收藏本站
《贵阳中医学院》 2013年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

按摩动态力学刺激防治肥胖对前脂肪细胞增殖和分化功能的影响及机制研究

周烨泓  
【摘要】:目的:体外培养前脂肪细胞,通过对该细胞进行力学刺激观察按摩动态力学刺激对前脂肪细胞增殖的影响及过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferators-activated receptor PPAR)、转录因子CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT enhancer binding protein C/EBP)、脂联素结合受体(AdipodR1、AdipodR2)表达的变化,为推拿按摩可以防治单纯性肥胖提供实验依据,从分子生物角度认识中医推拿作用于人体后前脂肪细胞生物学功能的影响。 方法:1、以清洁级80g-100g(1-2月龄)的SD雄性大鼠(Sprague Dawley Rat)为实验材料,无菌操作采集附睾周围白色脂肪组织,利用酶消化法培养前脂肪细胞,分别从形态学角度和油红0染色技术鉴定前脂肪细胞。将原代前脂肪细胞传代至P3代,作为后续试验的平台。2、将前脂肪细胞随机分为六组,OR/min组、60R/min组、90R/min组、120R/min组、150R/min组、180R/min组。经24h培养同步化后,根据相应的组别加载力不同强度的刺激,每日刺激2次,每次时长30min,间隔时间为12h,连续3日,共计刺激6次。刺激结束后,利用MTT法检测细胞生长活力法检测各组细胞的活力变化。3、重复方法二中对前脂肪细胞的分组加力刺激,刺激结束后,收集细胞提取总RNA,利用RT-PCR半定量技术分析AdipodR1、 AdipodR2、PPAR及C/EBP基因表达的变化;收集细胞提取总蛋白,利用western blot技术分析AdipoR1、AdipoR2、PPAR及C/EBP蛋白表达的变化。 结果:1、原代培养SD大鼠前脂肪细胞成功。油红0染色结果呈阳性。该细胞可成功诱导为成熟脂肪细胞。为整个实验提供了平台。2、将前脂肪细胞分组后,每一次刺激结束都用MTT法检测各组吸光值,通过6次的刺激,画出各组细胞经过不同力度刺激后的生长曲线,观察细胞活力变化,结果随着力学刺激的梯度增大,前脂肪细胞的增殖也受到抑制,并且刺激力度与增殖抑制率成正相关;其中150R/min组与180R/min组虽然细胞活力低于正常组,但在两两比较中无统计学差异。经分析得出结论:按摩力学刺激越大,前脂肪细胞活力越低,增殖抑制率越高(P0.05);高转速组(150R/min组与180R/min组)与其他实验组对比无统计学差异。3、RT-PCR半定量分析各转速组别间的C/EBP、PPAR、AdipodR1、 AdipodR2、基因表达水平的变化,①C/EBP基因的表达:实验组(60R/min组、90R/min组、120R/min组、150R/min组、80R/min组)与对照组OR/min组相比,C/EBP的表达水平均低于OR/min组,且随着刺激力度的增加其表达呈逐步下调趋势,统计分析有显著差异(P0.05)各组两两对比也存在显著差异。PPAR基因的表达:与OR组相比,实验组PAR随着力学刺激的增强表达水平呈下降趋势,有显著差异(P0.05);各组两两对比也存在显著差异。③Adipod R1基因的表达:与OR组相比,实验组Adipod R1随着力学刺激的增强表达水平呈下降趋势,有显著差异(P0.05);各组两两对比也存在显著差异。④AdipodR2基因的表达:与OR组相比,实验组Adipod R2随着力学刺激的增强表达水平呈下降趋势,有显著差异(P0.05);各组两两对比也存在显著差异。4、Western Blot免疫印迹实验分析各转速组别间的C/EBP、PPAR、 AdipodR1、AdipodR2、蛋白表达水平的变化,①C/EBP蛋白的表达:实验组(60R/min组、90R/min组、120R/min组、150R/min组、180R/min组)与对照组OR/min组相比,C/EBP的表达水平均低于OR组,随着力学刺激的增强其表达呈下调趋势,统计学有显著差异(P0.05);各组两两对比也存在显著差异。