收藏本站
《西南大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

家蚕表皮型几丁质合成酶基因的克隆及表达分析

占智高  
【摘要】: 昆虫表皮在昆虫的生长发育过程中起着非常重要的重用,而表皮结构及功能的完整性在很大程度上依赖于几丁质对表皮结构的维系。昆虫中负责几丁质合成酶(CHS)基因陆续得到了解析,然而在家蚕中尚没有相关报道。 通过对昆虫CS表达谱、基因的体外干涉、突变体表型的研究表明昆虫表皮具有一个转移的几丁质合成酶,负责其几丁质的合成。几丁质合成发生障碍将直接影响表皮结构,表皮中蛋白质的分布和功能也将发生异常。因而,几丁质合成代谢受阻会影响到昆虫在各个变态时期的生长。 家蚕是重要的经济昆虫,同时也是鳞翅目模式昆虫。由于几丁质不存在于哺乳动物体内,因此,几丁质合成酶也就成为生物防治的一个重要靶标。对于家蚕几丁质合成酶的研究有助于了解家蚕几丁质合成酶的作用机理,为其在害虫防治方面的利用奠定基础。本文利用家蚕基因组数据,全基因组芯片数据分析了家蚕BmCHS1的基因序列及结构;利用分子克隆技术获得了该基因的全长cDNA片段,分析了其时期及组织表达谱,另外还分析了它的进化分析。主要结果如下: 1.家蚕BmCHS1基因的全长cDNA克隆 通过生物信息分析,我们在家蚕基因组数据库中筛选得到一个几丁质合成酶基因的部分基因组片段,以此为基础,结合EST数据,采用分子克隆的方法,得到该基因的全长cDNA序列,命名为BmCHSl。BmCHSl全长5293bp,其中ORF框为4188bp,5′UTR为726bp,3’UTR为379bp。 2.家蚕BmCHS1基因的结构 经过分析发现,家蚕BmCHSl位于4号染色体上,具有21个外显子,20个内含子。且通过在线软件分析发现BmCHS1编码的蛋白质具有13个跨膜螺旋,为一个理论等电点6.32,分子量159.5kDa的多次跨膜的蛋白质。使用SignalP 3.0 Server分析发现前17个氨基酸可能为信号肽。对基因5’段序列分析发现,上游存在着包括hunchback,Br-C等7个转录因子的调控位点。 3.家蚕BmCHS1基因的序列进化分析 通过将各种昆虫CHS1蛋白进行多序列比对分析发现,CHS1和其他存在于昆虫表皮中的几丁质合成酶表现出更高的同源性,且家蚕BmCHS1和同属于鳞翅目的甜菜夜蛾的CHS1之间的同源性明显高于和其他昆虫。分析还发现各种昆虫的几丁质合成酶与真菌的几丁质合成酶之间的进化距离较远。 4.家蚕BmCHS1基因的时空表达特征 通过RT-PCR分析家蚕BmCHS1基因在5龄3天各个组织中的表达发现,BmCHS1基因主要表达于外胚层来源的头,气管和表皮中,在其他组织中未见表达。通过家蚕全基因组芯片分析发现这个基因在整个发育时期都有表达,但是在昆虫各个眠期及变态时期都呈现高量表达,说明BmCHSl基因的表达可能受到蜕皮激素的调控。
【学位授予单位】:西南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S881.26;Q78

手机知网App
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 朴冬花;樊东;;甘蓝夜蛾几丁质合成酶基因片段的克隆与序列分析[J];东北农业大学学报;2008年09期
2 ;Molecular Cloning and Sequence Analysis of Chitin Synthase cDNA from Mamestra brassicae (L.) (Lepidoptera: Noctuidae) Cuticle[J];Journal of Northeast Agricultural University(English Edition);2010年03期
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 樊东;几种鳞翅目昆虫几丁质酶基因的克隆与表达研究[D];东北农业大学;2004年
2 周洪旭;两种鳃金龟围食膜及其结构蛋白的分离鉴定[D];山东农业大学;2009年
3 林晨;茶尺蠖几丁质合成酶基因克隆及其双链干涉重组病毒毒力研究[D];浙江大学;2010年
4 杨文佳;桔小实蝇几丁质和保幼激素合成与代谢中重要基因的研究[D];西南大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 姜俊义;对虾甲壳形成机理初步研究[D];中国海洋大学;2004年
2 孙小洁;甜菜夜蛾cDNA文库的构建及几丁质合成酶基因片段的克隆[D];四川农业大学;2005年
3 孔令斐;家蚕几丁质酶与几丁质合成酶的基因表达与功能研究[D];苏州大学;2010年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 杨化恩;刘守柱;李友忠;杜翠敏;;昆虫几丁质合成酶及其抑制剂[J];昆虫知识;2007年05期
2 梁晓飞;刘博;朱琳;张晓羽;王晓杰;黄丽丽;康振生;;小麦条锈菌Ⅱ类几丁质合成酶基因PstChsⅡ的克隆及表达特征[J];微生物学报;2009年12期
3 唐斌;王世贵;张文庆;;甜菜夜蛾几丁质合成酶基因A和B启动子的克隆[J];昆虫学报;2009年07期
4 朴冬花;樊东;;甘蓝夜蛾几丁质合成酶基因片段的克隆与序列分析[J];东北农业大学学报;2008年09期
5 陆建良;林晨;杨晓丽;郑新强;梁月荣;;昆虫几丁质合成酶特性预测[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);2008年05期
6 刘晓健;杨美玲;张建琴;马恩波;张建珍;;氟虫脲对东亚飞蝗和中华稻蝗几丁质合成酶基因表达的影响[J];昆虫学报;2010年09期
7 ;产黄青霉几丁质合成酶基因的克隆及系统学分析(英文)[J];安徽农业大学学报(自然科学版);1999年03期
8 孙金钟,钱振国,孙文奇,焦书法;苏脲Ⅰ号防治枣步曲及对蜜蜂的安全问题[J];植物保护;1982年04期
9 侯林;灭幼脲使用技术[J];新疆林业;1986年06期
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 曹涤环 成海清;新型园林用杀虫剂除虫脲[N];中国花卉报;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 孙小洁;甜菜夜蛾cDNA文库的构建及几丁质合成酶基因片段的克隆[D];四川农业大学;2005年
2 邓乔;几丁质合成酶抑制剂喹啉-2(1H)酮类新化合物的设计合成与生物活性研究[D];西南大学;2014年
3 冀颖;哈茨木霉Th-33ThChsC基因的克隆及功能初步分析[D];中国农业科学院;2011年
4 何君;昆虫生长调节剂对赤拟谷盗幼虫生物活性及作用机理初探[D];武汉工业学院;2011年
5 王颖;褐飞虱和灰飞虱几丁质合成酶及其两个可变外显子的研究[D];浙江大学;2012年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026