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《川北医学院》 2011年
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苦参碱对肝癌细胞NF-κB、p53、DcR3 mRNA表达的影响

李权林  
【摘要】:目的:检测苦参碱作用下,肝癌细胞HepG2中NF-κB(p65/RelA)、p53、诱骗受体3(decoy receptor3, DcR3/TR6)mRNA的表达水平,探讨苦参碱对肝癌细胞HepG2可能的作用机制,以及上述细胞因子间的相互影响。 方法:培养肝癌细胞株HepG2。根据刺激肝癌细胞的苦参碱浓度梯度(0g/L, 0.25g/L, 0.5g/L, 1.0g/L, 1.5g/L)将培养的肝癌细胞株分为5个组,以LY294002(PI3K/Akt信号通路广谱抑制剂)刺激的肝癌细胞作为阳性对照组,另设一个阴性对照组。MTT法分别检测上述6个组细胞培养12、24、36、48小时的抑制率。用Hoechst染色观察培养12小时后各组细胞凋亡形态学改变。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测各组细胞NF-κB、p53、DcR3 mRNA的表达水平。 结果:苦参碱诱导肝癌细胞凋亡呈时间和剂量依赖性。苦参碱终浓度1.5g/L的培养液培养12小时即可引起肝癌细胞明显凋亡。NF-κB mRNA的表达随苦参碱浓度的增加而增加(P=0.017),p53 mRNA的表达随苦参碱浓度的增加而降低(P=0.007), NF-κB和p53 mRNA的表达呈负相关,而DcR3 mRNA的表达不受苦参碱浓度的影响。LY294002处理后的肝癌细胞,NF-κB、p53、DcR3 mRNA的表达均较对照组明显增高(P0.001)。 结论:苦参碱诱导肝癌细胞凋亡的过程中活化了NF-κB,这可能是肝癌细胞对苦参碱早期耐药的机制之一。苦参碱对NF-κB的作用可能受细胞类型的影响。
【学位授予单位】:川北医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R735.7

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