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《西南师范大学》 2005年
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黄鳝蛋白酶分离纯化、性质与应用研究

江信红  
【摘要】:黄鳝(Monopterus albus Zuiew)肉质鲜美、营养丰富,深受消费者喜爱,并在深加工和保健品开发上具有极大的开发潜力。由于黄鳝供需矛盾日益突出,其人工繁殖以及人工养殖尤为重要。黄鳝是典型的肉食性鱼类,蛋白酶是其最主要的消化酶,对蛋白酶的相关研究,不仅对黄鳝的摄食性能和消化特点等方面研究有重要帮助,同时可对黄鳝配合饲料的科学化、系列化提供重要理论依据。因此,本实验对于黄鳝的人工饲养,提高产量,节约成本,解决日益突出的供需矛盾有重要意义。 蛋白酶是目前工业用酶的主要酶制剂之一,在食品、日化、医药等方面应用广泛。在人们倡导绿色、环保、天然消费的今天,含磷洗涤剂和食品化学添加剂逐渐被禁用,这给天然酶制剂的使用带来更大空间。而目前,天然蛋白酶的来源非常有限,动物蛋白酶主要是猪胰蛋白酶,由于资源短缺,现仅用于医药。鉴于蛋白酶的应用广泛且来源有限,开发新的蛋白酶源迫在眉睫。 黄鳝内脏一直作为下脚料没有被很好利用,随着我国黄鳝养殖业的不断发展,产量不断增加,按1kg鳝鱼0.3kg内脏计算,我国每年将产生100万吨左右的鳝鱼内脏,这样巨大的资源如不回收利用,不仅造成资源浪费,更会污染环境。因此,黄鳝内脏蛋白酶的研究可开发新的蛋白酶源,有效解决蛋白酶制剂紧缺问题,同时更为黄鳝的综合开发提供新的途径。 本文主要从黄鳝肠道蛋白酶的分离纯化、性质和相关应用等方面进行了研究,现将结果总结如下: 1.黄鳝蛋白酶的分离纯化 黄鳝肠道经蒸馏水冲洗,组织绞碎,离心,正丁醇脱脂,硫酸铵盐析,沉淀溶解和透析得粗酶液。将粗酶液过DEAE-琼脂糖离子交换柱层析,收集活性峰、透析、干燥浓缩。再将所得样品经Sephacryl S-200凝胶柱层析,收集活性峰,干燥后得蛋白酶纯品,将其进行SDS-PAGE和等电聚焦电泳,均显示为单一蛋白质条带。SDS-PAGE和Sephacryl S-200测得蛋白酶分子量分别为26KDa和25.5KDa,等电聚焦电泳测得酶的等电点为6.2。蛋白酶的活性回收率为9.8%,纯化倍数为245倍。 2.性质研究 由分离纯化得到蛋白酶纯品后,测得其最适温度为55℃,温度在20℃到40℃酶活性保
【学位授予单位】:西南师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S966.4

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 孔繁东;苑艳纳;徐杨;;中国对虾蛋白酶性质的研究[J];食品工业;2012年05期
2 龚翠;周爱梅;戴结玲;黄烨;何建妹;谢锐田;;尼罗罗非鱼肠道碱性蛋白酶性质的研究[J];食品工业科技;2010年09期
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 曾端,叶元土,苏平;黄鳝蛋白酶和淀粉酶活力的研究[J];北京水产;1999年03期
2 张硕,赵艳;栉孔扇贝蛋白酶和淀粉酶活力的初步研究[J];大连水产学院学报;1997年01期
3 陈芳,刘百韬,杨代勤,李道霞;黄鳝配合饲料的初步研究[J];饲料工业;1998年03期
4 伍莉,陈鹏飞;pH值对黄鳝肠道和肝胰脏主要消化酶活力的影响[J];饲料工业;2002年08期
5 郑必锦;黄鳝配合饲料的试验研究[J];广东饲料;2003年06期
6 邓静,吴华昌,周健;木瓜蛋白酶研究进展[J];广西轻工业;2003年03期
7 陈琴;黄鳝生物学特性及饲养技术[J];广西畜牧兽医;2001年03期
8 彭勇,王忠彦,胡承,胡永松;地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶的研究Ⅱ碱性蛋白酶的提纯和性质研究[J];工业微生物;2000年04期
