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《西南师范大学》 2002年
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共振瑞利散射及共振非线性散射测定肝素和某些物理化学参数的新方法研究

罗红群  
【摘要】: 共振瑞利散射(RRS)和倍频散射、二级散射等共振非线性散射(RNLS)是二十世纪90年代发展起来的一种新兴的分析技术,因其高灵敏度、简易性和较好的选择性而引起了人们的广泛兴趣和关注。近年来研究和应用日益增多。特别是它对于生物大分子的一些非键合作用极为敏锐,已成为研究生物大分子的一种十分有用的手段,目前主要集中于核酸和蛋白质的研究,但另一类最重要的生物分子——糖类,至今尚很少涉及,此外,利用这种方法对一些物理-化学参数的测定,也尚未见报道。因此,本文在国家自然科学基金的资助下以糖胺聚糖的肝素为例,研究RRS和RNLS法在多糖分析中的应用,并以β-环糊精的包结常数和表面活性剂的临界胶束浓度(CMC)值为例,研究这类方法在测定物理-化学参数方面的应用。 本文的主要研究内容及成果如下: 1.肝素-碱性二苯基萘基甲烷染料及肝素-碱性吩噻嗪类染料体系的共振瑞利散射光谱及其分析应用 以肝素为分析对象,研究了碱性二苯基萘基甲烷染料和碱性吩噻嗪类染料等两类碱性染料与肝素相互作用的共振瑞利散射光谱特征及其分析应用,结果表明,在弱酸性至弱碱性溶液中,维多利亚蓝4R(VB4R)、维多利亚蓝B(VBB)和夜蓝(NB)三种碱性二苯基萘基甲烷染料及亚甲蓝(MB)、甲苯胺蓝(TB)、天青Ⅰ(Azure Ⅰ)和天青Ⅱ(Azure Ⅱ)四种吩噻嗪类碱性染料与肝素结合后,能导致共振瑞利散射光谱强度急剧增强并产生新的RRS光谱,它们分别在523nm(维多利亚蓝4R体系)、534nm(维多利亚蓝B体系)、540nm(夜蓝体系)、346nm(亚甲蓝体系)、329nm(甲苯胺蓝体系)、337nm(天青Ⅰ体系)和338nm(天青Ⅱ体系)处出现最大RRS峰。考察了RRS光谱特征,影响因素和适宜的反应条件,结合紫外-可见分光光度法和量子化学计算探讨了反应机理。指出这些碱性染料与肝素的结合物的RRS光谱特征与吸收光谱密切相关,两者之间具有对应关系。研究了共振瑞利散射强度与肝素浓度之间的关系,建立了用共振瑞利散射技术测定痕量肝素的新方法,方法灵敏度高, 西南师范大学博士学位论文 摘 要 七种反应体系的检出限在 3.35-35.93 "g/mL之间。其中维多利亚蓝 4R体系的灵敏 度最高,用于肝素钠注射液的效价测定获得满意结果。说明这一技术用于糖类的研 究和测定也有很好的前景,这是共振瑞利散射在生物大分子分析应用中的一个新的发 展。 2.肝素-亚甲蓝体系的二级散射和倍频散射光谱研究 用倍频散射和二级散射技术研究了吩嚏嚎类碱性染料亚甲蓝(MB)与肝素的 结合反应,结果表明,亚甲蓝与肝素的结合也能导致倍频散射(FD)和二级散射(SO) 强度急剧增强,它们分别在350 run 倍频散射)和700 urnc级散射)处出现最大散 射峰。考察了适宜的反应条件,影响因素及两种散射强度与肝素浓度之间的关系, 提出了用倍频散射和二级散射技术测定痕量肝素的方法。方法灵敏度高,倍频散射 和二级散射法的检出限分别为 4.36 "g/ffiL和 3.55 gb。探讨了倍频散射和二级散 射的光谱特征与共振瑞利散射的内在联系。 3.肝素-结晶紫体系的共振瑞利散射、二级散射和倍频散射光谱及其分析应用研究 用共振瑞利散射、倍频散射和二级散射技术研究了碱性三苯甲烷类染料结晶紫 (CV)在 pH 6刀司二的 Britton-Robinson缓冲溶液中,与肝素的结合反应,结果 表明,该反应能导致共振瑞利散射及倍频散射和二级散射强度急剧增强,它们分别 在AeX/lem 为 492 Inn/92 urn(共振瑞利散射),984 nln/92 urn(倍频散射)和 492 Inn/84 urn二级散射)处出现最大散射峰。研究结果表明肝素的浓度在 0+0 pg/25mL 范围内与散射强度有良好的线性关系,提出了用共振瑞利散射、倍频散射和二级散 射技术测定痕量肝素的方法。方法灵敏度高,共振瑞利散射、倍频散射和二级散射 法的检出限分别为:2.92 "g/ffiL,3.46 "g/inL和 3二8 "g/ttiL。并探讨了共振瑞利散 射与倍频散射和二级散射之间的关系,由此验证了倍频散射和二级散射是由共振瑞 利散射引起的共振非线性散射的观点。 4.阳离子表面活性剂与肝素反应的共振瑞利散射光谱特性及其分析应用 研究了氯化十六烷基二甲基芋基按(CDBAC)、氯化十四烷基二甲基芋基铰 记ePh\澳化十六烷基毗陡(CPB*滨化十四烷基毗陡(TPB)和澳化十六烷基 三甲铰(CTAB)等5种阳离子表面活性剂与肝素的相互作用,结果表明,它们均 能产生强的RRS,且反应条件接近,RRS光谱特征相似,但灵敏度差异较大,其 中含芳基且分子量大的氯化十六烷基芋按(CDBAC)最灵敏,而不含芳基分子量 又较小的澳化十六烷基三甲镀(CTAB)灵敏度最低,前者对于肝素的检出限为 11 "g/thL,后者则为 33 "g/ffiL。方法对于肝素有较好的选择性,可用于痕量肝素的测 且二 西南师范大学博士学位论文 摘 要 定。研究还发现RRS强度与阳离子表面活性剂的结构和分子量有关。 5.共振瑞利散射和共?