②PPAR蛋白的表达:与OR组相比,实验组PPAR随着力学刺激的增强其表达水平呈下降趋势,统计分析有显著差异(P0.05);各组两两对比也存在显著差异。③AdipodR1蛋白的表达:与OR组相比,实验组Adipod R1随着力学刺激的增强其表达水平呈下降趋势,统计分析有显著差异(P0.05):各组两两对比也存在显著差异。④AdipodR2蛋白的表达:与OR组相比,实验组AdipodR2随着力学刺激的增强其表达水平呈下降趋势,统计分析有显著差异(P0.05);各组两两对比也存在显著差异。 结论:1、体外模拟推拿按摩动态力学刺激可以抑制前脂肪细胞的增殖。动态力学刺激通过抑制前脂肪细胞的增殖可能是推拿防治单纯性肥胖病症的机制之一2、前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞并且贮存能量是肥胖发生的必经途径。实验显示前脂肪细胞可以感受按摩力学刺激,从而减弱PPAR和C/EBP、Adipod R1、 Adipod R2基因和蛋白的表达,有效的证明了推拿按摩力学刺激可以参与前脂肪细胞分化、进一步证明了,在体外按摩力学的干扰下,前脂肪细胞在向成熟脂肪细胞分化的过程得到了有效地抑制,说明前脂肪细胞可以主动参与和适应生长环境中力学环境的变化这可能是推拿按摩防治肥胖的重要机理之一。
【学位授予单位】:贵阳中医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R244.1

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴华;肥胖症遗传学基础研究进展[J];国外医学.内分泌学分册;2003年05期
2 杨义生,陈家伦;脂肪组织基因组水平研究若干进展[J];国外医学.内分泌学分册;2004年06期
3 周立红;张铁梅;;脂肪组织生物学功能的研究进展[J];国外医学(老年医学分册);2006年02期
4 蔡教英;刘姚;王文君;杨武英;;3T3-L1前脂肪细胞在功能性成分评价中的应用[J];食品科学;2011年21期
5 黄雪梅,龙国文,邓映霞,肖云武,翦辉,夏红,成放群,龙辉,朱哲;肥胖儿童脂肪餐后血脂动态变化与体质量指数相关性研究[J];实用儿科临床杂志;2005年11期
6 季东林;李晓琼;郭锡熔;张敏;王玢;陈荣华;;脂联素受体1基因在大鼠脂肪组织中的表达及其与肥胖易感性的关系[J];实用儿科临床杂志;2006年11期
7 周春柳;脂肪细胞因子与肥胖及能量代谢的研究进展[J];体育科技;2005年02期
8 杨智;刘昭前;;PPARγ在脂肪细胞分化和糖脂代谢中的作用[J];国际病理科学与临床杂志;2008年01期
9 屈晓冰;高洁;赵水平;;脂肪组织和脂肪细胞因子的研究进展[J];国际病理科学与临床杂志;2008年04期
10 鞠大鹏;詹丽杏;;脂肪细胞分化及其调控的研究进展[J];中国细胞生物学学报;2010年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨小红;王素利;张伟程;;中医药对2型糖尿病胰岛β细胞功能的早期保护研究进展[J];中医药临床杂志;2010年03期
2 张丽;许国焕;郭慧青;吴月嫦;江永明;;PPARs调控剂对加州鲈生长及糖脂代谢的影响[J];淡水渔业;2012年03期
3 谭晓艳;刘冬梅;徐凌忠;;基于5-2-1-0模式的儿童肥胖干预方法介绍[J];中国儿童保健杂志;2011年11期
4 张德太;宋斌;张科;汪宇;胡丽华;;肥胖合并2型糖尿病血清游离脂肪酸、超敏C反应蛋白的变化及临床意义[J];国际检验医学杂志;2011年20期
5 刘品;李超;黄吉芹;吉红;;草鱼成熟脂肪细胞总RNA提取方法研究[J];淡水渔业;2013年01期
6 程方荣;宋颍涛;;生物力学研究进展[J];河南师范大学学报(自然科学版);2010年04期
7 方文良;鞠志花;黄金明;王长法;李建斌;仲跻峰;冯羊;何剑斌;李秋玲;;过氧化物酶体增殖剂激活受体的研究进展[J];家畜生态学报;2011年03期
8 谢西梅;陈波;崔瑾;杨运宽;;体外模拟动态力学刺激对SD幼鼠前脂肪细胞生长活力影响的研究[J];辽宁中医杂志;2011年07期
9 张俊华;傅赞;吴新权;石毅;白剑峰;孙跃明;;内脂素对人胆管癌细胞QBC939侵袭及增殖影响的体外研究[J];南京医科大学学报(自然科学版);2011年06期
