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《西南大学》 2006年
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夏橙绿斑病发生、危害和病原遗传多样性研究

王大平  
【摘要】：柑桔是世界上最重要的果树作物之一。我国是柑桔的原产地，柑桔栽培历史悠久。2005年，我国柑桔栽培面积居世界首位，总产量居世界第二。柑桔生产已经成为我国南方农村的支柱产业之一，对促进农村经济、社会发展以及山区农民脱贫致富起到了重要作用。柑橘也是重庆市的重要栽培水果，其栽培面积大、产量高、效益好，在全国享有盛名，特别是重庆市三峡库区河谷地带，为柑橘生长的最适宜生态区，被农业部确定为长江上中游优势柑橘产业带。夏橙果实于每年4～5月成熟，是重要的淡季水果和橙汁加工重要原料，无论鲜销和制汁，在重庆柑桔产业中都占有举足轻重的地位。 随着我国国民经济的高速发展，人民生活水平的不断提高，人们对果品质量要求也越来越高。加入WTO之后，我国柑橘业将面临与国际柑橘生产市场激烈竞争的局面，柑橘果实品质已成为竞争成败的关键。在这个新形势下，为了使重庆市三峡库区夏橙产业做大做强，在提高单位面积产量的同时，还必须改善果品质量。近年来，作者在重庆长寿区夏橙基地发现夏橙果实上有一种新病害，果实从转色起到成熟，果面上出现大小不等的绿色污斑。进一步调查发现此病在夏橙树的叶片、枝干上和三峡库区其它夏橙园中均存在。关于夏橙绿斑病，目前尚未见报道。笔者在此对夏橙绿斑病的发生、危害、防治以及病原遗传多样性等进行了系统研究和探讨，为重庆三峡库区夏橙产业的可持续发展，为夏橙产量的提高、果实品质的改善等提供依据。主要研究结果如下： 1、夏橙绿斑病病原、生物学特性和发病规律研究 对重庆夏橙基地发生的夏橙绿斑病症状和病原藻形态进行了观察，并进行了病原藻分离、致病
【关键词】：夏橙 绿斑病 危害 控制 遗传多样性
【学位授予单位】：西南大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：S436.66
【目录】：
  • 中文摘要6-10
  • ABSTRACT10-15
  • 缩略语表15-26
  • 第一章 绪论26-35
  • 1 课题的提出26-27
  • 2 国内外关于病原藻的危害研究概况27-29
  • 3 分子标记及其在藻类遗传多样性研究中的应用29-33
  • 3.1 分子标记的种类及特点29-31
  • 3.2 ISSR的原理和特点31-32
  • 3.3 分子标记在藻类遗传多样性研究中的应用32-33
  • 4 主要研究内容和研究目的33-35
  • 第二章 夏橙绿斑病病原、生物学特性和发病规律35-60
  • 1 材料与方法35-41
  • 1.1 试验材料35-36
  • 1.2 主要仪器设备36
  • 1.3 供试培养基36-38
  • 1.4 试验方法38-41
  • 1.4.1 夏橙绿斑病发生情况调查38-39
  • 1.4.2 夏橙绿斑病病原的分离、鉴定39-40
  • 1.4.3 病原藻的生物学特性研究40-41
  • 1.4.4 田间夏橙绿斑病发生规律研究41
  • 2 结果与分析41-57
  • 2.1 夏橙绿斑病发生情况41-45
  • 2.2 夏橙绿斑病症状45
  • 2.3 夏橙绿斑病病原的确定45-48
  • 2.3.1 病原藻的分离、纯化45
  • 2.3.2 致病性测定45-47
  • 2.3.3 病原藻的形态描述及鉴定47-48
  • 2.4 夏橙绿斑病原藻的生物学特性48-51
  • 2.4.1 温度对藻细胞生长的影响48-49
  • 2.4.2 光照对藻细胞生长的影响49
  • 2.4.3 pH值对藻细胞生长的影响49-50
  • 2.4.4 葡萄糖对藻细胞生长的影响50-51
  • 2.5 夏橙绿斑病发生规律51-57
  • 2.5.1 病原藻在夏橙树上的越夏场所51
  • 2.5.2 病原藻在夏橙树上的越冬场所51-52
  • 2.5.3 病原藻的其它越夏场所52-53
  • 2.5.4 病原藻的其它越冬场所53-54
  • 2.5.5 病原藻的寄生部位和时期54-55
  • 2.5.6 夏橙绿斑病的田间消长规律55-57