9 伍莉,陈鹏飞,幸坤财,李增林,胡春燕;黄鳝肠道和肝胰脏主要消化酶活力的研究[J];湖北农学院学报;2002年01期
10 邱学青,杨卓如,陈焕钦;碱性蛋白酶与表面活性剂的协同去污性能研究[J];华南理工大学学报(自然科学版);1995年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王共强;沈阳;杨晓梅;;几种植物粗提物对菜青虫取食行为的影响[J];安徽农学通报;2006年07期
2 张燕军;郑建旭;张爱军;李吉利;;植物化感作用研究方法综述[J];安徽农学通报;2008年21期
3 王艳;张自立;;镧对小麦矿质元素N吸收及相关酶活性的影响[J];安徽农业科学;2006年15期
4 温茹淑;郑清梅;刘兴隆;郭江山;方展强;李业松;杨业明;;复合微生物制剂对草鱼生长与消化酶活性的影响[J];安徽农业科学;2007年13期
5 冯培勇;程显好;杨立红;;茶薪菇产纤维素酶最佳液体发酵条件的研究[J];安徽农业科学;2008年03期
6 陶聪;李春涛;冯华久;王志坚;;红尾副鳅消化系统结构研究[J];安徽农业科学;2008年23期
7 罗艳萍;张家国;冷向军;;泥鳅幼鱼对饲料中蛋白质的适宜需要量研究[J];安徽农业科学;2009年18期
8 李园媛;邱丹;杨继军;;高原农作物豌豆抗氧化和脂质过氧化研究[J];安徽农业科学;2009年20期
9 黄家岭;乙引;张习敏;王岚;邹晶;;细菌脂肪酶的固定化研究[J];安徽农业科学;2009年25期
10 王刚;吕熹;李俊;郭明珠;王波;陈光;;有机溶剂耐受性脂肪酶的研究进展[J];安徽农业科学;2010年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张玉;宋翠艳;刘海涛;孙伟男;;达里诺尔湖和岗更湖瓦氏雅罗鱼血液生理指标的研究[A];第三届全国现代生态渔业管理与技术研究[C];2011年
2 闫云君;蔡勇;杨江科;;基于易错POR技术的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)脂肪酶YZO2的定向进化[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(一)[C];2007年
3 陈闽榕;陈丽娇;;水产品微冻保鲜技术研究与应用进展[A];福建省科协第七届学术年会分会场“食品冷冻与冷藏的安全与节能”技术研讨会论文集[C];2007年
4 林音;程贤甦;;木质素衍生物与胃蛋白酶的相互作用研究[A];2008全国功能材料科技与产业高层论坛论文集[C];2008年
5 林婉玲;关熔;曾庆孝;朱志伟;;彩鲷和普通罗非鱼不同部位营养及质构特性的研究[A];“食品加工与安全”学术研讨会暨2010年广东省食品学会年会论文集[C];2010年
6 张春梅;王成章;高永革;李振田;刘祥;史莹华;何云;刘圈炜;;含紫花苜蓿饵料对鲤鱼生长性能、肉品质及消化酶活性的影响[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
7 汪桂玲;徐航;陈志国;沈伟荣;;黄鳝性逆转过程中4种同工酶谱的比较[A];2005年上海市动物学会学术会议论文集[C];2005年
8 杨晶凡;韩茹;;酶反应技术在中药提取中的应用综述[A];第一届全国中药商品学术大会论文集[C];2008年
9 仲妍妍;李昂;王寿昆;王光瑛;;番鸭全血基因组DNA的提取与克隆[A];福建省科协第六届学术年会卫星会议“增强科技创新能力,促进优质畜牧业发展”研讨会论文集[C];2006年
10 张鸿伟;王凤山;;低分子肝素-超氧化物歧化酶结合物的二级结构分析[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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3 杨荣玲;酶法合成糖苷及其酯类衍生物的研究[D];华南理工大学;2010年
4 莫章桦;产双酶恶臭假单胞菌的选育与酶法制备D-pHPG[D];中南林业科技大学;2007年