10 郭常虹;温雅俐;杜瑞平;高民;;脂肪组织的内分泌功能及其与肌肉组织间的分子信号联系[J];畜牧与饲料科学;2010年01期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 万进;王文清;施春阳;李艳艳;方建国;;鄂产荷叶活性成分含量测定及其荷叶碱对3T3-L1细胞增殖的影响研究[A];2010年全国中药学术研讨会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 曹冬兴;肾上腺素受体β1亚型(ADRB1)在肿瘤恶病质脂肪消耗过程中的作用和机制研究[D];复旦大学;2011年
2 黄庆生;糖蛋白Iba介导黯附和信号转导的结构的分子动力学模拟[D];中山大学;2011年
3 屈晓冰;载脂蛋白M基因表达影响因素及其血浓度与冠状动脉疾病相关性研究[D];中南大学;2007年
4 梁琳琅;代谢综合征患者脂联素、视黄醇结合蛋白4表达及其性别差异的机制研究[D];第三军医大学;2008年
5 付苏;脂肪来源基质血管成分细胞与脂肪颗粒共移植后的生物学转归[D];北京协和医学院;2013年
6 赵紫琴;替米沙坦对OLETF大鼠皮下和内脏脂肪组织前炎症因子表达的影响及其部位差异性[D];天津医科大学;2013年
7 左伟;脂联素对骨关节炎滑膜细胞及软骨干细胞作用的研究[D];北京协和医学院;2013年
8 赵阳;hADSCs与乳腺癌MCF-7、BT474细胞旁分泌机制影响的体外实验研究[D];南方医科大学;2013年
9 龙健;脂联素抑制胰岛β细胞脂性凋亡及其机制研究[D];重庆医科大学;2012年
10 吴瑶;蛋白化学交联的分子模拟方法及抗糖尿病靶标PPARγ新作用机制的综合研究[D];北京协和医学院;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 谢西梅;体外动态力学刺激对SD幼鼠前脂肪细胞活力、增殖、凋亡及TNF-a表达释放影响的研究[D];贵阳中医学院;2009年
2 卢婷;甘精、地特和人胰岛素对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响[D];山西医科大学;2011年
3 高磊;电针和穴位埋线对单纯性肥胖大鼠脂代谢紊乱的影响[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
4 宋玮;冠心病患者腹部内脏脂肪与血浆致动脉粥样硬化指数的相关性研究[D];河北医科大学;2011年
5 杨威;清热祛湿法对新诊断2型糖尿病湿热证的疗效观察[D];辽宁中医药大学;2011年
6 章卒军;能量限制和高能量培养对HepG2细胞sirtuins家族表达的影响[D];汕头大学;2011年
7 宋敏;SIRT1基因与脂肪细胞胰岛素受体的关系[D];汕头大学;2011年
8 于涛;红花提取物对激素诱导骨髓间充质干细胞成脂分化的干预作用[D];福建中医药大学;2011年
9 孙明星;拉伸刺激对舌鳞癌Tca8113细胞侵袭力及MMP-2表达的影响[D];山西医科大学;2012年
10 苏晓青;单纯性肥胖病(无并发症)辨证及针灸施治规范化的初步研究[D];南京中医药大学;2006年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李珊,贾国良,边忠龙;老年冠心病患者餐后血脂变化及其对血小板活性的影响[J];中国医师杂志;2004年09期
2 李洪鹏,许建中,周强,罗飞,宋晋刚,何清义,尹芝华;流体剪切应力对人骨髓间充质干细胞增值及细胞周期的影响[J];第三军医大学学报;2005年16期
3 蔡勇;阿依木古丽;杨具田;马忠仁;卢建雄;臧荣鑫;吴建平;;绵羊前体脂肪细胞的原代培养及分化[J];动物营养学报;2010年06期
4 刘晓海;董志;付洁民;;PPAR的结构及其与疾病的关系[J];国外医学(药学分册);2007年03期
5 王鑫;刘秀华;;前脂肪细胞的增殖、分化及其调控[J];淮海医药;2006年04期
6 商周春;王宇祥;郭琳;王宁;李辉;;鸡脂肪细胞分化调控的研究进展[J];黑龙江畜牧兽医;2011年03期
7 Michael J.Quon;;从治疗干预的角度评价胰岛素抵抗与内皮功能紊乱的相互关系(英文)[J];中南大学学报(医学版);2006年03期