  • 3 讨论57-60
  • 3.1 夏橙绿斑病及其病原藻57-59
  • 3.2 夏橙绿斑病的发生规律59-60
  • 第三章 夏橙叶片感染绿斑病后的解剖学和超微结构研究60-74
  • 1 材料与方法60-64
  • 1.1 试验材料60
  • 1.2 主要仪器设备60
  • 1.3 主要试剂60-61
  • 1.4 方法61-64
  • 1.4.1 叶片的体视镜观察61
  • 1.4.2 叶片表皮离析观察61
  • 1.4.3 叶片横切面的解剖结构观察61
  • 1.4.4 叶片的透射电镜观察61-64
  • 2 结果与分析64-67
  • 2.1 叶片正面观的观察64-65
  • 2.1.1 叶片表面观察64-65
  • 2.1.2 叶片表皮离析观察65
  • 2.2 叶片横切面的解剖结构观察65-66
  • 2.2.1 健康叶片的解剖结构65
  • 2.2.2 病叶叶片解剖结构65-66
  • 2.2.3 夏橙叶片内的油胞66
  • 2.2.4 夏橙叶片表皮66
  • 2.3 夏橙叶片的超微结构66-67
  • 3 讨论67-74
  • 3.1 病原藻对叶片外观结构的影响67
  • 3.2 病原藻矿质营养的来源途径67
  • 3.3 绿斑病叶片病理学解剖结构67-68
  • 3.4 病原藻对叶片超微结构的影响68-74
  • 第四章 夏橙绿斑病对夏橙叶片生理生化的影响74-98
  • 1 材料与方法75-81
  • 1.1 试验材料75
  • 1.2 主要仪器75
  • 1.3 主要试剂75-76
  • 1.4 试验设计76
  • 1.5 测定项目与方法76-81
  • 1.5.1 光合日变化的测定76
  • 1.5.2 光合作用参数的测定76
  • 1.5.3 叶绿素荧光参数的测定76-77
  • 1.5.4 光合色素含量的测定77
  • 1.5.5 希尔反应的测定77
  • 1.5.6 叶片含氮量的测定77-78
  • 1.5.7 叶片中水解氨基酸含量的测定78
  • 1.5.8 叶片中游离脯氨酸含量的测定78
  • 1.5.9 叶片中可溶性蛋白质含量的测定78-79
  • 1.5.10 叶片中硝酸还原酶活性的测定79
  • 1.5.11 叶片质膜透性的测定79
  • 1.5.12 叶片中丙二醛的测定79
  • 1.5.13 叶片中超氧阴离子自由基的测定79-80
  • 1.5.14 叶片中过氧化氢含量的测定80
  • 1.5.15 叶片中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶的测定80-81
  • 1.5.16 试验数据处理81
  • 2 结果与分析81-94
  • 2.1 绿斑病对夏橙叶片光合日变化的影响81-84
  • 2.1.1 环境因子的日变化81-82
  • 2.1.2 绿斑病对夏橙叶片净光合速率(Pn)日变化的影响82
  • 2.1.3 绿斑病对夏橙叶片胞间CO_2浓度(Ci)日变化的影响82
  • 2.1.4 绿斑病对夏橙叶片蒸腾速率(Tr)日变化的影响82-84
  • 2.1.5 绿斑病对夏橙叶片气孔导度(Gs)日变化的影响84
  • 2.1.6 绿斑病对夏橙叶片气孔限制值(Ls)日变化的影响84
  • 2.2 绿斑病对夏橙叶片光合作用特性的影响84-87
  • 2.2.1 绿斑病对夏橙叶片光合色素含量的影响84-85
  • 2.2.2 绿斑病对夏橙叶片希尔反应活性的影响85-86
  • 2.2.3 绿斑病对夏橙叶片Pn、Gs、Ci和Ls的影响86
  • 2.2.4 绿斑病对夏橙叶片叶绿素荧光参数的影响86-87
  • 2.3 绿斑病对夏橙叶片氮代谢的影响87-91
  • 2.3.1 绿斑病对夏橙叶片氮含量的影响88
  • 2.3.2 绿斑病对夏橙叶片水解氨基酸含量的影响88-89
  • 2.3.3 绿斑病对夏橙叶片游离脯氨酸含量的影响89-90
  • 2.3.4 绿斑病对夏橙叶片可溶性蛋白含量的影响90
  • 2.3.5 绿斑病对夏橙叶片硝酸还原酶活性的影响90-91
  • 2.4 绿斑病对夏橙叶片脂质过氧化的影响91-94
  • 2.4.1 绿斑病对夏橙叶片膜透性的影响91-92
