州中医药大学;2009年
5 肖晓燕;TLR4在1型糖尿病肾病及TLR3在自身免疫性肝炎中作用的研究[D];山东大学;2010年
6 张惠萍;基于多种分析技术的胰腺癌与糖尿病血清代谢组学研究[D];上海交通大学;2011年
7 王评;温肾健脾法对脾肾阳虚型糖尿病疗效及生存质量的临床研究[D];广州中医药大学;2010年
8 路晓光;L-FABP/GPx3/TGF-β三种蛋白在2型糖尿病肾病中的作用及中医药干预研究[D];北京中医药大学;2011年
9 傅余芹;ET、TGF-β与糖尿病肾病的关系及虫草菌丝对其影响的实验研究[D];山东大学;2005年
10 肖湘成;糖尿病肾病肾小管上皮细胞表型转化及罗格列酮对其干预作用的实验研究[D];中南大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王静;糖尿病肾虚证与血瘀证的相关性研究[D];成都中医药大学;2010年
2 李丹阳;血肌酐、胱抑素C和MDRD公式在糖尿病肾病肾功能评估中的比较[D];浙江大学;2010年
3 王玉容;MG132对早期糖尿病肾病大鼠ERK1/2信号通路的作用研究[D];泸州医学院;2010年
4 刘杰;复方血栓通胶囊对糖尿病肾病的疗效观察[D];暨南大学;2011年
5 梁瑞凯;MCP-1、氧化应激在糖尿病肾病发生发展中的作用及机制研究[D];第三军医大学;2011年
6 陈鑫;糖尿病肾病患者血循环激肽释放酶1水平及其临床意义的研究[D];桂林医学院;2010年
7 秦棱;芪丹饮治疗糖尿病肾病蛋白尿的疗效观察[D];广州中医药大学;2011年
8 王译晨;血清胱抑素C测定对糖尿病肾病早期诊断的临床意义[D];吉林大学;2011年
9 孔祥栋;长期应用血管紧张素转换酶抑制剂与钙通道阻滞剂在延缓糖尿病肾病进展作用的Meta分析[D];浙江大学;2010年
10 单湘湘;胰腺衍生因子与2型糖尿病及糖尿病肾病的关系探讨[D];苏州大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026

《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司
同方知网数字出版技术股份有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 大众知识服务
京ICP证040441号
互联网出版许可证 新出网证（京）字008号
出版物经营许可证 新出发京批字第直0595号

订购热线：400-819-9993 010-62982499
服务热线：010-62985026 010-62791813
在线咨询：http://help.cnki.net
传真：010-62780361
京公网安备11010802020475号