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《成都体育学院》 2019年 硕士论文
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有氧运动对CUMS大鼠学习记忆及海马SYP、PSD-95的影响

胡湘  
【摘要】:目的:目前抑郁症已成为国内外精神类疾病研究的热点,本实验希望寻找一种更为安全有效的预防和治疗方法。方法:建立慢性不可预见性温和应激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型,并在建模的不同时间点进行有氧运动干预,探讨有氧运动对抑郁大鼠学习记忆及海马突触素(Synaptophysin,SYP)、突触后致密蛋白95(Postsynaptic Density Protein 95,PSD-95)的影响,并比较不同时间点进行有氧运动干预的效果。选择48只3月龄雄性SPF级SD大鼠作为本实验的研究对象,随机分组情况如下:(1)对照组(C组),自然饲养,共计八周。(2)模型组(M组),四周建立CUMS模型后,自然饲养四周,共计八周。(3)模型运动组(S1组),四周建立CUMS模型,同时进行四周有氧运动干预,自然饲养四周,共计八周。(4)运动组(S2组),四周建立CUMS模型后,进行四周有氧运动干预,共计八周。实验中每天称量所有大鼠的体重。根据实验进度安排,通过一般状态、体重、糖水偏好实验、旷场实验以及Elisa实验,验证是否成功建立CUMS模型。大鼠的学习记忆能力通过Morris水迷宫结果反映。取材制备标本后,采用免疫荧光、Western Blotting以及Real-Time PCR技术进行检测各组大鼠海马的SYP、PSD-95的表达。结果:(1)建模结果:(1)一般状态:C组大鼠情绪稳定,毛发光滑、有弹性,进水量基本不变;M组大鼠进水量下降、身形消瘦;S1组大鼠整体情况较为稳定;S2组大鼠在干预后,进水量基本维持不变,日常状态稳定。(2)体重称量:建模前,各组大鼠体重没有差异;建模后M组、S1组、S2组大鼠体重在第14、21、28天时均低于C组(P0.01)。(3)糖水实验:建模后,M组和S2组大鼠的糖水消耗比均显著性低于C组(P0.01)。(4)旷场实验:M组大鼠的活跃度、平均速度、中央区域时间、中间区域路程和总路程均显著性降低(P0.05)。(2)Morris水迷宫:定位航行实验,各组大鼠的平均逃避潜伏期从第三天开始缩短并趋于稳定,各组间出现显著的差异性(P0.05)。空间探索实验,M组大鼠穿越原站台次数显著减少(P0.01)。(3)离体实验结果:(1)ELISA检测结果:M组大鼠全脑DA含量显著低于其余三组(P0.01)。(2)HE染色:C组大鼠海马DG区神经元形态结构最为整齐;M组排列出现紊乱,数量明显减少,细胞彼此间的距离加大,细胞核出现固缩使得细胞结构不完整;S1组、S2组大鼠海马神经元情况稍好于M组。(3)免疫荧光:M组大鼠海马DG区SYP、PSD-95的IOD值均低于其余三组(P0.05)。(4)Western Blotting:M组大鼠海马SYP、PSD-95蛋白含量显著低于其余三组(P0.01)。(5)Real-Time PCR:M组大鼠海马SYP、PSD-95的mRNA表达水平显著低于其余三组(P0.05)。结论:(1)通过一般状态、体重、糖水消耗实验、旷场实验发现大鼠出现行为异常,ELISA实验检测发现大鼠全脑多巴胺含量减少,从行为层次和生理生化水平验证,本实验建立CUMS模型成功。(2)CUMS模型大鼠的空间学习记忆能力减弱,并且大鼠海马SYP、PSD-95的表达降低。(3)在建模的不同时间点进行有氧运动干预,都能够增加大鼠海马SYP、PSD-95的表达,进而改善学习记忆能力,说明每天60分钟的有氧运动能够有效防治抑郁症的发生发展。


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