  • 2.4.2 绿斑病对夏橙叶片MDA含量的影响92
  • 2.4.3 绿斑病对夏橙叶片超氧阴离子自由基(O_2~-)产生速率的影响92-93
  • 2.4.4 绿斑病对夏橙叶片H_2O_2含量的影响93
  • 2.4.5 绿斑病对夏橙叶片SOD、POD和CAT含量的影响93-94
  • 3 讨论94-98
  • 3.1 绿斑病藻寄生引起夏橙叶片的光合日变化94-95
  • 3.2 绿斑病藻寄生引起夏橙叶片的光合特性变化95-96
  • 3.3 绿斑病藻寄生对夏橙叶片氮代谢的影响96
  • 3.4 绿斑病藻寄生与夏橙叶片的脂质过氧化96-98
  • 第五章 夏橙绿斑病对夏橙果实品质的影响98-114
  • 1 材料与方法98-101
  • 1.1 试验材料98
  • 1.2 主要仪器98-99
  • 1.3 主要试剂99
  • 1.4 试验设计99
  • 1.5 测定内容及方法99-101
  • 1.5.1 果实大小和果形指数的测定99
  • 1.5.2 果皮颜色的测定99-100
  • 1.5.3 果皮中叶绿素和类胡萝卜素含量的测定100
  • 1.5.4 果皮中花青素含量的测定100
  • 1.5.5 果实可食率和出汁率的测定100
  • 1.5.6 果实中可溶性固形物含量的测定100
  • 1.5.7 果实中糖含量的测定100-101
  • 1.5.8 果实中总酸含量的测定101
  • 1.5.9 果实中Vc含量的测定101
  • 1.5.10 果实中蛋白质含量的测定101
  • 1.5.11 果实中水解氨基酸含量的测定101
  • 1.5.12 果实中矿质元素含量的测定101
  • 2 结果与分析101-111
  • 2.1 绿斑病对夏橙果实外观品质的影响101-105
  • 2.1.1 绿斑病对夏橙果实色泽的影响101-102
  • 2.1.2 绿斑病对夏橙果皮色素含量的影响102-104
  • 2.1.3 绿斑病对夏橙果实大小和果形的影响104-105
  • 2.2 绿斑病对夏橙果实内在品质的影响105-111
  • 2.2.1 绿斑病对夏橙果实糖酸含量的影响105-107
  • 2.2.2 绿斑病对夏橙果实可食率、出汁率、Vc、蛋白质和氨基酸含量影响107-109
  • 2.2.3 绿斑病对夏橙果实矿质元素含量的影响109-111
  • 3 讨论111-114
  • 3.1 绿斑病对夏橙果实外观品质的影响111-112
  • 3.2 绿斑病对夏橙果实内在品质的影响112-114
  • 第六章 夏橙绿斑病调控初探114-129
  • 1 材料与方法115-119
  • 1.1 化学药剂对绿斑病藻的室内毒力测定115-116
  • 1.1.1 供试藻种115
  • 1.1.2 供试药剂115
  • 1.1.3 主要仪器与药品115-116
  • 1.1.4 藻细胞的预培养116
  • 1.1.5 生物量的测定116
  • 1.1.6 毒性测定116
  • 1.2 化学药剂对夏橙绿斑病的田间药效试验116-118
  • 1.2.1 试验时间及地点116
  • 1.2.2 试验药剂116-117
  • 1.2.3 供试品种及防治对象117
  • 1.2.4 试验处理117
  • 1.2.5 施药方法117
  • 1.2.6 调查方法117-118
  • 1.2.7 药效计算方法118
  • 1.3 套袋对夏橙果实绿斑病的防治试验118-119
  • 1.3.1 试验地点、品种118
  • 1.3.2 套袋材料118
  • 1.3.3 套袋方法118
  • 1.3.4 试验处理118-119
  • 1.3.5 绿斑病果实的调查119
  • 1.3.6 果实外观和内质的测定119
  • 2 结果与分析119-127
  • 2.1 藻细胞浓度与光密度的相关性119
  • 2.2 13种化学药剂对夏橙绿斑病藻的室内毒力测定119-120
  • 2.3 5种化学药剂对夏橙绿斑病的田间防治效果120-122
  • 2.3.1 5种化学药剂对夏橙叶片上绿斑病的防治效果120-121
  • 2.3.2 5种化学药剂对夏橙果实上绿斑病的防治效果121-122