8 郑奕迎;刘声远;马兰;龙儒桃;;维生素E抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化[J];海南医学院学报;2010年09期
9 戚孟春,胡静,邹淑娟,韩力赤,罗恩;大鼠骨髓间充质干细胞和颅骨成骨细胞在张应力下细胞骨架的改变[J];华西口腔医学杂志;2005年02期
10 陈婷;靳彦文;瞿秀华;崔艳;李大培;何章荣;朱晓辉;曹诚;;胎球蛋白A的纯化及其对3T3-L1脂肪细胞胰岛素通路的抑制作用[J];解放军医学杂志;2010年07期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 蒋淳;应用微重力旋转培养系统构建组织工程软骨的实验研究[D];复旦大学;2005年
2 韩立赤;张应力诱导大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化的实验研究[D];四川大学;2005年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 白涛;杨静;王艳玲;高宇平;吕吉元;;雌二醇对脂肪细胞脂联素mRNA表达的影响[J];中西医结合心脑血管病杂志;2008年06期
2 刘红霞;吴中耀;杨华胜;颜建华;毛羽翔;王莉菲;;Graves’眼病患者眼眶前脂肪细胞抵抗素诱导的表达[J];眼视光学杂志;2006年03期
3 李爱林;陈学杰;吴小蔚;;超声波对体外培养猪前脂肪细胞增殖分化的抑制效应(英文)[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年07期
4 张丽君;李世敏;黄志立;张琨;;AngⅡ对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响[J];深圳职业技术学院学报;2009年01期
5 佟晓哲;邹阳;;大鼠前脂肪细胞的原代培养[J];辽宁中医杂志;2010年02期
6 王曜晖;秦娜琳;郑海燕;刘声远;;改进的“天花板”组织块培养法与消化培养法培养前脂肪细胞的对比研究[J];南京医科大学学报(自然科学版);2010年03期
7 刘红霞;吴中耀;杨华胜;颜建华;毛羽翔;王莉菲;林征;;甲状腺相关眼病患者眼眶脂肪抵抗素的表达[J];中山大学学报(医学科学版);2006年03期
8 卢婷;杨静;;甘精、地特和人胰岛素对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响[J];中西医结合心脑血管病杂志;2011年05期
9 王鑫;刘秀华;;前脂肪细胞的增殖、分化及其调控[J];淮海医药;2006年04期
10 雷翔;许雪亮;;两种方法培养人眼眶前脂肪细胞的比较[J];国际眼科杂志;2007年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周虎;洪尚宇;廖侃;夏其昌;曾嵘;;3T3-L1脂肪细胞及前脂肪细胞的分泌蛋白质的大规模鉴定[A];中国蛋白质组学首届学术大会论文摘要集[C];2003年
2 黎明;阴津华;吴从愿;;人网膜前脂肪细胞的分化、基因表达和脂肪因子分泌的研究[A];2008内分泌代谢性疾病系列研讨会暨中青年英文论坛论文汇编[C];2008年
3 宋沙;冯丽萍;苏华维;曹兵海;;油酸对肉牛肾周前脂肪细胞增殖与分化的影响[A];中国畜牧兽医学会养牛学分会2011年学术研讨会论文集[C];2011年
4 胡锐;张恩户;李宝莉;刘继平;;沙棘脂肪酸对3T3-L1前脂肪细胞增值及细胞内钙水平的影响[A];中华中医药学会中药实验药理分会第八届学术会议论文摘要汇编[C];2009年
5 马晓莉;母义明;汪保安;窦京涛;陆菊明;潘长玉;;LRP16基因增加脂肪细胞胰岛素抵抗机制的研究[A];2008内分泌代谢性疾病系列研讨会暨中青年英文论坛论文汇编[C];2008年
6 李爱林;陕声国;何宜新;;组织工程化前脂肪细胞移植的实验研究[A];第十一次湖北省整形外科学术会议第四次湖北省医学美容学术会议论文汇编[C];2004年
7 卜艳红;唐爱国;;IRS-1对小鼠前脂肪细胞与前成骨细胞分化过程中的作用与机制[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