5 范宏元;循膀胱经背俞穴弹拨法合针灸治疗寒湿阻络型大骨节病的临床研究[D];成都中医药大学;2010年
6 梁健钦;芒果苷糖酯衍生物的非水相酶促合成及其抗炎活性研究[D];广西医科大学;2011年
7 刘岩;物理及酶法改善热压榨花生粕蛋白功能特性的研究[D];华南理工大学;2011年
8 刘凯;改性壳聚糖微球固定化生物酶及其控制造纸白水中DCS物质的研究[D];华南理工大学;2011年
9 钟蕾;三角帆蚌细菌性瘟病病原学研究与LasB基因的克隆及表达[D];湖南农业大学;2011年
10 于博;普鲁兰酶的反向合成特性及应用研究[D];江南大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 于艳梅;魔芋甘露寡糖对黄颡鱼的益生功能研究[D];华中农业大学;2010年
2 闫建林;饲料中低蛋白和低脂肪对黄鳝性逆转的影响[D];华中农业大学;2010年
3 龚文杰;外源性丙酸睾酮对黄鳝性逆转的影响[D];华中农业大学;2010年
4 孟小亮;黄颡鱼肠道益生菌的筛选及其应用研究[D];华中农业大学;2010年
5 谷桂娜;介孔分子筛的合成及其孔道中脂肪酶固定化的研究[D];辽宁师范大学;2010年
6 张桂敏;宣木瓜果实中主要生理活性物质提取分离研究[D];安徽农业大学;2010年
7 韩美艳;桔梗多糖的提取、分离纯化和结构研究[D];郑州大学;2010年
8 李明珠;弗氏链霉菌S.fradiae S-221角蛋白酶基因的异源表达及酶学性质研究[D];郑州大学;2010年
9 郭晓红;嗜热毛壳菌热稳定脂肪酶的基因克隆、表达及性质研究[D];山东农业大学;2010年
10 于忠良;根霉ZM-10脂肪酶酶学性质和化学修饰[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 潘滨;谢月霞;戴君勇;;凡纳滨对虾蛋白酶的分离纯化及生化特性[J];水产科学;2009年12期
2 黄燕华;王国霞;刘襄河;周晔;程军德;;温度和pH对南美白对虾主要消化酶活性的影响[J];华南农业大学学报;2008年04期
3 林建城;陈郁花;林俊兵;;有机溶剂及变性剂对南美白对虾体壁几丁质酶的影响[J];海洋通报;2007年04期
4 杨文鸽;薛长湖;徐大伦;何雄;潘云娣;陈士国;;中华管鞭虾(Solenocera crassicornis)蛋白酶的纯化及其生化特性研究[J];海洋与湖沼;2006年01期
5 朱春华,李广丽,文海翔;南美白对虾早期幼体消化酶活力的研究[J];海洋科学;2003年05期
6 胡学智;;蛋白酶的生产和应用(中)[J];江苏调味副食品;2007年01期
7 黎军胜,李建林,吴婷婷;奥尼罗非鱼消化道蛋白酶分布与特性[J];南京农业大学学报;2004年01期
8 叶玫,吴成业,王勤,陈冰,刘智禹;鳗鲡消化道蛋白酶的初步分离提取及某些性质的研究[J];海洋学报(中文版);2000年03期
9 周景祥,王桂芹,余涛;蛋白酶和淀粉酶活性检测方法探讨[J];中国饲料;2001年11期
10 龚翠;周爱梅;戴结玲;黄烨;何建妹;谢锐田;;尼罗罗非鱼肠道碱性蛋白酶性质的研究[J];食品工业科技;2010年09期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 黎军胜;外源因子对罗非鱼消化酶活性和胰蛋白酶mRNA表达的影响[D];南京农业大学;2004年
2 刘忠义;草鱼消化系统蛋白酶生化特性的研究[D];江南大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 刘冰心;淡水鱼肌肉亮氨酸氨肽酶的分离纯化与性质研究[D];集美大学;2007年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 吴燕燕;王萍;李来好;杨贤庆;刁石强;;3种不同虾类虾头中酶的筛选[J];广东农业科学;2011年14期
2 孔繁东;苑艳纳;徐杨;;中国对虾蛋白酶性质的研究[J];食品工业;2012年05期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 曾端,叶元土,苏平;黄鳝蛋白酶和淀粉酶活力的研究[J];北京水产;1999年03期