  • 2.4 套袋对夏橙果实上绿斑病发生的影响122-123
  • 2.5 套袋对夏橙果实外观品质的影响123-127
  • 2.5.1 套袋对夏橙果实色泽的影响123-124
  • 2.5.2 套袋对夏橙果皮色素含量的影响124-125
  • 2.5.3 套袋对夏橙果实大小、果形、可食率和出汁率的影响125-126
  • 2.5.4套袋对夏橙果实可溶性固形物、总糖、可滴定酸和维生素C的影响126-127
  • 3 小结与讨论127-129
  • 3.1 化学药剂对夏橙绿斑病的影响127-128
  • 3.2 套袋对夏橙果实绿斑病和果实品质的影响128-129
  • 第七章 夏橙绿斑病原藻分离株的遗传多样性129-140
  • 1 材料与方法129-134
  • 1.1 供试藻株129-130
  • 1.2 藻株培养130
  • 1.3 主要仪器设备130
  • 1.4 主要试剂130-131
  • 1.5 病原藻基因组DNA提取131-132
  • 1.6 ISSR的PCR扩增反应及电泳检测132-133
  • 1.7 数据处理133-134
  • 2 结果与分析134-138
  • 2.1 4株虚幻球藻分离株形态比较134
  • 2.2 4株虚幻球藻分离株培养基上的生长情况和颜色134-136
  • 2.3 4株虚幻球藻分离株的ISSR扩增结果分析136-137
  • 2.4 4株虚幻球藻分离株的聚类分析137-138
  • 3 讨论138-140
  • 3.1 虚幻球藻分离株的表型多样性138
  • 3.2 虚幻球藻分离株的遗传多样性138-140
  • 结论与创新点140-142
  • 参考文献142-152
  • 在读期间发表或已录用的学术论文152-154
  • 致谢154

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中国期刊全文数据库 前10条
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2 闫咏,马家海,许璞,孙其焕,王汉清;1株引起条斑紫菜绿斑病的柠檬假交替单胞菌[J];中国水产科学;2002年04期
3 张丽霞,郭延奎,黄晓琴,向勤锃,夏文娟,贾明;茶树叶片荧光性绿斑病的初步研究[J];茶叶科学;2005年01期
4 王大平;李道高;;夏橙绿斑病田间药剂防治试验[J];中国南方果树;2006年05期
5 林秋生;闵建;闫咏;周亚文;梁丽;杜海欧;马家海;;条斑紫菜绿斑病及其相关生态因子的初步研究[J];渔业现代化;2007年04期
6 王大平;;夏橙绿斑病发生特点及防治[J];林业实用技术;2007年04期
7 丁怀宇;;条斑紫菜绿斑病发病进程研究[J];安徽农业科学;2008年11期
8 王大平;刘奕清;李道高;;套袋对夏橙果实绿斑病发生及果实品质的影响[J];西南农业大学学报(自然科学版);2006年04期
9 王大平;;绿斑病对伏令夏橙果实品质的影响[J];安徽农业科学;2009年22期
10 ;日本茶树的两种新病害[J];农业科技通讯;1973年03期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 严兴洪;周晓;陈俊华;李琳;梁志强;;一种坛紫菜新细菌病害的研究[A];中国水产学会第五届青年学术年会摘要集[C];2004年
2 严兴洪;黄林彬;周晓;李琳;;坛紫菜的一种新细菌病害[A];中国海洋湖沼学会藻类学分会第七届会员大会暨第十四次学术讨论会论文摘要集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 王大平;夏橙绿斑病发生、危害和病原遗传多样性研究[D];西南大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 严巧巧;石棉黄果柑叶片苔藓发生规律及防治技术研究[D];四川农业大学;2013年
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相关机构
>西南大学
>四川农业大学
相关作者
>严巧巧 >王大平
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