8 李爱林;陈学杰;王松山;龙道畴;;超声波对猪前脂肪细胞体外培养与增殖的影响[A];中国美容与整形医师大会论文汇编[C];2005年
9 毋巨龙;李世荣;;重组人bFGF对植入裸鼠体内前脂肪细胞成脂作用的影响[A];第七届中国医师协会美容与整形医师大会论文集[C];2010年
10 杨静;阴津华;;小檗碱对人前脂肪细胞增殖、分化和脂肪细胞因子表达的影响[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 衣晓峰;推拿按摩虽好并非人人皆宜[N];健康报;2004年
2 特约记者 衣晓峰;推拿按摩并非人人皆宜[N];家庭医生报;2004年
3 李建;推拿按摩能调节小儿脾胃[N];健康时报;2006年
4 本报记者 王文郁;颈椎病不能随意推拿按摩[N];中国消费者报;2003年
5 史路明;古稀老人的枕头经[N];保健时报;2007年
6 高岭 宏伟 立欣;爱心接力十二载[N];唐山劳动日报;2007年
7 记者 厉秀昀;保障人民利益 维护中医声誉[N];中国中医药报;2005年
8 本报记者 俞莹 刘昶;在指掌间追寻“创业梦”[N];贵阳日报;2007年
9 李建 翟世翠;推拿按摩调理小儿脾胃[N];家庭医生报;2006年
10 孙敬青 谢新才;推拿按摩 莫忘禁忌[N];家庭医生报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陶梅梅;三种核苷类逆转录酶抑制剂对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化及分泌脂肪因子的影响[D];中国协和医科大学;2008年
2 朱晓峰;自体游离脂肪移植的实验研究和临床观察[D];中国协和医科大学;1996年
3 刘静;Ghrelin在肥胖发生机制中的实验研究及临床意义探讨[D];华中科技大学;2009年
4 杨月;GLP-1对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化的影响[D];北京协和医学院;2009年
5 张旭喆;肌肉生长抑素对小鼠前脂肪细胞3T3-L1增殖和分化的影响[D];北京协和医学院;2009年
6 温宇;促酰化蛋白—受体C5L2在脂肪细胞分化和胰岛素抵抗中的作用研究[D];华中科技大学;2007年
7 陈月;蛋白酪氨酸磷酸酶1B在3T3-L1前脂肪细胞分化中的作用研究[D];第二军医大学;2007年
8 张学进;眼眶前脂肪细胞在甲状腺相关眼病发病机理中作用的研究[D];四川大学;2004年
9 毋巨龙;bFGF对前脂肪细胞的体外培养、在体移植和自体脂肪微粒注射的作用研究[D];第三军医大学;2007年
10 雷翔;甲状腺相关眼病眼眶前脂肪细胞分化与HLA-DR相关因素的研究[D];中南大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周烨泓;按摩动态力学刺激防治肥胖对前脂肪细胞增殖和分化功能的影响及机制研究[D];贵阳中医学院;2013年
2 谢西梅;体外动态力学刺激对SD幼鼠前脂肪细胞活力、增殖、凋亡及TNF-a表达释放影响的研究[D];贵阳中医学院;2009年
3 王鸿;小鼠3T3-L1的培养、鉴定及小檗碱对其增殖分化的影响[D];山西医科大学;2004年
4 郭栋振;小鼠分娩期子宫颈组织中前脂肪细胞的分布及前脂肪细胞与巨噬细胞的超微结构观察[D];山东农业大学;2013年
5 郭常虹;反10,顺12-共轭亚油酸对猪不同部位前脂肪细胞增殖、分化及脂肪代谢关键酶的影响[D];内蒙古农业大学;2010年
6 唐浩能;神经肽Y对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响及其作用机制的研究[D];中南大学;2012年
7 谢西梅;体外动态学刺激对SD幼鼠前脂肪细胞活力、增殖、凋亡及TNF-a表达释放影响的研究[D];贵阳中医学院;2009年
8 宋彬;曲格列酮对人大网膜前脂肪细胞增殖和分化的影响[D];山西医科大学;2005年
9 杨孝良;瘦素对人前脂肪细胞增殖及分化的影响[D];南昌大学;2008年
10 阴津华;小檗碱对人大网膜前脂肪细胞增殖与分化的影响[D];山西医科大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026