【学位授予单位】:西南师范大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:O657.3

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【引证文献】
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【参考文献】
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【共引文献】
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5 赵钰玲;戚欢阳;师彦平;;八角茴香挥发性成分HS-SPME-GC-MS方法建立及应用[A];首届中国中西部地区色谱学术交流会暨仪器展览会论文集[C];2006年
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7 蒋治良;刘绍璞;邹彩霞;;PdI_4~(2-)-孔雀绿缔合纳米微粒体系的极谱猝灭效应研究[A];中国化学会第八届多元络合物会议论文[C];2002年
8 李芳;蒋治良;;[AuCl_4]~--RDG~+缔合物纳米微粒体系的荧光猝灭机理研究[A];中国化学会第八届多元络合物会议论文[C];2002年
9 邹彩霞;杨明媚;蒋治良;;磷钼杂多酸-乙基紫体系的共振散射光谱研究[A];中国化学会第八届多元络合物会议论文[C];2002年
10 邹节明;王力生;蒋治良;尹文清;覃爱苗;;环丙沙星-荧光桃红n-π荷移络合物纳米微粒体系的光谱特性研究[A];中国化学会第八届多元络合物会议论文[C];2002年
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2 常雪婷;海洋优势菌种附着腐蚀Fe_3Al及其复合材料界面与机理研究[D];中国海洋大学;2010年
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7 高晓燕;聚氨酯/纳米无机复合材料的制备与性能研究[D];吉林大学;2011年
8 秦显国;两性增溶剂CHAPS聚集性质及其与Triton X-100相互作用的NMR研究[D];华中科技大学;2011年
9 孔玲;蛋白质、多肽与DNA相互作用的共振瑞利散射和共振非线性散射光谱及其分析应用研究[D];西南大学;2011年
10 王志清;北细辛种子特性及光合生理研究[D];中国农业科学院;2011年
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1 任子阳;阳泉无烟煤对CH_4、CO_2吸附特性研究[D];河南理工大学;2010年
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4 郭静;N-(O,O-二烷基磷酰基)-D-氨基葡萄糖的合成、表征以及相关量化研究[D];郑州大学;2010年
5 王成斌;五种新型杯[4]芳烃衍生物的合成、表征及在电分析中的应用研究[D];郑州大学;2010年
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7 郑翠英;阳离子表面活性剂和重油复合体系在海洋沉积物上的吸附行为[D];中国海洋大学;2010年
8 翁超;Ru(Ⅱ)多吡啶配合物与DNA作用的共振光散射研究及应用[D];湘潭大学;2010年
9 王桂荣;水平刻槽管壁面升膜蒸发传热传质耦合研究[D];中国海洋大学;2010年
10 郑轩;菲和亚甲基蓝在海洋沉积物上的吸附[D];中国海洋大学;2010年
【同被引文献】
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4 刘珊珊;武小霞;姜振峰;李文滨;;大豆7S球蛋白β-伴大豆球蛋白的研究现状[J];大豆科学;2007年03期
5 郑树贵;董维国;孙泽威;秦贵信;;等电点沉淀法分离大豆球蛋白酸性亚基和碱性亚基[J];大豆科学;2009年01期
6 苏小东,李树伟,王小红,潘建章,何艺;共振散射光谱法测定酸性镀铜液中的氯离子[J];电镀与涂饰;2003年06期
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8 潘孝成,祁克宗,孙国仁,朱良强;兽药单克隆抗体研究进展[J];动物医学进展;2005年04期
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1 刘凤志;金、硒纳米微粒体系的光谱特性研究[D];广西师范大学;2003年
