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《西南大学》 2006年
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莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)cq菌株(Nr-cq0310)的研究

涂增  
【摘要】:莱氏野村菌是一种重要昆虫病原真菌,可以感染许多重要的经济害虫如棉铃虫(Helicoverpa armigera),斜纹夜蛾(Spodoptera litura),粉纹夜蛾(Trichoplusia,ni)等,并在田间引发多种害虫病害流行病,在害虫综合防治(IPM)中有很大的应用潜力。国外对此菌研究较早,但国内研究较少。本实验室从蚕体分离到一菌株(Nr-cq0310菌株),对其形态学进行了研究,并初步阐明了其生长发育、培养和感染等相关问题;此外,对其影响其生长发育的环境因子也进行了研究,明确了适宜菌株生长、发育和产孢的环境因素;最后,初步研究了其致病性及规模培养。研究结果如下: 1.莱氏野村菌cq(Nr-cq0310)菌株的形态学 分生孢子呈卵圆形或椭圆形,一端稍尖,一端略钝;孢子表面光滑,淡绿色。有些孢子之间有连接,并且孢子末端具明显的末端残留物。分生孢子大小为3.2-4.6×2.5-3.2μm;分生孢子梗直立,单生,大小-160×3.2-5.1μm,3-4个轮状分支,分支处着生2-3个瓶梗,梗单列或者双列。瓶梗基部膨大,具短尖,其上着生一个或多个分生孢子。经比较,此菌株隶属于野村属,是模式种莱氏野村菌的不同菌株,命名为莱氏野村菌cq(Nr-cq0310)菌株。分生孢子接种到培养基上,24h开始发芽,大多为随机一端发芽,但也有孢子两端(两极)发芽现象。芽管尖端的菌丝向孢子内侧弯曲。内容物经芽管释放后,孢子颜色随之变浅。菌丝由芽管伸长形成,分支,几天后扩展成菌丝体。 2.菌株固体和液体培养 研究发现固体斜面上,菌株的产孢能力明显优于白僵菌,培养7-10天菌株可见大量绿色分生孢子生成,后期孢子大量堆积,呈灰绿色,而白僵菌菌丝生长丰富,仅检测到少量分生孢子;平板培养时,菌株分泌物质刺激培养基,使培养基形成突起,菌落小,扩散慢。菌落边缘先生成环形外圈绿色孢子粉层,后向中心蔓延,慢慢出现绿色分生孢子层,孢子堆干燥结构松散,较容易飞散;液体振荡培养,接种2-3天后菌丝纠集呈菌膜样团块粘附到孢壁,随培养时间延长越来越大,最后形成紧密的菌丝球,周边呈辐射状菌丝分布,较均匀。 3.对家蚕的感染形态 家蚕体内感染研究发现,感染的家蚕体内有大量豆荚状或筒状或酵母状芽生孢子。感染后3-4天,血液镜检就可见短菌丝,再过1-2天芽生孢子大量出现,此时蚕血液出现乳白色浑浊。芽生孢子豆荚状,明显隔膜;有的酵母状,有隔膜,在靠近隔膜处形成液泡样空泡,总体呈酵母状;有的芽生孢子圆筒状,清晰隔膜,在芽生孢子中间两个隔膜靠近中点处,有明显的突起,几乎每个芽生孢子都见,另外可见两隔膜中间细胞的孢质等内容物呈絮团状向突起聚集,推测突起可能为孢子发育分支扩展的起始步骤。家蚕感染后,2-3大出现轮状病斑,中间颜色浅,外周颜色深,为褐色,在腹侧病斑较多。蚕取食减缓,行动呆滞,蚕体紧绷(甚至有点发亮),有弹性,头部稍稍伸直,身体逐渐硬化。高湿度条件下,1天后虫尸布满白色菌
【学位授予单位】:西南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S476.12

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