2 刘有才;国内外洗涤剂和表面活性剂的发展概况与趋势[J];日用化学工业;1989年04期
3 桂远明,吴垠,刘焕亮,韩培琪,王莉,李群;温度对草鱼、鲤、鲢、鳙主要消化酶活性的影响[J];大连水产学院学报;1992年04期
4 张硕,赵艳;栉孔扇贝蛋白酶和淀粉酶活力的初步研究[J];大连水产学院学报;1997年01期
5 吴垠,孙建明,周遵春;温度对中国对虾、日本对虾主要消化酶活性的影响[J];大连水产学院学报;1997年02期
6 叶元土,林仕梅,罗莉,杨思华,陈文;温度、pH值对南方大口鲶、长吻鮠蛋白酶和淀粉酶活力的影响[J];大连水产学院学报;1998年02期
7 吴毅,肖瑞卿,林武存;9160例患者D抗原检测及配血分析[J];第三军医大学学报;1998年03期
8 王志玲;吴国犀;杨德国;刘乐和;;长江中上游大口鲶的年龄和生长[J];淡水渔业;1990年06期
9 陈鹏飞,伍莉,许南萍;不同外源激素促进黄鳝排卵的效果比较[J];淡水渔业;2001年03期
10 陈芳,刘百韬,杨代勤,李道霞;黄鳝配合饲料的初步研究[J];饲料工业;1998年03期
【相似文献】
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1 ;菌种的分离纯化和保存方法[J];农药;1970年Z3期
2 林栖凤,李冠一,周强;野鼠肝线粒体DNA的分离纯化[J];动物学杂志;1987年05期
3 尚克刚,周迅蕾,吴鹤龄;北京鸭HMGs和HP_1的分离纯化及其对细胞核体外转录的影响[J];遗传学报;1988年01期
4 鞠志国;苗德全;;莱阳荏梨苯丙氨酸解氨酶基本特性的研究[J];莱阳农学院学报;1988年01期
5 娄淑杰;刘俊熙;高士争;俞世福;;猪IgM的分离纯化及其抗血清的制备[J];青海畜牧兽医杂志;1991年04期
6 梁意昭;吴屏英;陈锦华;刘炽松;;中蜂蛹和意蜂蛹 脱氧核糖核酸的分离纯化和特性[J];中国蜂业;1991年05期
7 陈松林,邓文涛,刘宪亭,陈细华,龙华;草鱼垂体生长激素分离纯化及其抗体制备的研究[J];动物学报;1995年03期
8 向际尧,李鹏程,孙文东,努尔波拉提;牛早孕因子的分离纯化及其活性和含量测定[J];畜牧兽医学报;1995年02期
9 姚惠源,李友林,陈正行;玉米提取脂多糖的研究[J];粮食与饲料工业;1997年06期
10 李建华,张西臣,尹继刚,杨举,李德昌;隐孢子虫卵囊分离纯化的一种新方法[J];中国兽医学报;1998年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李浩华;章卫民;潘清灵;王磊;陶美华;;药用真菌毛蜂窝菌的栽培技术研究初报[A];中国菌物学会第四届会员代表大会暨全国第七届菌物学学术讨论会论文集[C];2008年
2 计红芳;杨谦;宋瑞清;;绒白乳菇发酵液抑菌活性成分的分离纯化及其结构鉴定[A];第八届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2007年
3 马建标;;中草药有效成分工业分离纯化新技术——新型吸附树脂的合成及其在天然药物分离纯化中的应用[A];第四届中国新医药博士论坛论文集[C];1999年
4 马莉;唐健元;李祖伦;冯少华;刘毅;金城;赵艳玲;肖小河;;板蓝根多糖分离纯化及其性质的初步研究[A];中医药学术发展大会论文集[C];2005年
5 涂琪顺;蔡光明;黄媛;王伽伯;岳鹏飞;;大孔树脂分离纯化半枝莲总黄酮的研究[A];2007中药药物创新与制药关键技术研讨会暨中华中医药学会中药化学中药制剂学术会议论文集[C];2007年
6 曹文红;李岢斐;;波纹巴非蛤ACE抑制肽的分离纯化[A];“亚运食品安全与广东食品产业创新发展”学术研讨会暨2009年广东省食品学会年会论文集[C];2009年
7 曾秋文;林华娟;秦小明;陈淑清;黄斌杰;;金花茶皂甙的初步分离纯化研究[A];“亚运食品安全与广东食品产业创新发展”学术研讨会暨2009年广东省食品学会年会论文集[C];2009年