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3 张灿;农药西维因快速检测试纸条的研究开发[D];天津科技大学;2006年
4 于春娣;酶联免疫法检测农作物中的西维因残留[D];天津科技大学;2006年
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6 郝秀利;共振瑞利散射法用于酸性粘多糖的测定[D];西南大学;2008年
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【二级引证文献】
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3 程云燕,罗杨合,蒋治良;(阳离子表面活性剂-I_3)n缔合微粒体系的光谱特性及分析应用[J];分析测试技术与仪器;2005年02期
4 赵长凤,周苏梅,刘庆业;微肥中锌的双硫腙螯合微粒共振散射光谱分析[J];分析测试技术与仪器;2005年02期
5 蒋治良;孙双娇;;金属(Ⅱ)-DDTC螯合物微粒的共振散射光谱研究及分析应用[J];桂林工学院学报;2007年03期
6 程云燕;蒋治良;梁爱惠;;基于AgI_2~-缔合微粒共振散射效应测定阳离子表面活性剂[J];光谱学与光谱分析;2006年10期
7 樊玮鑫;李生泉;高雪敏;郝桂青;;共振光散射法测定痕量铝(Ⅲ)[J];分析仪器;2012年05期
8 薛忠晋;冯巧玲;王高;雷树峰;高曰云;周汉昌;;基于共振瑞利散射法的人血清蛋白浓度的研究[J];光散射学报;2012年04期
9 杨清玲;刘健;王剑;鲁群岷;傅生会;段慧;;共振瑞利散射和共振非线性散射及其在环境分析中的应用[J];三峡环境与生态;2010年03期
10 冯玉怀;杨丙雨;乔广军;韩慧芳;;共振光散射技术在无机分析中的应用[J];冶金分析;2008年03期
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1 何小松;席北斗;姜永海;袁英;安达;杨昱;刘鸿亮;;填埋垃圾渗滤液水溶性有机物分组与光谱学表征研究现状[A];2011中国环境科学学会学术年会论文集(第一卷)[C];2011年
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1 康彩艳;痕量二氧化氯、氯及亚氯酸根共振散射光谱测定新方法研究[D];东华大学;2007年
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3 李娟;共振光散射光谱法在生物大分子检测中的应用研究[D];吉林大学;2009年
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1 余章;光学探针作用于蛋白类物质的研究[D];淮北师范大学;2010年
2 董天宝;垃圾渗滤液处理过程中水溶性有机物特征研究[D];沈阳航空航天大学;2012年
3 翟好英;金、银和铂配合纳米微粒体系的光谱特性研究及其分析应用[D];广西师范大学;2005年
4 章表明;含硫、硒、碘纳米微粒的共振散射和荧光效应研究及其分析应用[D];广西师范大学;2005年
5 曾铭;共振光散射光谱法机理研究及其在农药分析中的应用[D];四川师范大学;2006年
6 孙双姣;纤维蛋白原和载脂蛋白免疫共振散射光谱分析[D];广西师范大学;2006年
7 周苏梅;罗丹明染料、双硫腙配合物微粒的共振散射和荧光光谱研究及分析应用[D];广西师范大学;2006年
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9 李标模;离子液体在纳米金粒子的制备和催化性能研究中的应用[D];湖南师范大学;2007年
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【二级参考文献】
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2 荣杰生;陶树清;陶天遵;潘海乐;张滨;吴莹;吴丽萍;;N-脱硫酸肝素对ICR成年雌性小鼠骨代谢影响的骨组织形态学研究[A];第二届海峡两岸矫形外科学术研讨会论文集[C];2004年
3 张凤;储以微;熊思东;;肝素抗炎机制研究——肝素抑制T细胞活化的机制研究[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
4 叶霖;耿雪;武欣;王培境;陈兵;冯增国;;PLCL的合成及其作为抗凝人工血管支架材料的初步研究[A];2009年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(下册)[C];2009年
5 杜文章;张素琴;;肝素浓度对电极法测定血浆离子钙结果的影响[A];第一届宁夏医学会检验学分会学术年会论文汇编[C];2005年
