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反式脂肪酸检测方法的建立及应用

魏丽芳  
【摘要】: 反式脂肪酸(Trans fatty acids,简称TFA or TAFs)是含有反式构型双键的一类不饱和脂肪酸的总称,反式脂肪酸的摄入严重威胁人类健康,诸如影响必需脂肪酸的消化吸收、导致心血管疾病的发生、导致大脑功能的衰退。反式脂肪酸的研究已受到国外学者的高度重视。国内对反式脂肪酸的研究才刚刚起步,还没有普遍接受的反式脂肪酸检测标准方法。 为了建立一种快速有效的反式脂肪酸检测方法,本文比较了氢氧化钾—甲醇、甲醇钠—甲醇、三氟化硼—甲醇、浓硫酸—甲醇4种甲酯化衍生方法对实验材料—奶油中反式脂肪酸检测的影响,以反式脂肪酸的响应峰面积值为考察目标,筛选出最佳甲酯化衍生方法。然后对选择的甲酯化衍生试剂的用量、浓度、甲酯化稳定时间等进行选择,并对仪器条件优化,初步建立反式脂肪酸检测方法。利用此方法测定多种油脂、油脂食品、煎炸油中的反式脂肪酸含量。试验结果如下: 1、试验过程中奶油取样量相同,以6种反式脂肪酸的响应峰面积值为考察目标比较4种甲酯化衍生方法,其中三氟化硼—甲醇法处理得到的反式脂肪酸响应值均最大,浓硫酸—甲醇法处理得到的反式脂肪酸响应值最小。C18:1-9t(反油酸)为最常见反式脂肪酸,三氟化硼—甲醇法处理时峰面积值为347.09,浓硫酸—甲醇法处理时峰面积值为18.21。 2、通过4种常见的脂肪酸前处理方法比较,最终确定在取样量30mg,2ml10%三氟化硼-甲醇溶液为甲酯化试剂,温度100℃密封加热15min,2ml正己烷常温下漩涡震荡萃取为反式脂肪酸最佳前处理条件。 3、仪器检测条件的优化: 色谱柱:Rt-2560(100m~*0.25mm~*0.2μm): 程序升温:140℃保持2min,以3℃/min速度升至240℃,保持10min; 载气:He,恒流模式;流速:2ml/min; 进样口温度:250℃; 检测器:FID,280℃; 进样方式:分流进样,分流比:1:50; 气体配比:氮气:氢气:空气=45:30:300;进样体积:1μl; 4、内标法确定常见食用油及油脂食品中反式脂肪酸种类主要为:C14:1-9t、C16:1-9t、C18:1-9t、C18:2-9t,12t及C18:2-9t,12c、C18:2-9c,12t六种。 5、应用建立的反式脂肪酸检测方法,测定常见食用油及油脂食品中反式脂肪酸含量。食用油以菜籽油中反式脂肪酸含量最高,达到1.2g/100g。食品中以奶油反式脂肪酸含量最高为3.55g/100g;膨化食品次之2.33g/100g。 6、煎炸油中反式脂肪酸的动态变化监测是该检测方法的又一实际应用,随着煎炸时间的延长,各种类反式脂肪酸绝对含量逐渐增加。


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