8 石闻华;陈贵林;;HSCCC法分离纯化锁阳乙酸乙酯萃取部分中的化合物[A];第八届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2009年
9 彭素萍;王一明;林先贵;朱泓;;产高温蛋白酶菌株BY25的产酶特性及酶学研究[A];第五次全国土壤生物和生物化学学术研讨会论文集[C];2009年
10 高炳淼;唐天乐;郑晓冬;李宝珠;长孙东亭;罗素兰;;新型芋螺毒素K411基因在毕赤酵母中的表达研究[A];第九届中国生物毒素学术研讨会论文摘要[C];2009年
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1 马浩剑李昕;王柯:五年做到国内第一[N];常州日报;2007年
2 林诚;卡那霉素分离纯化新技术通过鉴定[N];医药经济报;2002年
3 王宏磊;中药苷类有效成分提取 辅料、工艺各不同[N];中国医药报;2006年
4 ;PCC分离纯化工艺进展速览[N];中国医药报;2006年
5 记者 王华锋;多数刺梨多糖组分具神经营养活性[N];中国医药报;2006年
6 林喆罗艳 原忠;分子印迹技术用于中药分离有据可依[N];中国医药报;2007年
7 本报记者 王繁泓;精细化 商品化 规模化[N];中国化工报;2002年
8 徐少亚 杨芳;植物提取液深加工用上膜技术[N];中国化工报;2003年
9 特约记者 高军光;核苷酸列入高技术产业化示范工程[N];中国化工报;2004年
10 本报记者 李琮;化学试剂:创新能力差需求难满足[N];中国化工报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陆志科;竹叶生物活性成分提取分离及其抗菌活性研究[D];中南林学院;2004年
2 王元凤;茶多糖的分离纯化、结构及构效关系研究[D];江南大学;2005年
3 徐金瑞;黑大豆种皮花色苷抗动脉粥样硬化及其抗氧化机制研究[D];西北农林科技大学;2006年
4 韩俊友;牛蛙皮肤抗菌肽分离纯化、基因克隆表达及生物学特性的研究[D];吉林大学;2007年
5 段冷昕;梅花鹿茸多肽的化学结构及其抗肝纤维化作用[D];吉林大学;2007年
6 陶红;金线鱼胃蛋白酶纯化鉴定及结构研究[D];华南理工大学;2007年
7 马春玲;海洋酵母普鲁兰类酵母碱性蛋白酶发酵生产、特性研究及基因克隆[D];中国海洋大学;2007年
8 何志勇;橄榄酚类化合物的分离纯化和结构研究[D];江南大学;2007年
9 魏文志;小球藻糖蛋白的分离纯化与体外预防肿瘤作用筛选的研究[D];江南大学;2008年
10 陈杰;高密度培养盘基网柄菌及重组可溶性人Fas配体表达的研究[D];浙江大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙磊;对虾白斑杆状病毒的分离纯化、超微结构及形态发生的研究[D];河北大学;2000年
2 赵涛;枯草芽孢杆菌A_(3-2)菌株的分离鉴定及其抗菌蛋白的分离纯化与性质研究[D];山东农业大学;2002年
3 闵丽娥;蜂王浆超氧化物歧化酶分离纯化及部分性质研究[D];四川大学;2002年
4 江琰;工蜂酸性磷酸酶的分离纯化及性质研究[D];四川大学;2003年
5 张素;广西产圆斑蝰蛇蛇毒神经生长因子的分离纯化、鉴定及神经生物学活性[D];福建医科大学;2003年
6 吴金鸿;绿豆中抗菌肽的分离纯化与表征及其晶体培养[D];福州大学;2004年
7 李燕;新疆鲜蒜中蒜氨酸酶的分离纯化及性质[D];新疆大学;2004年
8 陈晓超;苦瓜提取物中降糖物质的分离鉴定及其降糖机理的初步探讨[D];福州大学;2004年
9 王华祖;羊栖菜褐藻糖胶的分离纯化及性质研究[D];浙江大学;2004年
10 汪章勋;粉拟青霉蛋白酶分离纯化、基因克隆及液体发酵条件研究[D];安徽农业大学;2005年
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