6 刘绍璞;刘芹;刘忠芳;李明;黄承志;;铬(VI)-碘化物-碱性三苯甲烷染料体系的共振瑞利散射及其分析应用[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(上册)[C];1999年
7 李元红;彭荔薰;张木勋;欧阳金芝;张建华;;肝素对糖尿病大鼠肾小球转化生长因子β_1及细胞外基质表达的影响[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年
8 景凤娟;黄楠;陈俊英;冷永祥;杨萍;赵安莎;;Ti-O膜表面吸附固定白蛋白及肝素后血液相容性研究[A];中国生物医学工程学会第六次会员代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2004年
9 陈祥娥;凌沛学;张天民;;Heparosan细菌合酶[A];中国药学会全国多糖类药物研究与应用研讨会论文集[C];2008年
10 傅皓;李赛;李洁华;谢新益;樊翠容;何成生;钟银屏;;肝素在聚氨酯膜表面的光固定[A];第九届全国生物材料学术会议(CBMS-9)论文集[C];2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张伦;我国肝素生产逢最佳时机[N];江苏经济报;2004年
2 王宏磊;肝素的非抗凝用途[N];中国医药报;2004年
3 是明启;肝素抗凝人皆知 拓宽用途功亦殊[N];医药经济报;2000年
4 陆志城;Bivalirudin优于肝素[N];医药经济报;2001年
5 徐 潜;警惕肝素引起的骨质疏松[N];中国中医药报;2003年
6 张伦;肝素出口热借势“疯牛病”[N];医药经济报;2004年
7 万同己;警惕肝素相关性血小板减少症[N];中国医药报;2004年
8 北京中医药大学 安江虹;肝素市场仍将扩容,重点企业优势明显[N];医药经济报;2010年
9 李瑶;肝素产业,练好内功很重要[N];医药经济报;2008年
10 K.Mckeage等 吕文编译;Argatroban治疗肝素引起的并发症[N];中国高新技术产业导报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 罗红群;共振瑞利散射及共振非线性散射测定肝素和某些物理化学参数的新方法研究[D];西南师范大学;2002年
2 孔玲;蛋白质、多肽与DNA相互作用的共振瑞利散射和共振非线性散射光谱及其分析应用研究[D];西南大学;2011年
3 蒋治良;无机纳米微粒体系的共振瑞利散射光谱研究及分析新应用[D];西南师范大学;2003年
4 薛忠晋;基于共振瑞利散射血清蛋白测试技术及POCT仪器的研究[D];中北大学;2012年
5 王建国;非抗凝性肝素在预防和治疗炎症中的应用及肝素—P-选凝素相互作用的亲和力和动力学研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2003年
6 李太山;纳米晶制备、表征、荧光和共振瑞利散射光谱特性研究[D];西南大学;2008年
7 杨清玲;共振瑞利散射和共振非线性散射光谱在环境分析中的新应用研究[D];西南大学;2008年
8 左云飞;L-选择蛋白与P388D1淋巴瘤细胞淋巴道转移潜能的相关性[D];大连医科大学;2006年
9 王伟;功能化金纳米材料的合成、性质及其在化学发光传感器中的应用研究[D];中国科学技术大学;2008年
10 朱振峰;血管内局部应用纳米控释系统防治心血管再狭窄的实验研究[D];中国协和医科大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘健;蛋白质—多糖反应体系的共振瑞利散射光谱、共振非线性散射光谱及其分析应用研究[D];西南大学;2010年
2 刘俊轶;药物及生物大分子的共振瑞利散射和共振非线性散射法研究与应用[D];内蒙古大学;2010年
3 周金风;某些纳米微粒的共振瑞利散射和共振非线性散射光谱及其分析应用[D];西南大学;2010年
4 李翠侠;吸收、荧光光谱法、共振瑞利散射和共振非线性散射技术测定利尿药的新方法研究[D];西南大学;2011年
5 许倩影;某些生物大分子及其组成单元的共振瑞利散射和荧光光谱研究[D];西南大学;2012年
6 孔玲;共振瑞利散射及共振非线性散射测定某些生物碱和水溶性聚合物的新方法研究[D];西南师范大学;2003年
7 刘进芳;共振瑞利散射和共振非线性散射光谱法测定食品色素赤藓红的新方法研究[D];西南大学;2011年
8 倪欣;共振瑞利散射技术在环境监测中的应用[D];沈阳理工大学;2010年
9 刘婷婷;共振瑞利散射测定头孢药物的方法研究[D];沈阳理工大学;2013年
10 付晓蓓;共振瑞利散射测定孔雀石绿、铅和凝血酶的新方法研究[D];西南大学;2012年
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